注射用馬來酸桂哌齊特工藝研究

劉風韻, 可成友

(沈陽化工大學 制藥與生物工程學院， 遼寧 沈陽 110142)

近年來，心腦血管病發病率和致死率逐年升高，心腦血管類藥物的研發及工藝改造面臨著更高的要求和挑戰.馬來酸桂哌齊特是新一代的哌嗪類藥物，其在腦血管疾病[1-5]、心血管疾病[6-9]、外周血管疾病[10]等方面的治療效果已得到國內外認可，是目前治療心腦血管類疾病的一線藥物.目前，國內市售的馬來酸桂哌齊特注射液均為水針劑，關于馬來酸桂哌齊特凍干劑的研究極少 .為滿足臨床用藥需求，提高產品穩定性，填補凍干劑型市場空白，本文對馬來酸桂哌齊特凍干劑的工藝進行了研究.

1 實驗部分

1.1 藥品、試劑、儀器及設備

馬來酸桂哌齊特標準品(質量分數為99.76 %)、馬來酸桂哌齊特順式異構體(質量分數97.18 %)，上海江萊生物科技有限公司；馬來酸桂哌齊特(質量分數99.21 %)，武漢風竹林化學科技有限公司；山梨醇，山東壽光市華力糖醇有限公司；氫氧化鈉(分析純)，國藥集團；活性炭，唐山華能科技炭業有限公司.

PHS-3C型pH計，上海精密科學儀器有限公司；BSA224S-CW型電子分析天平，賽多利斯公司；RE-52型玻璃雙蒸水器，上海亞榮旋轉蒸發器；xt20595型冷凍干燥機，北京百思佳特科技有限責任公司；LC20A型HPLC，島津公司.

1.2 實驗方法

1.2.1 溶液制備工藝

分別制備無輔料馬來酸桂哌齊特溶液和添加山梨醇或甘露醇的馬來酸桂哌齊特溶液：

(1)制備規格80 mg/支： 室溫下，稱量馬來酸桂哌齊特80 g，無輔料或加入輔料(山梨醇或甘露醇)60 g，溶于1 200 mL注射用水中；用1 mol/L氫氧化鈉溶液調節pH值為4±0.5，加水至2 000 mL，混勻；加入100 g的活性炭，在50 ℃下，攪拌吸附20 min，用雙層濾紙脫碳過濾；用0.22 μm微孔濾膜除菌過濾；分裝成2 mL/支，置5 mL西林瓶中.

(2)制備規格320 mg/支： 室溫下，稱量馬來酸桂哌齊特320 g，無輔料或加入輔料(山梨醇或甘露醇)300 g，溶于4 800 mL注射用水中；用 1 mol/L氫氧化鈉溶液調節pH值為4±0.5，加水至10 000 mL，混勻；加入500 g的活性炭，在50 ℃下攪拌吸附20 min，用雙層濾紙脫碳過濾；用0.22 μm微孔濾膜除菌過濾；分裝成10 mL/支，置20 mL西林瓶中.

1.2.2 凍干工藝

將西林瓶放在隔板上，隔板溫度設為0 ℃；封閉干燥，隔板溫度從0 ℃降至-35 ℃，對凍干溶液進行固化4 h；打開冷阱，維持18 h；將隔板溫度依次升至-5 ℃、20 ℃、40 ℃，且隔板在3個溫度水平分別維持5 h、4 h、2 h；封蓋，避光保存.

1.2.3 檢測方法

文中馬來酸桂哌齊特質量分數(以下簡寫為“含量”)、pH值、水分及有關物質均依據馬來酸桂哌齊特注射液國家藥品標準[WS1-(X-328)-2004Z]進行測定.

水溶液pH值測定：取3.2 g馬來酸桂哌齊特干粉溶于100 mL水中，pH值應為3.5～4.5(中國藥典2010年版二部附錄Ⅵ H).

有關物質測定：避光操作.取含量測定項下的供試品溶液作為供試品溶液；精密量取供試品溶液1 mL，置100 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液.按照含量測定項下的方法測定，精密量取對照溶液20 μL注入液相色譜儀，調節檢測靈敏度，使主成分峰的峰高約為滿量程的20 %；再精密量取供試品溶液和對照溶液各20 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至供試品溶液主峰保留時間的2倍.供試品溶液色譜圖中，順式異構體峰面積不得大于對照溶液主峰面積的1/2；其他單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積的1/10；其他未知雜質峰面積之和不得大于對照溶液主峰面積的1/2.

水分測定：取注射用馬來酸桂哌齊特，按照水分測定法(中國藥典2010版附錄Ⅷ M 第一法A)測定，含水分不得過1.0 %(質量分數).

馬來酸桂哌齊特質量分數測定：按照高效液相色譜法(中國藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)測定.

色譜條件與系統適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈和0.05 mol/L磷酸氫二鈉緩沖液(用磷酸調pH值至4.5±0.1,體積比為40∶60)為流動相，檢測波長為230 nm，柱溫30 ℃.精密稱取馬來酸桂哌齊特順式異構體對照品適量，加流動相制成每1 mL中約含0.2 mg馬來酸桂哌齊特順勢異構體的溶液(A)；精密量取溶液(A)1 mL，此溶液置50 mL量瓶中，加對照品溶液稀釋至刻度，搖勻，作為系統適用性試驗溶液(B)；精密量取溶液(B)20 μL注入液相色譜儀，理論板數按馬來酸桂哌齊特峰計算，一般不低于5 000，馬來酸桂哌齊特與順式異構體的分離度應大于1.5.

