利用不親和野生種培育抗青枯病高油酸高產(chǎn)食用型花生新品種

王傳堂 唐月異 王秀貞 吳琪 孫全喜 王志偉 葉萬(wàn)余 吳昌湛 王強(qiáng) 宋國(guó)生 徐建志

摘要：利用抗青枯病不親和野生種種間雜種06I8B4為母本、以自育高油酸親本CTWE為父本雜交，后代選擇用分子標(biāo)記輔助與近紅外模型進(jìn)行，青枯病抗性實(shí)施自然病地鑒定，由此育成抗青枯病、高油酸、高產(chǎn)、食用型品種花育963和花育668。其適應(yīng)性廣，產(chǎn)量水平不遜于普通油酸高產(chǎn)品種；油酸含量超過(guò)80%，油亞比均在24以上；口感佳，適合食品加工；青枯病抗性分別達(dá)抗病和中抗水平。

關(guān)鍵詞：食用型花生；不親和野生種；花育963和花育668；青枯??；高油酸

中圖分類號(hào)：S565.203.51文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2018）06-0057-04

Abstract A crossbreeding was made between 06I8B4 （female parent）， an incompatible Arachis species hybrid derivative with bacterial wilt （BW） resistance， and CTWE （male parent）， a high-oleic peanut line bred by our research group. Through screening with molecular marker technology and near infrared spectroscopy model， along with resistance scoring at natural disease nursery， two high-oleic and high-yielding peanut cultivars for food uses with BW resistance， Huayu 963 and Huayu 668， were developed. Both cultivars were found to have wide adaptability； their yields were comparable to or even higher than that of normal-oleic and high-yielding varieties； the oleic acid content was over 80%， and the ratio of oleic acid to linoleic acid was more than 24. Huayu 963 and Huayu 668 had good eating quality， which were suitable for food processing， and were resistant and moderately resistant to BW， respectively.

Keywords Edible peanut； Wild incompatible species； Huayu 963 and Huayu 668； Bacterial wilt；High oleic acid

油酸氧化酸敗的速度約為亞油酸的十分之一。高油酸花生其脂肪酸中的油酸含量由普通油酸花生的40%～55%左右提升至72%以上，亞油酸含量則由約40%降低到7.7%以下，因而表現(xiàn)出較高的氧化穩(wěn)定性，由其加工而成的花生油和花生食品貨架期顯著延長(zhǎng)，能夠保持花生良好的風(fēng)味經(jīng)久不衰[1]。經(jīng)常食用高油酸花生還可降低低密度脂蛋白膽固醇，有助于控制體重、增強(qiáng)胰島素敏感性、穩(wěn)定血糖、改善炎癥，有增強(qiáng)腦認(rèn)知能力之功效[1]。高油酸花生制品因此受到加工企業(yè)和健康意識(shí)日益增強(qiáng)的消費(fèi)者的歡迎[1]。高油酸已成為當(dāng)前和今后一段時(shí)期花生品質(zhì)改良的重要目標(biāo)之一。

包括F435和F78-1339在內(nèi)的最初一批國(guó)外高油酸花生種質(zhì)，其農(nóng)藝性狀多不理想，存在低產(chǎn)、莢果開裂和感病等缺陷[2，3]，難以直接應(yīng)用，為此國(guó)外常采取回交措施將高油酸特性導(dǎo)入到商品性好、抗性強(qiáng)的花生品種中；國(guó)內(nèi)則基本采取雜交育種策略，近年來(lái)回交手段也有應(yīng)用[1]。青枯病是花生土傳毀滅性病害，缺乏有效的化學(xué)防治措施，水旱輪作雖有效果但比較繁瑣，培育抗性品種是經(jīng)濟(jì)有效的方法。國(guó)內(nèi)外現(xiàn)已育成多個(gè)抗青枯病普通油酸花生品種[4]，但抗青枯病高油酸花生品種選育鮮有報(bào)道[1，5]?；ㄉ挥H和野生種抗性強(qiáng)、遺傳多樣性豐富，但長(zhǎng)期以來(lái)難以在育種中加以利用。為此本項(xiàng)目組建立了花生原位胚拯救技術(shù)[6]，并據(jù)此進(jìn)行利用抗逆性強(qiáng)的不親和野生種與自育高油酸新種質(zhì)雜交培育抗逆優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)品種研究，以期選出抗青枯病高油酸花生新品種。

