抗豬流行性腹瀉病毒卵黃抗體治療效果研究

（濟(jì)寧市畜牧獸醫(yī)局，山東濟(jì)寧 272000）

豬流行性腹瀉病首次發(fā)現(xiàn)于1971年英國(guó)，并于20世紀(jì)80年代初在我國(guó)陸續(xù)發(fā)現(xiàn)，是由屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒引起的一種接觸性腸道傳染疾病[1]，臨床癥狀與變化與豬傳染性胃腸極為相似，表現(xiàn)為腹瀉、嘔吐、脫水等癥狀，給養(yǎng)殖戶帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)和勞務(wù)損失[2]。本在研究在使用特異性卵黃抗體干預(yù)治療豬流行性腹瀉病毒過程中取得較為滿意的臨床效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)抽選2017年4月初日齡未吃初乳的豬仔24頭作為本次研究對(duì)象，展開攻毒試驗(yàn)后，按照隨機(jī)分配的原則分為對(duì)照組和觀察組，每組均12頭。豬流行性腹瀉病毒則由齊魯動(dòng)物保健有限公司動(dòng)物疫病檢測(cè)中心進(jìn)行分離存儲(chǔ)。適用山東諾來生物科技有限公司購(gòu)買的HRP酶標(biāo)羊抗雞二抗和蛋白分子質(zhì)量為標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。同時(shí)，于濟(jì)寧養(yǎng)雞場(chǎng)購(gòu)買100只產(chǎn)蛋雞作為材料制備原料。

1.2 方法

1.2.1 卵黃抗體的制備

首先抗體制備，將豬流行性腹瀉病毒置于豬仔小腸內(nèi)不干預(yù)性增殖，接著制作免疫原。在免疫產(chǎn)蛋母雞中提取高效價(jià)的卵黃。再使用氯仿去脂和硫酸銨沉淀技術(shù)手段提純制作卵黃抗體，并進(jìn)一步加工成口服液。制作卵黃抗體口服液為后期進(jìn)行治療豬流行性腹瀉病毒的治療抗體。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)豬仔的模型制備

本次研究動(dòng)物所處的動(dòng)物房間要進(jìn)行嚴(yán)格的熏蒸消毒處理，內(nèi)部設(shè)置2個(gè)1m2大小的飼養(yǎng)籠，并且于每個(gè)飼養(yǎng)籠內(nèi)安排一個(gè)保溫箱，其溫度設(shè)為30℃～50℃左右，保障空氣的流通。將新鮮喂食母乳的豬仔分為2組，每組12頭，采取人工喂食手段，以每2小時(shí)的頻率喂食一天，之后觀察豬仔適應(yīng)新環(huán)境下的攻毒手段。

1.2.3 豬仔攻毒制備

在對(duì)每頭豬仔記錄標(biāo)記后，使用口服攻毒的方式對(duì)豬仔進(jìn)行體內(nèi)增值的豬流行性腹瀉病毒，其劑量為最小發(fā)病量的6倍左右，在完成攻毒試驗(yàn)后，嚴(yán)謹(jǐn)觀察每頭豬仔的生理變化，并記錄其腹瀉情況。

1.2.4 治療方法

在所有豬仔流行性腹瀉病毒模型制備成功后，觀察組對(duì)其喂食卵黃抗體液，每頭豬仔每次口服2ml左右抗體，每天三次。對(duì)照組豬仔則使用同等劑量的生理鹽水，每天三次。

表1 兩組豬仔不同治療后死亡情況及糞便指數(shù)

1.3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[3]

對(duì)比分析兩組豬仔的糞便指數(shù)和5d后豬死亡率，將糞便指數(shù)和卵黃抗體治療分為：0分正常，糞便形態(tài)固態(tài)成形；1分：輕度出現(xiàn)腹瀉、糞便細(xì)軟；2分：中度腹瀉，糞便呈金黃色水樣；3分：出現(xiàn)重度腹瀉，糞便呈噴射狀水樣。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

觀察組豬仔的死亡率（3頭）25.00%，對(duì)照組豬仔死亡率為（12頭）100.00%，觀察組豬仔死亡率顯著低于對(duì)照組豬仔死亡率，（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且觀察組豬仔的糞便指數(shù)均明顯低于對(duì)照組，見表1，（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

近年來，豬流行性腹瀉疾病雖然得到了極大的改善，但其危害仍然顯著，一旦豬場(chǎng)暴發(fā)豬流行性腹瀉，將給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。卵黃抗體屬于一種免疫球蛋白制劑，具有耐酸性好，耐熱性優(yōu)良并可以進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)的一抗體。不僅可以應(yīng)用于與預(yù)防和治療動(dòng)物傳染性疾病中，而且可以對(duì)豬流行性腹瀉病毒方面頗有療效[4]。通過提高豬仔小腸的局部免疫力，是進(jìn)一步抵制病原對(duì)小腸黏膜增殖的主要途徑。綜上所述，使用卵黃抗體干預(yù)治療抗豬流行性腹瀉病毒療效顯著，不僅可以明顯改善豬仔腹瀉情況，而且大幅度減低豬仔5天后的死亡率，成本低廉，產(chǎn)量高，性質(zhì)穩(wěn)定，對(duì)于動(dòng)物疾病的防治和治療具有突出的作用，值得市場(chǎng)的廣泛借鑒和推廣。