IMA與SCUBE1聯(lián)合檢測(cè)在急性肺栓塞診斷中的價(jià)值

崔 波 靳 斐 王莉格

急性肺栓塞(acute pulmonary embolism，APE)是呼吸系統(tǒng)常見的急重癥之一，主要由于內(nèi)源性或外源性栓子堵塞肺動(dòng)脈主干或分支引起的肺循環(huán)障礙疾病[1]。APE在臨床上主要表現(xiàn)為肺血栓栓塞、脂肪栓塞綜合征、羊水栓、空氣栓塞等。通常臨床上所說的肺栓塞主要指的是肺血栓栓塞[2]。肺栓塞是造成人類死亡的重大疾病，僅次于冠心病和腫瘤，嚴(yán)重危害公共健康[3]。APE臨床表現(xiàn)具有隱匿性和復(fù)雜性，給其早期診斷帶來了極大困難，因此尋找特異性診斷指標(biāo)對(duì)APE早期診斷至關(guān)重要。研究[4-5]發(fā)現(xiàn)，肺栓塞的發(fā)生和發(fā)展與缺血修飾性白蛋白(ischemia modified albumin,IMA)和新型血小板活化蛋白血漿內(nèi)皮生長(zhǎng)因子樣單鏈蛋白1相關(guān)補(bǔ)體Clr/Cls單肽(signal peptide-CUB-EGF domain-containing protein 1,SCUBE1)水平升高密切相關(guān)。本研究通過分析APE患者和健康者IMA和SCUBE1的水平，擬評(píng)估其聯(lián)合檢測(cè)對(duì)APE的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年6月至2017年3月邢臺(tái)市第三醫(yī)院呼吸科就診的APE患者130例為病例組，其中男性76例，女性54例，年齡34～76歲；同時(shí)選取同期年齡相似的健康體檢者為對(duì)照組(48例)，其中男性21例，女性27例，年齡32～74歲。病例組和對(duì)照組性別、年齡等方面的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)過院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均自愿參加本研究，且簽署知情同意書；所有APE患者經(jīng)過肺動(dòng)脈造影和核磁共振確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：急性冠脈綜合征、嚴(yán)重心臟疾病、肝腎疾病、血液系統(tǒng)疾病、腫瘤、慢性肺栓塞等患者。

1.3 方法 所有對(duì)象于入院4 h內(nèi)采集6 mL的外周靜脈血，其中3 mL注入含有0.109 mol/L的枸櫞酸鈉抗凝試管中，分離血清、血漿。血清IMA水平采用分光光度法測(cè)定，取20 μL血清樣本，加入50 μL 0.1% 氯化鈷室溫反應(yīng)10 min，加入50 μL二硫蘇糖醇(1.5 mg/mL)室溫反應(yīng)2 min，最后加入1 mL 0.9% NaCl中止反應(yīng)，應(yīng)用分光光度計(jì)470 nm下空白調(diào)零，測(cè)定樣品吸光度值，并計(jì)算出IMA水平。氯化鈷和二硫蘇糖醇試劑均購(gòu)自上海生物工程股份有限公司。采用ELISA試劑盒測(cè)定血漿SCUBE1水平，試劑盒購(gòu)自上海撫生實(shí)業(yè)有限公司，具體操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) IMA水平< 63.30 U/mL為陰性，≥ 63.30 U/mL為陽(yáng)性；SCUBE1水平< 46 ng/mL為陰性，≥ 46 ng/mL為陽(yáng)性。

1.5 觀察指標(biāo) 檢測(cè)病例組和對(duì)照組血清IMA和血漿SCUBE1的水平。

2 結(jié)果

2.1 IMA及SCUBE1水平比較 病例組患者IMA和SCUBE1水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 病例組與對(duì)照組IMA及SCUBE1水平比較

2.2 IMA與SCUBE1指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用的敏感度、特異度和準(zhǔn)確度比較 使用IMA水平判斷APE，病例組陽(yáng)性87例，陰性43例；對(duì)照組陽(yáng)性11例，陰性37例。用SCUBE1水平判斷APE，病例組陽(yáng)性88例，陰性42例；對(duì)照組陽(yáng)性13例，陰性35例。聯(lián)合檢測(cè)IMA與SCUBE1水平判斷APE，病例組陽(yáng)性100例，陰性30例；對(duì)照組陽(yáng)性7例，陰性41例。IMA單獨(dú)診斷APE的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為66.92%、77.08%、69.66%、88.78%和46.25%。SCUBE1單獨(dú)診斷APE的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為67.69%、72.91%、69.10%、87.13%和45.45%。IMA與SCUBE1聯(lián)合檢測(cè)診斷APE的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為76.92%、85.42%、79.21%、93.46%和57.75%。IMA與SCUBE1聯(lián)合檢測(cè)診斷APE的敏感度、特異度和準(zhǔn)確度高于IMA或SCUBE1單獨(dú)應(yīng)用(P<0.05)。

2.3 IMA、SCUBE1指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用的ROC曲線分析 IMA、SCUBE1指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用診斷APE的ROC曲線的曲線下面積分別為0.796、0.839和0.888(均大于0.7)。見圖1。

