氣相色譜-串聯質譜結合QuEChERS方法檢測蔬菜、水果中37種農藥殘留

□ 李 雪 懷化市食品藥品檢驗所

近年來隨著人民群眾生活水平的提高，他們對日常對蔬菜、水果的需求量正呈現逐年增長的趨勢。而為了提高各個季節中蔬菜、水果的產量，種植戶在蔬菜、水果的生長、發育以及運輸貯存過程中廣泛且頻繁使用各種農藥，導致蔬菜、水果表面出現大量的農藥殘留，這對我國人民群眾的身體健康造成嚴重的威脅[1]。本研究就利用氣相色譜-串聯質譜結合QuEChERS方法開展了蔬菜、水果中農藥殘留的檢測工作，現將結果和分析報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

氣相色譜--質譜聯用儀Agilent 5975c（SGHK-500）自動進樣器 Agilent 7693；Thermo公司生產的高速冷凍離心機；睿科Fotector plusl AutoEVA60固相萃取儀；梅特勒XSE105DU分析天平；Milli-Q超純水器。

標準液及試劑：按照目前常用的可應用于蔬菜、水果的并能夠被氣相色譜法進行測定的農藥，選擇由美國百靈威科技有限公司以及農業部環境保護科技監測所提供的37種農藥標準溶液（100 μg/mL）；Sigma公司提供的分析純D-山梨醇、3-乙氧基-1，2-丙二醇。

1.2 儀器工作條件[2]

1.2.1 樣品前處理

取20 mL丙酮加入上述10 g樣品中，并置于50 mL離心管內，利用振蕩器進行振蕩30 min；再加入萃取鹽包同樣振蕩15 min后再放入高速冷凍離心機，按照4 ℃，10 000 r/min離心10 min，準確吸取上層有機相5 mL置于離心管進行真空離心至近干狀態，再利用丙酮定容至2 mL，搖勻。吸取2 mL，并用5 mL丙酮潤洗樣品瓶，保證安全上樣，置入合適的QuECHERS凈化管中并振蕩1 min后靜置10 min，再置入高速冷凍離心機，按照4 ℃，10 000 r/min離心30 min，取出后靜置至室溫后，吸取適量上清液置于氣相色譜樣品瓶，待用。

1.2.2 實驗條件[3]

色譜條件：HP-5MS毛細管色譜柱，30 m×0.25 mm，0.25 μm； 進 樣方式為不分流進樣，進樣量為1 μL，進樣口溫度為250 ℃；載氣為純度超過99.999%的氦氣，恒流模式，流速1.0 mL/min。程序升溫：初始溫度設為70 ℃，維持1 min；再以30 ℃/min的速率升至130 ℃；再以5 ℃/min的速率升至250 ℃，維持5 min。

質譜條件：離子源溫度設為230 ℃，接口溫度280 ℃，四極桿溫度150 ℃。電離模式：電子轟擊離子源（EI）。轟擊能：70 eV。全掃描范圍：m/z 50～450，掃描方式選擇多反應監測（MRM）。燈絲電流：80 μA。碰撞池壓力：2 mTorr，碰撞氣為純度超過99.999%的氦氣。腔體溫度40 ℃，溶劑延遲3.5 min。

1.2.3 實驗方法

取市場銷售的蔬菜、水果樣品500 g，均勻切塊為1 cm3大小后進行粉碎并制成勻漿。精確稱取10 g勻漿置于50 mL離心管內，加入10 mL乙腈搖晃1 min；再加入4 g硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉以及0.5 g檸檬酸二鈉鹽，繼續搖晃混勻1 min。置入離心機按4 000 r/min，離心5m in，取上清液1 mL置于固相萃取凈化離心管內，加入適量氨基/石墨化碳后再搖晃1 min至均勻。最好再按13 000 r/min，離心2 min后取上清液，進行測定。

2 結果

2.1 標準曲線測定以及定量限

蔬菜、水果農藥最大殘留限量標準按照GB2763-2016食品安全國家標準，食品中農藥最大殘留限量，描述方法進行相關測定，結果37種農藥的相應含量范圍中其線性相關系數均超過0.990；農藥定量限為0.000 625～0.01 mg/kg。

2.2 37種農藥及其代表性的色譜圖

37種市售農藥具體名稱如下：二嗪磷、三唑磷、辛硫磷、丙溴磷、三唑酮、十三嗎啉、滅多威、甲胺磷、啶蟲脒、乙酰甲胺磷、樂果、氧樂果、毒死蜱、噠螨靈、多菌靈、涕滅威砜、涕滅威亞砜、噻蟲嗪、吡蟲啉、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、涕滅威、阿維菌素、克百威、3-羥基克百威、除蟲脲、滅幼脲 、氟啶脲、伏殺硫磷、嘧菌酯、甲萘威、亞胺硫磷、馬拉硫磷、烯酰嗎啉、氟蟲腈、苯醚甲環唑、二甲戊靈、以及咪鮮胺。其色譜圖見圖1。

圖1 37種農藥標準品MRM色譜圖（0.5 μg/L）

表1 實際樣品檢測結果

2.3 加標回收率和精密度

選擇0.01、0.05、0.10 mg/kg的37種混合農藥添加到空白的蔬菜、水果樣品中進行回收率測定，每種濃度重復測定6次。結果顯示經本研究方法，平均回收率為79.3%～119.5%，相對標準偏差為3.1%～12.4%。

2.4 實際樣品檢測結果

本研究共挑選從本地區4個不同農貿市場和水果批發市場隨機采集的西紅柿、小白菜、豇豆、芹菜、花椰菜、油菜以及蘋果、桃子、油桃、梨、草莓等130份蔬菜、水果樣品，按照1.2.3的實驗方法對其進行農藥殘留檢測。結果顯示130份樣品中有4份為陽性，樣品中農藥殘留率為3.08%。對檢測結果為陽性的樣品利用GB/T19648-2006（水果和蔬菜500種農藥及相關化學品殘留的測定）的標準程序和方法，根據GC-MS/MS法進行重新檢測，結果與本研究所用方法檢測結果一致，且農藥殘留量基本相當。見表1。

3 討論

農藥殘留檢測常用萃取劑為丙酮、乙酸乙酯和乙腈，但丙酮容易將蔬菜、水果樣品中的色素等雜質同時提取，而且丙酮能夠溶于水中，無法將水和有機溶劑進行完全分離；雖然乙酸乙酯和水相溶度較低，但是大部分極性農藥無法完全轉移至有機相，導致提取率低。而乙腈能夠通過對酸度調整以及含有的乙酸鹽作為緩沖液來確保穩定性以及對酸堿敏感農藥的回收率，因此最適合本研究。

綜上所述，在實際蔬菜、水果食品安全的檢測工作中，對于農藥殘留可選擇高靈敏度、操作便捷、耗時短且準確性較高的氣相色譜-串聯質譜結合QuEChERS方法。