輸液系統(tǒng)中抗氧劑遷移量測(cè)定的方法學(xué)研究

李委潞，謝 博，蘇鴻雁，梅開(kāi)忠

(天津梅花醫(yī)藥有限公司 天津 300384)

藥品制劑選擇合適的內(nèi)包材需要進(jìn)行藥品與包裝材料的相容性研究。不同給藥途徑制劑與包裝系統(tǒng)發(fā)生相互作用的風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別不同，其中，注射液和注射用混懸液的風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別最高[1]，因其直接進(jìn)入人體血液循環(huán)系統(tǒng)，所以安全性更需要關(guān)注。而注射劑除了直接接觸內(nèi)包材，在使用過(guò)程中，往往還需直接接觸輸液器或注射器等醫(yī)療器械，故對(duì)注射劑與輸液系統(tǒng)的相容性、二者之間的相互作用也應(yīng)重點(diǎn)考察。輸液系統(tǒng)的構(gòu)造復(fù)雜，組件較多，不同組件的添加劑種類(lèi)也多，有文獻(xiàn)指出聚丙烯聚乙烯等包裝材料中有抗氧劑遷出[2]。本文對(duì)輸液系統(tǒng)中可能存在的5種抗氧劑在注射液中遷移量測(cè)定的方法學(xué)進(jìn)行研究。

1 實(shí)驗(yàn)條件

1.1 儀器與試藥

儀器：島津 LC2030高效液相色譜儀，色譜柱為T(mén)hermo C18，5,μm，4.6,mm×250,mm。

試藥：抗氧劑 BHT(批號(hào) 101927788，純度 99.0，阿拉丁)、抗氧劑 1010(批號(hào) 1002331683，純度 99.0，阿拉丁)、抗氧劑 1076(批號(hào) 1002324221，純度 99.0，阿拉丁)、抗氧劑 330(批號(hào) 1002507252，純度 99.0，阿拉丁)、抗氧劑 168(批號(hào) 1002384913，純度 99.0，阿拉丁)，乙腈、四氫呋喃均為色譜純。

樣品：一次性使用輸液器(帶針)(山東威高集團(tuán)醫(yī)用高分子制品股份有限公司，批號(hào) 20171021)，10%,葡萄糖注射液 250,mL(山東齊都藥業(yè)有限公司，批號(hào)11B1708039)。

1.2 色譜條件

色譜柱：Thermo C18(5,μm，4.6,mm×250,mm，S/N：10504426)。流動(dòng)相：乙腈-四氫呋喃-水(58∶30∶12)。柱溫：40,℃。檢測(cè)波長(zhǎng)：274,nm。進(jìn)樣量：20,μL。

1.3 對(duì)照儲(chǔ)備液的配制

分別取抗氧劑 1010、抗氧劑 1076、抗氧劑 330、抗氧劑 168、抗氧劑 BHT的對(duì)照品 60,mg，精密稱(chēng)定，置于同一個(gè) 50,mL容量瓶中，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)溶解并稀釋至刻度，搖勻，配成濃度約為1.2,mg/mL的溶液，作為儲(chǔ)備液1。

分別取抗氧劑 1010、抗氧劑 1076、抗氧劑 330、抗氧劑 168、抗氧劑 BHT的對(duì)照品 75,mg，精密稱(chēng)定，置于同一個(gè) 50,mL容量瓶中，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)[3]溶解并稀釋至刻度，再精密量取1,mL置于 50,mL容量瓶中，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋至刻度，搖勻，配成濃度約為30,μg/mL的溶液，作為儲(chǔ)備液2。

2 方法與結(jié)果

2.1 線性試驗(yàn)

精密量取儲(chǔ)備液 1適量，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋?zhuān)謩e制得濃度為 0.3、1.2、6、12、24、60、120、240、300,μg/mL 的對(duì)照溶液，精密量取各20,μL，按 1.2項(xiàng)下色譜條件分別進(jìn)樣，記錄色譜圖。以峰面積(A)對(duì)濃度(C，μg/mL)進(jìn)行線性回歸，得抗氧劑1010、抗氧劑1076、抗氧劑330、抗氧劑168、抗氧劑 BHT的回歸方程和相關(guān)系數(shù)，結(jié)果(見(jiàn)表1)表明：抗氧劑 1010、抗氧劑 1076、抗氧劑 330、抗氧劑168、抗氧劑BHT分別在表中所示濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。圖1為對(duì)照品色譜圖。

圖1 對(duì)照品色譜圖Fig.1 Comparative chromatogram

表1 線性試驗(yàn)Tab.1 Linear test

2.2 精密度試驗(yàn)

取2.1項(xiàng)下濃度為6、120,μg/mL的對(duì)照溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣重復(fù)測(cè)定 6次，得到峰面積，計(jì)算 RSD值。結(jié)果如表2。根據(jù) RSD值可以看出，該方法精密度良好。

表2 精密度試驗(yàn)Tab.2 Precision test

2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取 2.1項(xiàng)下濃度為 120、24、6,μg/mL 的對(duì)照溶液，分別在室溫放置 0、24,h，進(jìn)樣 3次進(jìn)行測(cè)定。RSD(%),結(jié)果如表3，顯示該方法穩(wěn)定性良好。

