人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA檢測在30歲以下年輕女性宮頸疾病診治中的應用探討

王武 葉鳳如

【摘要】 目的：探討人乳頭瘤病毒（HPV）E6/E7 mRNA檢測在30歲以下年輕女性宮頸疾病診治中的應用。方法：選取2015年5月-2017年1月就診于本院行細胞學檢查發現的無明確診斷意義的鱗狀上皮細胞病變（ASCUSAIL）患者100例，均為30歲以下年輕女性。按照隨機數字表法將其分為對照組和研究組，各50例。對照組予傳統HPV DNA分型檢測，研究組直接進行HPV E6/E7 mRNA檢測。比較兩組病變預測準確度、特異度、陰道轉診率、患者滿意度。結果：HPV E6/E7 mRNA檢測診斷CINⅡ+準確度、特異度為72.00%、43.75%，均高于HPV DNA檢測的64.00%、21.05%，比較差異均有統計學意義（P<0.05）；HPV E6/E7 mRNA檢測陰道轉診率為76.0%，低于HPV DNA檢測的86.0%（P<0.05）；HPV E6/E7 mRNA檢測患者滿意度為92.0%，高于HPV DNA檢測的76.0%（P<0.05）。結論：HPV E6/E7 mRNA檢測診斷CINⅡ+較HPV DNA檢測準確率高、陰道轉診率低、患者滿意度高，對宮頸疾病的診治有較好應用價值。

【關鍵詞】 人乳頭瘤病毒； 宮頸內瘤變； HPV E6/E7 mRNA檢測； HPV DNA檢測

【Abstract】 Objective：To investigate the application of human papillomavirus（HPV） E6/E7 mRNA in diagnosis and treatment of cervical diseases in young women under 30 years old.Method：A total of 100 ASCUSAIL patients who had been treated for cytological examination in our hospital from May 2015 to January 2017 were selected，they were young women under 30 years old.According to the random number table method，they were divided into control group and study group，50 cases in each group.The control group was given conventional HPV DNA typing test，and study group was directly tested by HPV E6/E7 mRNA.The accuracy，specificity，vaginal referral rate and patient satisfaction were compared between two groups.Result：The accuracy and specificity of CINⅡ+ were 72.00% and 43.75% in the diagnosis of HPV E6/E7 mRNA，which were all higher than 64.00% and 21.05% of HPV DNA（P<0.05）.The vaginal referral rate in HPV E6/E7 mRNA was 76.0% lower than 86.0% of HPV DNA（P<0.05）.The patient satisfaction with HPV E6/E7 mRNA was 92.0% higher than 76.0% of HPV DNA（P<0.05）.Conclusion：Compared with HPV DNA detection，HPV E6/E7 mRNA detection has high accuracy，low vaginal referral rate and high patient satisfaction，has good application value for the diagnosis and treatment of cervix disease.

【Key words】 Human papillomavirus； Cervical intracervical tumorigenesis； HPV E6/E7 mRNA detection； HPV DNA detection

First-authors address：Dalang Hospital of Dongguan，Dongguan 523770，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.15.032

人乳頭瘤病毒（HPV）感染是宮頸癌發展的主要風險因素，幾乎100%的宮頸癌合并HPV感染[1]，但是感染了HPV并不一定患宮頸癌，尤其是年輕女性，大多數感染是一過性的或是無癥狀的[2]。對于宮頸癌的篩查，傳統細胞學篩查雖然仍為主要手段但篩查的特異性和準確性及預測病變的發展趨勢都有其局限性[3]。HPV E6/E7 mRNA檢測比常規HPV DNA分型檢查更準確，更可預測30歲以下年輕女性宮頸病變進展及其轉歸，以緩解年輕女性對宮頸HPV感染的心理恐懼并可預防因宮頸HPV感染所導致的過度治療[4]，本研究即重在探討HPV E6/E7 mRNA檢測在30歲以下年輕女性宮頸疾病診治中的應用[3]。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年5月-2017年1月就診于本院行細胞學檢查發現的無明確診斷意義的鱗狀上皮細胞病變（ASCUSAIL）患者100例，均為30歲以下年輕女性。納入標準：無宮頸手術史；無宮頸物理治療史；無盆腔放射史。排除標準：妊娠；合并嚴重的全身疾病；有精神疾患無法配合治療者。按照隨機數字表法將其分為對照組和研究組，各50例。所有患者均知情同意并簽署知情同意書，該研究已經醫院倫理學委員會批準。

