肽在治療中風和帕金森上可發揮重要作用

◎ 加拿大英國哥倫比亞大學神經內科教授 王玉田

以胎為基礎的轉化醫學技術。我們從細胞角度、從分子學角度來研究這些不同的蛋白質，前面兩位專家都分析了自己的研究成果，我們需要了解這些不同的蛋白質的機理以及干預，我們在實驗室做研究這是從分子水平上做研究，研究的目的是了解在分子水平上的作用。有了這個理解我們就到器官水平上，在器官水平上比如說大腦區域叫做海馬，這個海馬是與學習與記憶有關系，很多神經元構成神經網絡，從這兒理解了之后這個分子機制要到網絡這個結構上來替代水平上的機理。有的機理之后要回到證據上，布局到這個整體上發現一些現象的嗎斯特，我們最后需要到動物上，證明我們實驗室的過程是可行的。

這些器官我們在動物細胞上去研究，可以檢驗我們在實驗室得到的一些分析。這個動物模型不管是老鼠還是猴子等等各種模型，實驗室的研究結果能否治療，到一定治療結果我們再向人上轉化。Translationa，很難從老鼠到人的身上，為什么藥這么貴，因為投入這么多藥只有一個成功就很不錯，花錢很多，但是失敗比較多，很少能夠產生真正的應用。

我們實驗室一直做最基本的研究，研究的過程中研究的機理我們要想實驗室了解這個機理，我們必須產生一些interventions，我們希望我們這個還可以直接用到人，interventions不僅僅可以在實驗室上可以用，還可以應用在人身上，所以產生的Translationa比較快。我們認為多肽是一個比較好的方法，可以直接從實驗室到臨床跨度。Interfernce，干擾性多肽。剛才托馬斯以及Sean都說了，蛋白質想發生功能一般要放在蛋白質的復合體，不是一個游離的蛋白質，一般要發生interference，要研究它的結合部位我們要產生小的多肽，舉這個例子從ProteinB來的，把這個片段做了一個藥的方式，因為這是一個B和A結合的部位，一進去之后這個A結合了之后這個部位，就把A和B打斷了。這樣來調解蛋白質的位置。這個方法不是我們建立的，用了很長的時間。但是我們第一個是把這個應用向臨床上過渡，主要講這個例子是因為它是證明了多肽是可以成效的，而真正體現在人身上是比較有效的，所以可以盡快的Translationa。

舉一個例子：中風。大腦內有一些血管堵塞或者破裂了，導致輸送大腦部位缺血，缺血之后神經元死亡。現在研究的機理很多，從Free Radical Release導致這個大腦死亡。什么是性病毒，當發生中風缺氧，缺氧大腦缺少能量，很多這個氨基酸，便產生了性病毒。

有一個受體在細胞神經元表面，受體是一個通道叫做NMDARs，NMDAr是細胞九個氨基酸和PSD95結合，結合了之后再結合NDS，這樣一旦發生了就導致了nNO，這導致細胞死亡。從TR2BA9C結合的部位，但是多肽不可以通過細胞膜，專門加上跨膜的系列。這個多肽怎么工作？通過跟Cell的競爭，沒有導致這個大腦死亡。怎么樣向人類Translational？ 通 過 Translational，怎么樣在動物上可以用，在人上也可以用，我們認為這個多肽在人上比較安全，所以準備向人的研究跨步。以前實驗室都是一個比較大的醫藥公司，大的醫藥公司按照他們的方式進行做臨床試驗，后來我們發現很多的實驗都沒有成功。沒有成功的原因可能是動物模型不好，還有一種做臨床設計實驗的時候，這個實驗不是太合理，所以說不能成功。我們想著自己來做，我們知道醫藥的特性，也知道應該注意的事項，所以說我們六個科學家在多倫多成立了一個公司，叫做No No inc，就是沒有NO，不產生NO。這個中間的是CEO。從實驗室到Phase1-Phase2-Phase3。這個氨基酸打入到體內就像吃了一個雞蛋一樣增加營養，很快可以降下來，這個氨基酸體內就要合成體內蛋白。這個Phase1一直上升的濃度遠遠超過有效的濃度，沒有任何的問題。然后進行 Phase2，Phase2和 Phase1上不一樣，是在病號上做實驗，要看在這個病毒里面有沒有安全性，還要看有沒有療效。我們這次實驗98個病號，這個中風也是很難做的，我們知道中風這個關聯癥很大，有的是高血壓、糖尿病以及其他的疾病。很快拿出一個這么小的病號有一個有效，我們的CEO一直做血管瘤，我們知道有一些部分人這個局部大腦供應還可以產生動態變膜，很有可能一下子造成血管出血，造成死亡。手術方法就通堵塞，用支架的方式進行干預。90%的病號都有并發性的小中風，用這一類的病號做Phase2，我們可以控制時間，每一個病號來到這兒做手術，先給他這個藥，這個實驗很快得到了結果，在紐約這個文章里面發了出來，這個實驗結果表明確確實實在這么小的病號里面，你可以看出來用了藥的繼發性的中風也好，SRSS也好，不管是出血還是缺血。最后進入Phase3，我們叫做死亡中風，一般Phase3很難跨越，到了最后藥物成功。

