秦宇
(青海大學生態環境工程學院,西寧 810016)
過氧化氫酶(CAT)在各類生物的抗氧化防御系統中占據著重要的地位,可以催化H2O2和其他氧化物在體內分解代謝,具有保護機體的作用[1]。丙二醛(MAD)是在機體的膜結構中的物質受到氧自由基攻擊時產生的一類物質,與機體受氧自由基攻擊的程度密切相關。
Cr6+是一種劇毒類物質,對機體有致癌作用。當Cr6+進入機體后,能夠被還原為Cr3+,伴有Cr5+中間體及大量自由基的產生[2]。
目前為止,尚未見有關重鉻酸鉀對小鼠不同組織內過氧化氫酶和丙二醛的影響的報道,因此本實驗以小鼠心、肝、肺及腎離體組織為實驗材料,探究重鉻酸鉀對小鼠不同組織內過氧化氫酶和丙二醛的影響[3]。
1.1.1 實驗動物
昆明白化小鼠購置于蘭州大學動物研究中心。
1.1.2 試劑及儀器
CAT試劑盒(南京建成)、MDA試劑盒(南京建成)、勻漿器(T18BS25)、漩渦混勻器(MVS-1)、可見紫外分光光度計(722S)。
1.2.1 實驗動物處理
將實驗動物處死,立即取出心、肝、肺及腎4種組織,生理鹽水沖洗并剪碎,以質量體積比1∶9 的比例加入生理鹽水,冰浴條件下勻漿,4℃、8000 r/min下離心13 min,取其上清液[4]。將不同動物不同組織分為4個組,即高、中、低3個染毒組和一個對照組,高劑量組的組織內鉻離子達到8 mg/g,中劑量組和低劑量組分別為4 mg/g和2 mg/g。
1.2.2 總蛋白質濃度的測定(采用BCA法進行測定)
參照蛋白定量測試盒進行測定并計算總蛋白量。

1.2.3 CAT和MDA活性測定
參照試劑說明書進行測定。
1.2.4 數據處理
在SPSS軟件進行數據分析,實驗數據以平均值±標準差(±S)表示,并用t-檢驗進行差異性分析。
實驗結果見表1和表2。

表1 Cr6+對CAT活性的影響

表2 Cr6+對MDA活性的影響
在本實驗中Cr6+使小鼠心、腎、肺和肝4種組織中CAT和MDA活性顯著提高,與對照組相比差異極顯著(P<0.01);且隨著Cr6+濃度的增加4種離體組織中CAT活性增強,MDA含量也增加。文獻報導經重金屬Cd處理后的小鼠其腎臟中CAT活性增強[5]。CAT對有害環境因子所表現出來的這樣的生態效應被認為是生物體在有害因子作用下的一種自身保護性反應。生物體內的脂質過氧化程度與CAT活性和MAD含量密切相關,一定程度上反映出Cr6+對生物機體的毒害作用。對小鼠體內加入重鉻酸鉀使其體內的CAT活性和MDA含量發生變化的具體原因有待進一步研究。