探討3種不同檢驗(yàn)方法在不同時(shí)期梅毒檢測(cè)中的敏感性及特異性

吳麗娜 黃麗芳 黃翠梅 賴玉玲 胡雪梅

梅毒的病原體為梅毒螺旋體, 對(duì)于其病原體的直接檢測(cè)目前尚存在困難［1］, 因此, 梅毒的血清學(xué)檢測(cè)在梅毒的早期發(fā)現(xiàn)與篩檢中應(yīng)用很廣, 并且不同的檢測(cè)方法具有不同的特點(diǎn), 對(duì)于各個(gè)臨床時(shí)期的梅毒患者檢測(cè)方法也不盡相同［2-4］。本研究比較TPPA、梅毒螺旋體免疫熒光法抗體定量檢測(cè)、RPR3種不同的梅毒臨床檢測(cè)方法對(duì)于不同時(shí)期梅毒檢測(cè)的敏感性和特異性, 從而為篩選敏感性和特異性較高的診斷方法提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年6月～2017年7月間本院收治的梅毒確診患者共60例作為陽性組。納入標(biāo)準(zhǔn)：梅毒各期患者, 尚未進(jìn)行驅(qū)梅治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：不愿意參加者, 凝血功能障礙者。在這60例樣本中包括一期梅毒35例, 二期梅毒22例, 胎傳梅毒3例。另選取同期60例非梅毒患者作為陰性組, 包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者28例, 新生兒4例, 孕婦15例, 健康人13例。

1.2 方法 在征得受試者同意后, 采集受試者血樣3 ml, 靜置待血液凝固后使用離心機(jī)(白洋離心機(jī)B600A)4000 r/min分離血清后分別進(jìn)行TPPA、梅毒螺旋體免疫熒光法抗體定量檢測(cè)和RPR實(shí)驗(yàn), TPPA檢測(cè)試劑選取日本富士株式會(huì)社生產(chǎn)的梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)試劑盒進(jìn)行, 梅毒螺旋體免疫熒光法抗體定量檢測(cè)試劑由蘇州新波技術(shù)有限公司提供。RPR檢測(cè)試劑由上海科華生物工程股份有限公司提供。檢測(cè)操作由專門的實(shí)驗(yàn)人員嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)結(jié)果一式兩份, 由2名組員使用Epidada 3.0 雙錄入, 后經(jīng)數(shù)據(jù)核查后輸出到SAS 9.4進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 梅毒陽性組的一般情況 梅毒陽性組共60例, 其中男36例, 女24例；年齡4周～53歲；一期梅毒35例, 二期梅毒22例, 胎傳梅毒3例。見表1。

2.2 3 種檢測(cè)方法對(duì)于梅毒的檢測(cè)正確率 RPR檢測(cè)正確率為81.67%, TPPA檢測(cè)正確率為90.83%, 免疫熒光法抗體定量檢測(cè)正確率為85.00%。見表2。

2.3 3 種檢測(cè)方法的敏感性與特異性比較 3種檢測(cè)方法中特異性最高的是TPPA檢測(cè), 為88.3%；一期梅毒的檢測(cè)敏感性最高的是TPPA檢測(cè)與免疫熒光法抗體定量檢測(cè), 均為97.1%, 正確指數(shù)最高的是TPPA檢測(cè), 為85.4%；二期梅毒的檢測(cè)敏感性最高的是TPPA檢測(cè), 為100.0%, 正確指數(shù)最高的是TPPA檢測(cè), 為88.3%；胎傳梅毒的檢測(cè)敏感性最高的是免疫熒光法抗體定量檢測(cè), 為100.0%, 正確指數(shù)最高的是免疫熒光法抗體定量檢測(cè), 為73.3%。見表3。

表1 梅毒陽性組的一般情況(n, %)

表2 3種檢測(cè)方法對(duì)于梅毒的檢測(cè)結(jié)果(n)

表3 三種檢測(cè)方法的敏感性與特異性比較(%)