回頭來看臨床設計，十幾年中風的設計，神經保護藥，可以看到沒有一個成功的，所有都失敗了。失敗的原因是什么？有很多原因。其中一個原因我們認為給這個藥的時間給的太晚了，發生中風以后一個是半個小時，半個小時之后這個黃金時間就沒有了，從這個中風罩就消失了。就做這個實驗，證明這個實驗方式不對，以前臨床設計不合理。為了給這個藥，要是一個小時內給藥，70%可以救回來，如果換上兩個小時就減到了40%，四個小時基本上是救不過來了。臨床設計上，以前的設計需要診斷，是輸血還是缺血，前期這個醫院進行診斷。進行這一套診斷原因超過了這個中風給藥的時間。我們為了避免這個，要設想一個新的臨床設計。

怎么樣保證30-60分鐘給藥。我們想把這個藥給救護車的救護人員，救護人員一到的現場一看到懷疑是中風立即給藥，原因是什么？原因我們認為中風很明確的通過說話嘴偏的很容易診斷，不需要針對醫生上來，所以把這個藥給他們，只要這個藥是安全的就可以了。我們為了搶救必須是采用這種方法。我們認為這個藥是安全的，而且不管是缺血還是輸血都可以有效。這個藥又是安全的，又是準確的。他們確實接受了這個方式，不需要確認中風就給藥，差不多明年這個時間到了peptide。

我們新設計的多肽方式，有很多的疾病是有一些Peptide造成的，AB又分Aβ以及APP，這些都是屬于病腦方式，如果我們把這個層級降下來就有可能治療的方式。這個方法怎么樣的設計？首先是從DNA做了Translationa到了tarnlation到蛋白質，最終都是由蛋白質調整。以前怎么樣調整這個蛋白質的高和低，是在DNA層級上我們可以做detic，我們還有mRNA，我們現在想的是跳過這些，這些很慢，而且很難傳輸過來，我們想在這個蛋白質層級直接調解。我們利用的方法借用細胞內本身有的這個Lysosomal的方式講解，這個講解都有一個membrane。通過這個lys-hsc70結合，我們就借這個設計了一個多肽，多肽有三個：保證這個多肽可以進到細胞；找到你的靶點；可以把它lysosome。這中間可以找到Targstprotein然后可以進行Lysosome進行講解，可以調整這個量，如果高可以降低。

舉個例子，Parkinsons Disease，這個運動的疾病，隨著年老發病率越來越高。這個最終的成倍的機理是因為可以結合這個多晶體，最后殺死多巴神經，這是這個機理。這個多巴胺的治療死亡，目前治療只是用多巴胺。這個多巴胺的前期也根據這個治療方法。但是首先多巴胺的前提需要有一個足夠大的多巴胺新源轉到這個多巴胺。隨著這個疾病細胞死亡，慢慢這個藥就無效了。現在都有針對治療疾病的方式，這個簡單地說一下目前了解的致病機理。很多疾病，像Compromined，整個機理導致了這個a-synuclein oligomers，如果用這個方法降低這個疾病的機理，這是在細胞上正在做的。細胞上多肽可以專門識別這個α。這個在動物上打針，一針24小時，這個體內可以降到一些，每天一針可以滿足這個α量在20%左右。還有一個消除，我們可以直接在血液里面檢測，把這個功能血液抽出來，給了多肽以后可以看到降沒有降解，這是保護多巴新源。有了這個多肽以后，這個新源就保護了。