先天性心臟病兒童血清NT-proBNP及CTGF的表達(dá)

張延蕊 林新梅 段培鋒 王晶晶

（濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，山東濱州 256603）

先天性心臟病（CHD）是小兒常見的心血管疾病，肺動(dòng)脈高壓（PAH）是CHD的常見和嚴(yán)重的并發(fā)癥[1]。有研究顯示結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（CTGF）參與PAH肺血管重構(gòu)并在多種纖維化疾病中起重要作用[2-3]。心室肌細(xì)胞分泌的腦鈉肽前體（proBNP）降解也產(chǎn)生無活性的代謝產(chǎn)物 B 型鈉尿肽前體（NT-proBNP）是近年來研究較多的反映心臟功能的指標(biāo)。本研究研究旨在通過檢測(cè)血漿 NT-proBNP及CTGF濃度并分析其變化規(guī)律，探討CTGF及NT-ProBNP血清學(xué)標(biāo)志物水平與左向右分流型先天性心臟病肺動(dòng)脈壓之間的關(guān)系，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2017年2月本院收治的70例左向右分流型CHD患兒，其中男性38例，女性32 例；年齡 6～122個(gè)月，平均年齡（18.35±4.03）個(gè)月。據(jù)心臟彩色超聲多普勒估算肺動(dòng)脈收縮壓（PASP），分為無 PAH 組25例（PASP＜30 mmHg）、輕度 PAH 組（30 mmHg≤PASP＜40 mmHg）25例和中重度PAH組（（PASP≥40 mmHg）20例。隨機(jī)抽取同期門診體檢的42例健康兒童作對(duì)照組，其中，男性22 例，女性 20 例；年齡6～115個(gè)月，平均年齡（17.65±5.35）個(gè)月。各組年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

（1）NT-ProBNP和CTGF含量的測(cè)定：所有患兒晨起空腹抽取外周靜脈血5 mL，入含EDTA-K2采血管內(nèi)，同時(shí)收集健康兒童靜脈血液5 mL入采血管內(nèi)。靜止0.5 h后在高速臺(tái)式離心內(nèi)以4 ℃，3 000 r/min速度離心15 min，分離出血清，分裝入1.5 mL的滅菌EP管內(nèi)，于-80 ℃冰箱內(nèi)保存。選用 NT-ProBNP和CTGF試劑盒，應(yīng)用 ELISA法按照說明書測(cè)定NT-ProBNP和CTGF的含量，操作步驟嚴(yán)格按相關(guān)說明書進(jìn)行。對(duì)所有樣本均測(cè)定3次以減小誤差。

（2）彩色超聲Doppler：全部患兒使用 Pillip EPIQ 7C型彩色 Doppler 超聲診斷儀（美國惠普公司），由一名超聲心動(dòng)圖醫(yī)師操作，測(cè)定肺動(dòng)脈收縮壓。

表2 3組血清NT-ProBNP和CTGF含量的比較（±s）

表2 3組血清NT-ProBNP和CTGF含量的比較（±s）

注：a表示與無PAH組比較，P＜0.05；b表示與輕度PAH組比較，P＜0.05

2.73±0.85 4.52±1.85a 9.42±2.56 ab F 4.12 4.09 P＜0.05 ＜0.05組別 n NT-ProBNP（ng/L） CTGF（μg/L）無肺動(dòng)脈高壓組輕度肺動(dòng)脈高壓組中重度肺動(dòng)脈高壓組25 25 20 238.64±65.25 1545.46±580.37a 3890.64±1546.785 ab

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用 SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用（±s）表示，行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用（%）表示，行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 左向右分流型CHD和正常兒童血漿NT-ProBNP和CTGF水平的變化

與正常兒童比較，左向右分流型CHD組患兒血漿NT-ProBNP和CTGF水平均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05），見表 1。