1 材料與方法

1.1 雜交組合配制

2008年以通過(guò)原位胚拯救技術(shù)獲得的花生栽培種與不親和野生種Arachis rigonii種間雜種高世代抗青枯病優(yōu)質(zhì)品系06I8B4為母本、以項(xiàng)目組自育高油酸親本CTWE為父本，配制雜交組合。

1.2 雜交后代選擇

采用項(xiàng)目組構(gòu)建的花生高油酸分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)和近紅外模型進(jìn)行[1]。

1.3 特征特性表述

按《中國(guó)花生品種及其系譜》所述方法進(jìn)行[7]。

1.4 產(chǎn)量鑒定

品比試驗(yàn)產(chǎn)量鑒定主要在山東省花生研究所萊西試驗(yàn)基地進(jìn)行。多點(diǎn)產(chǎn)量鑒定送安徽省種子協(xié)會(huì)或國(guó)家花生產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系試驗(yàn)站進(jìn)行，按當(dāng)?shù)胤N植模式種植。大花生和小花生分別以普通油酸高產(chǎn)品種花育33號(hào)和花育20號(hào)作對(duì)照，個(gè)別情況下以高油酸品種花育951和花育32號(hào)為對(duì)照。收獲適期，日曬干燥后根據(jù)出米率換算出子仁產(chǎn)量。

1.5 青枯病抗性鑒定

該病抗性鑒定試驗(yàn)在廣西壯族自治區(qū)賀州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所自然病地進(jìn)行，重復(fù)3次，以中花6號(hào)為抗病對(duì)照、中花12為感病對(duì)照。2017年3月27日每份材料每重復(fù)播50粒種子，4月17日調(diào)查出苗數(shù)，7月25日統(tǒng)計(jì)收獲株數(shù)。

以田間存活率（收獲株數(shù)/出苗數(shù)×100%）表示抗病水平高低。其中，高抗：存活率≥90%；抗病：90%>存活率≥80%；中抗：80%>存活率≥65%；感?。?5%>存活率≥50%；高感：存活率<50%。

1.6 品質(zhì)分析

花育963和花育668子仁樣品送農(nóng)業(yè)部油料及制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（武漢）或青島捷安信檢驗(yàn)技術(shù)服務(wù)有限公司測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 選育過(guò)程

花生高油酸性狀在高油酸與普通油酸不同雜交組合里受控于一對(duì)或兩對(duì)基因，其F2代高油酸分離子比例分別為1/4或1/16，鑒于此，單純根據(jù)高油酸表型選擇后代可能會(huì)造成其它優(yōu)異基因丟失，影響育成高油酸花生的產(chǎn)量和抗性。為此，我們?cè)?008年收獲雜交果并于干燥后通過(guò)分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行雜種鑒定，保留真雜種；F2種子進(jìn)行近紅外掃描，選留高油酸種子，之后對(duì)中油酸種子進(jìn)行分子標(biāo)記分析，選留FAD2A/FAD2B雙突變基因型種子，后代再進(jìn)行近紅外掃描選擇，以增加獲得高油酸高產(chǎn)抗逆后代的機(jī)會(huì)?；旌蠝y(cè)產(chǎn)前除調(diào)查外觀性狀是否一致外，每株均進(jìn)行近紅外掃描，確保高油酸特性穩(wěn)定，并排除混雜的可能。選出的品系除在萊西正常種植外，2010—2012年又在海南進(jìn)行兩年的加代擴(kuò)繁。至此花育963經(jīng)系譜法選擇育成，于2012年（F6）開始進(jìn)行產(chǎn)量鑒定；花育668經(jīng)混合系譜法育成，于2014年（F8）開始進(jìn)行產(chǎn)量鑒定。