馬來酸桂哌齊特質量分數測定法：避光操作.取馬來酸桂哌齊特注射劑40 mg精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動相溶解后，稀釋制至刻度，搖勻，精密量取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取馬來酸桂哌齊特對照品適量，同法測定.按外標法以峰面積計算，即得馬來酸桂哌齊特質量分數，含馬來酸桂哌齊特應為標示量的95.0 %～105.0 %.

2 結果與討論

文中涉及百分數除主體含量為標示量的百分含量以外，其余均為質量分數.

2.1 輔料的選擇

選用輔料需具有凍干屬性，結合主要雜質馬來酸桂哌齊特順勢異構體的結構特點，選用符合要求的山梨醇和甘露醇兩種輔料進行對比.

按1.2.2方法制備的注射用馬來酸桂哌齊特質量情況見表1.

表1 注射用馬來酸桂哌齊特質量情況Table 1 The quality of maleate injection cinepazide

從表1數據可知：加入輔料的注射用馬來酸桂哌齊特平均含水量比未加入輔料的馬來酸桂哌齊特平均含水量高(均≤1 %)；加入山梨醇的注射用馬來酸桂哌齊特平均主體含量均比加入甘露醇的注射用馬來酸桂哌齊特平均主體含量高，且前者平均雜質總含量均低于后者，所以，選用山梨醇作為凍干劑.

2.2 山梨醇的影響

《輔料大全》中對山梨醇相關性質進行了較為詳盡的闡述，詳見表2.

表2 山梨醇物理性質及用途Table 2 The physical properties and uses of sorbitol

按1.2.2方法制備注射用馬來酸桂哌齊特(80 mg/支)7批，每批8 000 mg，制備完成后于4 500 lx光照條件下放置5 d，其穩定性結果見表3.表3數據顯示：在光照條件(4 500 lx)下，馬來酸桂哌齊特注射劑(80 mg/支)含量降低，雜質增加；在馬來酸桂哌齊特注射劑中加入山梨醇后，對雜質增加程度起到緩解作用，且隨山梨醇加入比例增加，雜質增加程度降低.對于320 mg/支規格的馬來酸桂哌齊特注射劑，加入相同量的山梨醇后，其主藥與山梨醇的用量比要小于80 mg/支規格的注射劑，所以，向320 mg/支規格的馬來酸桂哌齊特注射劑中加入相同量的山梨醇，其穩定性應不低于80 mg/支規格的注射劑.

表3 山梨醇不同用量下注射用馬來酸桂哌齊特(80 mg/支)穩定性Table 3 The sorbitol different amount bet Injection(80 mg/branch) Stability

注：光照度4 500 lx.

2.3 凍干劑與水針劑的比較

根據1.2.3的投料情況，規格為80 mg/支和規格為320 mg/支的注射用馬來酸桂哌齊特小試實驗樣品檢測結果分別見表4，表5.

從小試樣品制備及檢驗結果可知：經凍干工藝制備的注射用馬來酸桂哌齊特，主體含量≥99.0 %，pH在3.5～4.5，雜質總含量≤1.0 %，符合國家藥品監督管理局規定的質量標準.

與市售馬來酸桂哌齊特注射劑(規格：2 mL，80 mg，批號2015011629，生產廠家：北京四環制藥有限公司)對比結果見表6.

表4 小試實驗樣品檢測結果(規格：80 mg/支)Table 4 The small scale experimental sample test results (Specifications:80 mg/support)

表5 小試實驗樣品檢測結果(規格：320 mg/支)Table 5 The small scale experimental sample test results (Specifications:320 mg/support)

從表6對比結果可知：自制樣品含量與市售品接近，主要雜質馬來酸桂哌齊特順式異構體含量不高于市售品，其他雜質含量明顯低于市售品.

表6 實驗樣品與市售品情況對比結果Table 6 Test samples and commercially available product comparison results case

3 結 論

(1) 在馬來酸桂哌齊特注射液中加入山梨醇后運用凍干工藝，對馬來酸桂哌齊特注射液主要雜質(馬來酸桂哌齊特順式異構體)增加程度起到緩解作用，即通過加入山梨醇和運用凍干工藝可提高馬來酸桂哌齊特注射液的穩定性.

(2) 注射用馬來酸桂哌齊特工藝路線為：室溫下，將60 g馬來酸桂哌齊特粉末溶于900 mL注射用水中，充分攪拌；用1 mol/L NaOH調節pH值為4±0.5，加水至足量，混勻；加入100 g的活性炭，在50 ℃下攪拌吸附20 min，用雙層濾紙脫碳過濾；用0.22 μm微孔濾膜過濾；使馬來酸桂哌齊特為標示量的95.0 %～105.0 %，pH值調至4±0.5；規格為80 mg/支的分裝成2 mL/支，置5 mL西林瓶中(規格為320 mg/支的分裝成10 mL，置20 mL西林瓶中)；將西林瓶放在隔板上，隔板溫度設為0 ℃；封閉干燥，隔板溫度從0 ℃降至-35 ℃，對凍干溶液進行固化4 h ；打開冷阱，維持18 h；將隔板溫度依次升至-5 ℃、20 ℃、40 ℃溫度水平，且隔板在3個溫度水平分別維持5 h、4 h、2 h；封蓋，避光保存.