1.2 方法 對照組予傳統HPV DNA分型，研究組直接做HPV E6/E7 mRNA檢測。兩組陽性者行陰道鏡檢+活檢，子宮頸上皮非典型增生（CIN）Ⅱ級以下的再定期復查TCT及HPV DNA檢測繼續隨訪，CINⅡ級以上的再行相關治療。若E6/E7 mRNA檢測轉陰，轉為6～12個月復查TCT，若E6/E7 mRNA檢測持續陽性但TCT檢測細胞學分級無升級，則選擇適宜治療[5-6]。（1）TCT：采用TCT專用毛刷進行取材，將采集的細胞涮洗于TCT取樣品中，制成薄片，經巴氏染色后鏡檢。（2）HPV DNA檢測：采用PCR反向點雜交技術，儀器及試劑盒均購自杭州新捷生物科技有限公司，使用專用毛刷取材后，涮洗于HPV專用取樣瓶中，并按照試劑盒操作。（3）組織病理學檢查：宮頸組織學診斷分為：正常、炎癥、宮頸上皮內瘤變，浸潤癌，對于病理檢查結果≥CINⅠ級的患者則行宮頸電環切術，獲取進一步準確病理診斷，不同部位級別不同時則以病理級別高的為準。（4）HPV E6/E7 mRNA檢測：采用購自河南中美合資科蒂亞生物技術有限公司的儀器及試劑盒，嚴格按照試劑盒說明進行操作，標本采用冷光儀進行檢測，檢測結果經計算機相關處理后轉換為拷貝數，若拷貝數≥1 copy/mL則為陽性。

1.3 觀察指標及判定標準 比較兩組對CINⅡ+的診斷價值、陰道轉診率（為患者行HPV E6/E7 mRNA或HPV DNA檢測結果為陽性后行陰道鏡檢查與該組總例數的比值）、滿意度（患者根據檢查效果、檢查效率及對檢查的信任度對該檢查綜合評定，評定等級為滿意、一般、不滿意，滿意度為評定等級為滿意例數占該組總例數的比值）。

1.4 統計學處理 使用SPSS 13.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組基線資料比較 對照組年齡21～29歲，平均（25.0±1.4）歲；有性生活史40例；1周內有陰道沖洗及用藥0例。研究組年齡21～28歲，平均（25.0±1.6）歲；有性生活史42例，1周內有陰道沖洗及用藥0例。兩組患者在年齡、性生活史、1周內有陰道沖洗及用藥方面比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA檢測CINⅡ+的診斷結果與診斷價值 HPV E6/E7 mRNA檢測診斷CINⅡ+準確度、特異度為72.00%、43.75%，均高于HPV DNA檢測的64.00%、21.05%，比較差異均有統計學意義（P<0.05）。見表1～3。

2.3 HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA檢測陰道轉診率、滿意度比較 HPV E6/E7 mRNA檢測陰道轉診率為76.0%（38/50），低于HPV DNA檢測的86.0%（43/50）（P<0.05）；HPV E6/E7 mRNA檢測患者滿意度為92.0%（46/50），高于HPV DNA檢測的76.0%（38/50）（P<0.05）。

3 討論

子宮頸癌習稱宮頸癌，是最常見的婦科惡性腫瘤，常見的病理類型有鱗狀細胞浸潤癌、腺癌、腺鱗癌，在病變的發展過程中，可能出現以下幾種癥狀：陰道接觸性出血[7-8]、陰道排液、晚期據癌灶累及的范圍不同還可出現不同的繼發癥狀。宮頸癌危害重大，嚴重危及患者生命健康[9-10]。

隨著中國經濟發展，社會環境日趨復雜，年輕女性的性保護意識薄弱，早性史、早育史、多個性伴侶這些因素均是HPV感染高危因素，目前宮頸癌的發生已明確與HPV感染有關，而且年輕化趨勢已日益明顯，對于宮頸癌前病變，大多數都有三種發展趨勢：進展、保持、消退[11-12]，即使高危型HPV感染，約有60%仍為一過性，不致癌，宮頸疾病篩查指南指出年輕女性的宮頸癌篩查目前主要是細胞學檢查[13]。但細胞學不能很好地預測病變的發展趨勢，且篩查的敏感性和特異性有一定局限，HPV感染后的一過性和不致病性尤其在30歲以下女性中尤為突出，雖然30歲以下女性HPV感染率高，但因為該人群有較強的免疫力等原因，其自然清除率也同樣高，即使有一定的病變，也可以自然清除，所以中外指南不建議HPV用于30歲以下年輕女性的宮頸癌篩查[14-15]。故認為宮頸癌的有效篩查及癌前病變的精準診治需要一種特異強、陽性預測值好的檢測方法[16]。HPV E6/E7 mRNA是一種特異性物質，HPV早期編碼區中E6、E7基因是病毒癌基因，一般情況下不會表達，但是若病毒DNA整合進入宿主細胞DNA，E6、E7基因則將高水平表達，且不受控制，從而引起宮頸癌細胞惡化[17-18]。E6、E7基因的轉錄產物E6/E7 mRNA的水平可以反映癌基因活性，進行E6/E7 mRNA檢測，則可避免反復進行HPV檢測，且可以判斷HR-HPV是否反復感染。HPV E6/E7 mRNA檢測具有較好的特異性和陽性預測值，認為只有HPV的感染存在持續性時，病毒基因和人類基因才會發生整合，導致E6/E7基因激活，以及大量mRNA的轉錄，從而導致大量E6/E7癌蛋白的表達，進一步導致細胞癌變的風險增大[19]，故只有HPV E6/E7 mRNA檢測陽性才有必要行陰道鏡轉診及活檢，并根據結果指導診治，有效避免過度治療、漏診等，同時降低陰道鏡轉診率，節省了醫療資源，減輕了患者心理及經濟壓力，減少過度醫療對該人群生殖健康的影響[20]。