3 討論

本研究的結(jié)果對(duì)于臨床不同分期的梅毒檢測(cè)具有一定的指導(dǎo)意義, 在研究中觀測(cè)到對(duì)于一期梅毒的檢測(cè), TPPA與免疫熒光法抗體定量的敏感性最高, 而對(duì)于二期梅毒TPPA的正確率最高。對(duì)于胎傳梅毒的檢測(cè), RPR與TPPA的正確指數(shù)都不高, TPPA為對(duì)于梅毒血清免疫球蛋白G(IgG)檢測(cè)為特異性最高的手段［5-8］, 但是由于其無法區(qū)別IgG的胎體或母體來源故而敏感性并不高, 但對(duì)于胎兒年齡＜1歲并且未接受治療者的檢測(cè)結(jié)果為陰性或胎兒母體反映為陰性者可作為排除診斷［9-11］。

相比之下, 免疫熒光法抗體定量的檢測(cè)結(jié)果更加可靠,此外對(duì)于免疫球蛋白M(IgM)的檢測(cè)結(jié)果更為可靠, 相比之于IgG, IgM無法通過胎盤, 且胎兒從24周時(shí)便可以產(chǎn)生特異性的IgM, 故陰性的IgM無法排除胎傳梅毒, 但I(xiàn)gM的陽性結(jié)果可以作為胎傳梅毒感染的確切證據(jù)［12-14］。但由于其對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件與人員技術(shù)水平的要求較高, 而且所用試劑比較昂貴,因此并不適合梅毒的初篩, 并且由于類風(fēng)濕因子等因素的干擾, 其特異度并不高［15，16］。相比之下各項(xiàng)敏感性與特異性都一般的RPR的操作簡(jiǎn)單, 應(yīng)用試劑盒便可完成。故而比較適用于下級(jí)醫(yī)院或是偏遠(yuǎn)地區(qū)的梅毒篩查。

梅毒螺旋體由于無法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng), 且針對(duì)其病原體的檢測(cè)較為困難(兔接種試驗(yàn)要求時(shí)間過長(zhǎng), 而暗視野顯微鏡檢測(cè)螺旋體方式需在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行［17,18］。但由于多數(shù)梅毒感染者為無癥狀或皮損癥狀為一過性, 故而梅毒的血清學(xué)檢測(cè)應(yīng)用更加廣泛。梅毒陽性組男36例，女24例；年齡4周～53歲；一期梅毒35例，二期梅毒22例，胎傳梅毒3例。對(duì)于梅毒檢測(cè)，RPR檢測(cè)正確率為81.67%，TPPA檢測(cè)正確率為90.83%，免疫熒光法抗體定量檢測(cè)正確率為85.00%。3種檢測(cè)方法中特異性最高的是TPPA檢測(cè)，為88.3%；一期梅毒的檢測(cè)敏感性最高的是TPPA檢測(cè)與免疫熒光法抗體定量檢測(cè)，均為97.1%，正確指數(shù)最高的是TPPA檢測(cè)，為85.4%；二期梅毒的檢測(cè)敏感性最高的是TPPA檢測(cè)，為100.0%，正確指數(shù)最高的是TPPA檢測(cè)，為88.3%；其中針對(duì)胎傳梅毒的檢測(cè)3種方法的正確指數(shù)均不高，正確指數(shù)最高的是免疫熒光法抗體定量檢測(cè)，為73.3%，RPR與TPPA的正確指數(shù)分別為13.3%、0，這可能與樣本量過少有關(guān)系。在一項(xiàng)綜述［19］中報(bào)告對(duì)于胎傳梅毒, RPR的靈敏度僅有4%～13%。因此對(duì)于胎傳梅毒的早期檢測(cè), 對(duì)于IgM的血清學(xué)檢測(cè)可能更為可靠, 在一項(xiàng)研究中顯示［20］, 對(duì)于IgM的免疫印跡法, 其靈敏度較高, 而且特異度為100.0%。

綜上所述, 對(duì)于不同階段的梅毒, 3種方法的靈敏度與特異度不全相同, 因此對(duì)于不同時(shí)期梅毒檢測(cè)的應(yīng)用, 應(yīng)當(dāng)根據(jù)患者情況以及當(dāng)?shù)氐牧餍星闆r慎重選擇檢查方法。