圖1 IMA、SCUBE1指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用診斷APE的ROC曲線

3 討論

APE是一種常見的心血管疾病，病死率為7% ～ 11%，若不及時(shí)治療，病死率可達(dá)30%，因此，早期診斷對(duì)改善APE患者的預(yù)后非常重要[6]。目前，診斷APE的主要手段為肺動(dòng)脈造影，但其對(duì)于小分支肺栓塞的敏感度和特異度較低，且耗時(shí)較長(zhǎng)、檢查費(fèi)用昂貴[7]。因此，尋求快速、經(jīng)濟(jì)、有效的生物指標(biāo)對(duì)APE的早期診斷至關(guān)重要。

IMA是由活性氧自由基對(duì)白蛋白修飾后形成，常用作診斷組織缺血的生物指標(biāo)[8]。正常情況下，IMA在機(jī)體中含量極少。但當(dāng)機(jī)體受到缺血/再灌注損傷時(shí)，組織缺氧進(jìn)行無氧代謝，體內(nèi)的ATP生成減少，乳酸等代謝產(chǎn)物在體內(nèi)累積，導(dǎo)致大量的Cu2+、Fe2+進(jìn)入血液中，Cu2+在維生素C等還原劑的作用下被還原成Cu+，血液中人血清白蛋白的氨基末端與銅離子結(jié)合，形成IMA。2003年美國(guó)食品藥物管理局批準(zhǔn)將IMA作為急性冠動(dòng)脈綜合征的排除診斷指標(biāo)。研究[9]表明，IMA不僅是心肌缺血的代謝產(chǎn)物，與其他缺血性疾病(腦卒中、APE等)的發(fā)生和發(fā)展也密切相關(guān)。Turedi等[10]發(fā)現(xiàn),APE患者血清中IMA水平顯著升高，IMA診斷APE的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值明顯高于D-二聚體診斷APE的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值。此外，APE患者血清中IMA的水平與肺動(dòng)脈梗阻指數(shù)呈正相關(guān)[11]。李賓公等[12]發(fā)現(xiàn)，APE患者血漿IMA水平高于健康者，IMA可作為APE的診斷標(biāo)志物。侯麗超等[13]發(fā)現(xiàn)血清IMA水平在高危、中危、低危組APE患者中具有顯著性差異，有助于APE的早期診斷和APE的危險(xiǎn)分層。本研究發(fā)現(xiàn)，APE患者IMA水平明顯高于對(duì)照組(P< 0.05)。

SCUBE家族主要有SCUBE1、SCUBE2和SCUBE3 3個(gè)成員[14]。SCUBE1是血小板內(nèi)皮分泌的一種異常蛋白，其含量隨著血小板的激活而升高[15]。SCUBE1由一個(gè)氨基末端信號(hào)肽，一個(gè)羧基末端CUB結(jié)構(gòu)域和9個(gè)EGF樣重復(fù)序列組成[16]。SCUBE1在血小板內(nèi)高表達(dá)，儲(chǔ)存在未被激活的血小板α顆粒，當(dāng)血小板被凝血酶激活后，SCUBE1分子改變其分布位置，轉(zhuǎn)移到血小板表面，然后水解成小分子可溶性顆粒，參與血栓形成過程中血小板的凝集[17]。SCUBE1已被證明在心血管疾病(冠狀動(dòng)脈綜合征、缺血性腦卒中)中扮演著重要的角色[18-19]。Turkmen等[20]發(fā)現(xiàn)，急性缺血性腦卒中患者發(fā)病后1 h內(nèi)血漿中SCUBE1的水平迅速升高，SCUBE1可以作為急性缺血性腦卒中的早期診斷標(biāo)志物。急性腸系膜缺血患者發(fā)病2 h后，血漿中SCUBE1水平顯著升高，SCUBE1可以作為診斷急性腸系膜缺血早期損傷的標(biāo)記[21]。Dai等[22]發(fā)現(xiàn)在健康人和慢性冠狀血管疾病患者的血漿中SCUBE1水平幾乎不存在，而在冠狀動(dòng)脈綜合征和缺血性腦卒中患者血漿中SCUBE1水平顯著升高。在急性血栓性疾病中，血漿中SCUBE1是血小板活化的潛在生物標(biāo)記物。Wu等[23]發(fā)現(xiàn)SCUBE1通過參與血小板的凝結(jié)，從而參與血栓形成，在小鼠中抑制SCUBE1表達(dá)可以減少動(dòng)脈血栓的形成。在本研究中，APE患者SCUBE1水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。

本研究結(jié)果顯示，APE患者IMA和SCUBE1水平明顯高于對(duì)照組，IMA、SCUBE1指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用診斷APE的ROC曲線曲線下面積分別為0.796、0.839和0.888，提示IMA、SCUBE1指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用對(duì)APE的診斷效果優(yōu)于IMA或SCUBE1指標(biāo)單獨(dú)應(yīng)用。綜上所述，血清IMA與血漿SCUBE1的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)APE的診斷優(yōu)于單一指標(biāo)檢測(cè)，有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。