表1 對(duì)照組與CHD組血清NT-ProBNP和CTGF含量比較（x±s）

2.2 不同肺動(dòng)脈高壓組和肺動(dòng)脈壓正常的CHD病兒血漿NT-ProBNP和CTGF水平的變化

隨著肺動(dòng)脈壓力的升高，血漿NT-ProBNP和CTGF水平也明顯升高（P＜0.05），見表2。

3 討論與結(jié)論

本研究發(fā)現(xiàn)先天性心臟病合并肺動(dòng)脈高壓組較單純先天性心臟病組及對(duì)照組NT-ProBNP明顯增加，提示在肺動(dòng)脈高壓早期既出現(xiàn)NT-ProBNP的增加，提示NTProBNP是先天性心臟病合并肺動(dòng)脈高壓的預(yù)測(cè)因子及病情評(píng)價(jià)指標(biāo)，這與譚志敏等人研究結(jié)果相一致[2]。

CTGF是導(dǎo)致肺血管重構(gòu)的重要原因之一：（1）血管內(nèi)皮細(xì)胞可通過自分泌的方式分泌CTGF，CTGF對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的作用主要有：作用于細(xì)胞核，促進(jìn)有絲分裂的發(fā)生，調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，并穩(wěn)定其生長(zhǎng)的內(nèi)環(huán)境；（2）CTGF在血管平滑肌細(xì)胞的增值、遷移和沉積中均發(fā)揮著重要的作用；（3）體外實(shí)驗(yàn)證明，血管的平滑肌細(xì)胞能夠分泌CTGF，分泌的CTGF可增加血管平滑肌細(xì)胞釋放細(xì)胞外基質(zhì)；（4）過量分泌的CTGF可通過提高基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）的活性，促進(jìn)平滑肌細(xì)胞大量產(chǎn)生膠原蛋白Ⅰ、纖維結(jié)合素等細(xì)胞外基質(zhì)；（5）CTGF促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)的作用機(jī)制，相關(guān)研究已較為成熟。可見，CTGF通過作用于血管壁的三層結(jié)構(gòu)，使其均發(fā)生變化，近而引起肺血管的重構(gòu)，對(duì)pH的形成有著不可忽視的重要意義。本研究顯示CHD組患兒血清CTGF顯著高于對(duì)照組，合并不同程度pH患兒血清CTGF水平顯著高于未合并pH患兒，血清CTGF水平隨著患兒肺動(dòng)脈收縮壓的升高而升高，且與肺動(dòng)脈收縮壓成正相關(guān)。說明在CHD未并發(fā)肺動(dòng)脈高壓時(shí)，CTGF已開始升高；合并肺動(dòng)脈高壓時(shí)，CTGF在血清中的濃度隨著肺動(dòng)脈收縮壓的升高而升高，可能是因?yàn)楹喜⒎蝿?dòng)脈高壓后，同時(shí)存在著心肌纖維化和肺血管的重構(gòu)，而該因子在這兩種病理變化中均發(fā)揮著重要的作用。故可考慮將CTGF作為判斷CHD合并pH值嚴(yán)重程度的指標(biāo)[3]。

綜上，對(duì)左向右分流性先天性心臟病及時(shí)檢測(cè)NTProBNP和CTGF水平有助于發(fā)現(xiàn)輕度肺高壓患兒，以便進(jìn)行早期干預(yù)；及時(shí)行NT-ProBNP和CTGF檢查，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，以觀察肺動(dòng)脈壓力水平變化，防止發(fā)生嚴(yán)重肺動(dòng)脈高壓，以致失去手術(shù)機(jī)會(huì)。在對(duì)先天性心臟病患兒肺動(dòng)脈高壓評(píng)價(jià)時(shí)，可以選擇兩者之一，如條件允許可同時(shí)檢測(cè)，提高診斷的敏感性及特異性，有助于提高先天性心臟病合并肺動(dòng)脈高壓的早期診斷及對(duì)病情變化的評(píng)估。