2.2 品種特征特性

2.2.1 花育963 株型直立，葉片橢圓形，結(jié)果集中。莢果普通形，子仁長(zhǎng)橢圓形（圖1左），內(nèi)種皮金黃色。

山東萊西春播生育期120 d。主莖高24 cm，側(cè)枝長(zhǎng)28 cm，分枝數(shù)8條。百果重247 g，百仁重105 g。出米率74%。

安徽夏播生育期116 d。主莖高32 cm，結(jié)果枝數(shù)7條，單株莢果重20 g，單株子仁重15 g。百果重210 g，百仁重81 g。出米率73%。

2.2.2 花育668 山東萊西春播生育期約115 d。株型直立（圖1右），連續(xù)開花。莢果繭形，子仁桃圓形。主莖高24 cm，側(cè)枝長(zhǎng)26 cm，分枝數(shù)9條。百果重170 g，百仁重70 g。出米率75%。

2.3 產(chǎn)量鑒定

2.3.1 花育963 山東省花生研究所品比試驗(yàn)，2012年子仁產(chǎn)量3 152.85 kg/hm2，較對(duì)照花育33號(hào)增產(chǎn)8.24%；2014年子仁產(chǎn)量3 545.70 kg/hm2，較對(duì)照花育33號(hào)增產(chǎn)5.79%；2015年春播雨養(yǎng)條件下試驗(yàn)，子仁產(chǎn)量3 641.85 kg/hm2，比對(duì)照花育25號(hào)增產(chǎn)2.59%。2016年山東萊西花生生長(zhǎng)季遭遇嚴(yán)重干旱，在一水未澆的情況下，1 800 m2旱薄地取得6 300.00 kg/hm2的莢果產(chǎn)量。

2015年，新疆農(nóng)墾科學(xué)院在兩塊施肥量減半的重茬地進(jìn)行花生單粒種植試驗(yàn)，平均莢果產(chǎn)量6 173.85 kg/hm2。同年參加安徽夏播花生區(qū)試，平均莢果產(chǎn)量3 625.05 kg/hm2、子仁產(chǎn)量2 656.35 kg/hm2，分別比高油酸對(duì)照品種花育951增產(chǎn)10.69%、12.75%。2016年，山東臨沂試驗(yàn)，子仁產(chǎn)量3 922.60 kg/hm2，比對(duì)照花育33號(hào)增產(chǎn)16.54%；安徽合肥夏播試驗(yàn)，子仁產(chǎn)量3 521.84 kg/hm2，比對(duì)照花育33號(hào)增產(chǎn)14.71%；湖北襄陽(yáng)試驗(yàn)，子仁產(chǎn)量3 399.43 kg/hm2，比對(duì)照花育33號(hào)增產(chǎn)35.63%；在河南駐馬店、江蘇徐州、河北保定、湖北黃岡等地種植亦比對(duì)照花育33號(hào)增產(chǎn)。2017年，遼寧錦州試驗(yàn)，子仁產(chǎn)量4 087.48 kg/hm2，比對(duì)照花育33號(hào)增產(chǎn)8.56%；山東臨沂試驗(yàn)，子仁產(chǎn)量5 579.89 kg/hm2；山西汾陽(yáng)試驗(yàn)，子仁產(chǎn)量5 504.55 kg/hm2，比對(duì)照花育33號(hào)增產(chǎn)18.59%；安徽合肥夏播試驗(yàn)，子仁產(chǎn)量3 306.66 kg/hm2，比對(duì)照花育33號(hào)增產(chǎn)14.97%；湖北襄陽(yáng)試驗(yàn)，子仁產(chǎn)量4 378.94 kg/hm2，比對(duì)照花育33號(hào)增產(chǎn)9.86%；四川南充試驗(yàn)，子仁產(chǎn)量4 058.80 kg/hm2，比對(duì)照花育33號(hào)增產(chǎn)8.60%。

2.3.2 花育668 山東省花生研究所品比試驗(yàn)，2014年子仁產(chǎn)量4 112.85 kg/hm2，比花育33號(hào)增產(chǎn)12.07%，比花育25號(hào)增產(chǎn)22.03%；2015年子仁產(chǎn)量3 883.50 kg/hm2，比花育20號(hào)增產(chǎn)3.57%；2016年后期耐旱試驗(yàn)，子仁產(chǎn)量3 035.55 kg/hm2，比花育20號(hào)子仁增產(chǎn)1.60%，比高油酸對(duì)照種花育32號(hào)子仁增產(chǎn)62.95%。