2.4 重復(fù)性試驗(yàn)

取 10%,葡萄糖注射液，與一次性使用輸液器(帶針)連接，模擬輸液過(guò)程，從輸液針出口量取通過(guò)輸液器的葡萄糖溶液 100,mL置于容量瓶中。將葡萄糖溶液以 2～3,mL/min的速度通過(guò)固相萃取柱。分別用 5,mL甲醇、3,mL四氫呋喃依次洗脫，收集洗脫液，用四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋至 10,mL，平均制備 6份，直接進(jìn)樣測(cè)定，均檢出抗氧劑 BHT，其余4種抗氧劑均未檢出。將測(cè)得BHT的峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表4。抗氧劑 BHT的RSD(%)為1.86，表明該方法重復(fù)性良好。

表3 抗氧劑對(duì)照品室溫放置穩(wěn)定性試驗(yàn)Tab.3 Stability test for room temperature placement of antioxidant reference product

表4 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果Tab.4 Repetition test results

2.5 檢測(cè)限

取抗氧劑 1010、抗氧劑 1076、抗氧劑 330、抗氧劑 168、抗氧劑 BHT對(duì)照品 75,mg，精密稱(chēng)定，分別置于50,mL量瓶中，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)溶解并稀釋至刻度，精密量取 1,mL置 50,mL量瓶中，加四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋至刻度，搖勻，配成濃度約為 30,μg/mL的溶液，將各溶液逐級(jí)稀釋?zhuān)?.2項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，經(jīng)測(cè)定信噪比(S/N)為 2～3時(shí)，抗氧劑 1010、抗氧劑 1076、抗氧劑 330、抗氧劑168、抗氧劑BHT濃度分別約為 0.06、0.075、0.03、0.06、0.075,μg/mL。

2.6 回收率試驗(yàn)

取 10%,葡萄糖注射液，與一次性使用輸液器(帶針)連接，模擬輸液過(guò)程，從輸液針出口量取通過(guò)輸液器的葡萄糖溶液100,mL置于容量瓶中，加入1,mL儲(chǔ)備液 2，混勻。溶液以 2～3,mL/min的速度通過(guò)固相萃取柱。分別用5,mL甲醇、3,mL四氫呋喃依次洗脫，收集洗脫液，用四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋至 10,mL，直接進(jìn)樣測(cè)定。將測(cè)得峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表5。

2.7 抗氧劑在注射液中遷移量的測(cè)定

取 10%,葡萄糖注射液，與一次性使用輸液器(帶針)連接，分別在常溫及高溫 60,℃下模擬輸液過(guò)程，在 0、3、6、24,h時(shí)量取通過(guò)輸液器的溶液 100,mL置于容量瓶中。溶液以 2～3,mL/min的速度通過(guò)固相萃取柱。分別用 5,mL甲醇、3,mL四氫呋喃依次洗脫，收集洗脫液，用四氫呋喃-乙腈(體積比＝1∶1)稀釋至 10,mL，直接進(jìn)樣測(cè)定[4]。將測(cè)得峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表6。抗氧劑 1010、1076、330、168的遷移量均低于檢測(cè)限，視為未檢出。圖 2為抗氧劑遷移測(cè)定結(jié)果，3.971為抗氧劑BHT的峰。

表5 抗氧劑遷移回收率試驗(yàn)結(jié)果Tab.5 Test results of the transfer recovery rate of antioxidant

表6 抗氧劑在注射液中遷移量測(cè)定結(jié)果Tab.6 Determination of migration of antioxidant in injection

圖2 抗氧劑遷移測(cè)定結(jié)果Fig.2 Results of the migration determination of antioxidant

3 討 論

輸液系統(tǒng)包括輸液器、輸液針、輸液瓶等部件，其中輸液器構(gòu)造復(fù)雜，組件多，主要包括穿刺器、軟管、滴斗、過(guò)濾器、螺旋接頭、流量調(diào)節(jié)器等。目前市售輸液器多為 PVC、聚乙烯或聚丙烯材質(zhì)，而輸液瓶主要有鈉鈣玻璃、低/中硼硅玻璃、低密度聚乙烯/聚丙烯等材質(zhì)，除玻璃材質(zhì)外的輸液用品在生產(chǎn)過(guò)程中經(jīng)常會(huì)添加一些抗氧劑，但一般不會(huì)超過(guò) 3種。因此，開(kāi)發(fā)能夠及時(shí)、準(zhǔn)確、批量化地檢測(cè)輸液系統(tǒng)中抗氧劑遷移的方法非常必要。本文用 HPLC法對(duì)輸液系統(tǒng)中可能存在的 5種常見(jiàn)抗氧劑的遷移量進(jìn)行方法學(xué)研究，包括線性試驗(yàn)、精密度試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)、檢測(cè)限、回收率試驗(yàn)，結(jié)果表明該方法適用性好，能夠準(zhǔn)確檢測(cè)出輸液系統(tǒng)抗氧劑在注射液中的遷移含量，可作為評(píng)價(jià)輸液系統(tǒng)與藥液相容性的依據(jù)，并可為進(jìn)一步評(píng)價(jià)其安全性提供參考。