2016年全國(guó)20個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)中，白城、四平、阜新、錦州、煙臺(tái)、濰坊、臨沂、汾陽(yáng)、徐州、駐馬店（夏播）、濮陽(yáng)、唐山、保定、合肥（夏播）、黃岡、襄陽(yáng)、貴州、泉州（秋植）、賀州（秋植）、贛州（秋植）試驗(yàn)，平均子仁產(chǎn)量2 861.08 kg/hm2，比對(duì)照花育20號(hào)增產(chǎn)5.26%。2017年全國(guó)17點(diǎn)試驗(yàn)，在阜新、錦州、煙臺(tái)、濰坊、汾陽(yáng)、徐州、濮陽(yáng)、唐山、保定、合肥、南京、黃岡、襄陽(yáng)、泉州、賀州、贛州、南充試驗(yàn)，平均子仁產(chǎn)量3 298.35 kg/hm2，比對(duì)照花育20號(hào)增產(chǎn)3.71%。

2.4 青枯病抗性鑒定

2017年在廣西賀州青枯病自然病地種植，抗病對(duì)照中花6號(hào)出苗率90.67%，田間存活率68.35%，青枯病抗性鑒定結(jié)果為中抗；感病對(duì)照中花12號(hào)出苗率73.33%，田間存活率6.43%，表現(xiàn)為高感；花育33號(hào)出苗率86.67%，田間存活率6.47%，表現(xiàn)為高感；花育20號(hào)出苗率95.33%，田間存活率23.20%，表現(xiàn)為高感。上述品種均于4月下旬出現(xiàn)青枯病。

本研究選育的兩個(gè)品種則對(duì)青枯病表現(xiàn)出較好的抗性?；ㄓ?63出苗率88.00%，5月上旬出現(xiàn)青枯病，田間存活率達(dá)87.41%，表現(xiàn)為抗??；花育668出苗率92.67%，5月上旬出現(xiàn)青枯病，田間存活率67.15%，表現(xiàn)為中抗。

2.5 品質(zhì)分析

2016年農(nóng)業(yè)部油料及制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（武漢）測(cè)定結(jié)果，花育963子仁油酸含量80.1%，亞油酸含量3.2%，油亞比25.0?；ㄓ?68油酸含量80.7%，亞油酸含量2.8%，油亞比28.8，含油量53.6%。2017年經(jīng)青島捷安信檢驗(yàn)技術(shù)服務(wù)有限公司檢測(cè)，其油酸含量81.1%，亞油酸含量3.37%，油亞比24.1，含油量51.8%，粗蛋白含量21.3%。

3 討論與結(jié)論

花育963于2015年通過(guò)安徽省鑒定（皖品鑒登字第1505029）。其子仁符合出口要求。2017年由7人感官評(píng)價(jià)小組對(duì)31個(gè)品種烤花生仁按總體喜歡度打分（1—5級(jí)，1為最喜歡，5為最不喜歡），花育963為2.15分，位列第二，說(shuō)明其口感佳，適合加工食品之用。需要引起重視的是，該品種雖抗青枯病，但易爛果，種植時(shí)應(yīng)注意避開澇洼地塊[8]。

在2016年果柄強(qiáng)度試驗(yàn)中，花育668與對(duì)照品種花育20號(hào)、花育32號(hào)果柄強(qiáng)度相當(dāng)，果柄自莖枝處脫落的百分率為零，即全部脫落于莢果與果柄連接處[9]，說(shuō)明該品種不易落果，摘果后可省去“去果柄”工序，是一個(gè)適合機(jī)械化收獲的花生品種。花育668是一個(gè)典型的珍珠豆型品種，適應(yīng)性廣，子仁大小適中，莢果和子仁均符合“旭日型”出口要求，口感好，且抗青枯病，是替代花育20號(hào)等小白沙類型品種的理想選擇。

本研究選育的兩個(gè)高油酸花生品種花育963、花育668油酸含量均在80%以上，油亞比在24以上，產(chǎn)量不遜于普通油酸高產(chǎn)品種，且抗青枯病，口感好，適合加工食用，推廣應(yīng)用前景廣闊。

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