本研究結果顯示，HPV E6/E7 mRNA檢測診斷CINⅡ+準確度、特異度為72.00%、43.75%，均高于HPV DNA檢測的64.00%、21.05%，比較差異均有統計學意義（P<0.05）；HPV E6/E7 mRNA檢測陰道轉診率為76.0%，低于HPV DNA檢測的86.0%（P<0.05）；HPV E6/E7 mRNA檢測患者滿意度為92.0%，高于HPV DNA檢測的76.0%（P<0.05）。故HPV E6/E7 mRNA檢測因其較好的特異性和準確度滿足當下精準醫學的需要，在未來相關檢測發展中有相當大的潛力，也將因其在宮頸癌篩查及宮頸疾病診治中的重要作用為30歲以下年輕患者帶來福音。

綜上所述，HPV E6/E7 mRNA檢測診斷CINⅡ+較HPV DNA檢測準確率高、陰道轉診率低、患者滿意度高，對宮頸疾病的診治有較好應用價值。

參考文獻

[1]張生枝，紹華江，馬建婷.人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA檢測在宮頸病變篩查中的應用價值[J].中國實驗診斷學，2014，18（4）：582-583.

[2]杜彩英，李芳.人乳頭瘤病毒DNA及E6/E7 mRNA檢測在宮頸病變診斷中的比較研究[J].中國優生與遺傳雜志，2015，23（4）：38-39.

[3]劉佳佳，馮姝，瞿全新，等.高危型人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA在宮頸病變篩查中的作用研究[J].中國全科醫學，2014，17（10）：1140-1143.

[4]李景然.人乳頭瘤病毒E6/E7mRNA在宮頸病變中的應用價值[D].合肥：安徽醫科大學，2015.

[5]陳海迎，鄭小冬，鄭建瓊，等.高危型人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA檢測在宮頸人乳頭瘤病毒陽性人群中的分流價值[J].醫學研究雜志，2016，45（5）：141-145.

[6]王璐，王晨陽，王武亮，等.高危型人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA檢測對宮頸高度鱗狀上皮內病變診斷及隨訪價值研究[J].中國實用婦科與產科雜志，2016，32（6）：580-582.

[7]葉麗君，喻長法，蔡莎莎，等.高危型人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA檢測聯合液基細胞學檢查在宮頸病變診斷中的應用[J].中國慢性病預防與控制，2017，25（7）：499-501.

[8]黃杰，于婷，趙金銀，等.高危型人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA質控品的建立[J].藥物分析雜志，2015，35（4）：595-599.

[9]張永欣，張璐.人乳頭瘤病毒E6/E7mRNA檢測在宮頸癌篩查中的意義[J].中國婦幼健康研究，2016，27（7）：816-818.

[10]劉曉燕，劉羽，滿霞霞，等.人乳頭瘤病毒E6/E7mRNA檢測在人乳頭瘤病毒陽性患者分流中的應用價值[J].中國婦幼保健，2017，32（5）：926-928.

[11]呂秀芳，孔令非.人乳頭狀瘤病毒E6/E7 mRNA研究進展[J].中華實用診斷與治療雜志，2016，30（2）：111-113.

[12]李曉林，夏寶國，歐慧慧，等.高危型人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA與其DNA檢測在子宮頸病變中的對比研究[J].中國婦產科臨床雜志，2017，18（4）：320-323.

[13]季雯婷，狄文.人乳頭瘤病毒與宮頸病變的研究進展值[J].國際婦產科學雜志，2013，40（2）：138-141.

[14]葉鳳如，黃玉玲，吳慧卿，等.人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA檢測在年輕女性宮頸癌篩查及宮頸疾病診治中的應用研究[J].中國婦幼保健，2017，32（7）：1406-1408.

[15]李智珍.人乳頭瘤病毒檢測在宮頸CIN診斷及隨訪中的意義[J].實驗與檢驗醫學，2016，34（6）：764-766.

[16]李茉，莊薇，步仰高，等.高危型人乳頭瘤病毒感染及分型對宮頸病變的影響分析[J/OL].中國醫學前沿雜志（電子版），2017，9（4）：101-104.

[17]朱含笑，張飛飛，陳珊珊，等.人乳頭瘤病毒檢測在宮頸病變診斷和治療中的臨床價值[J].中國婦幼保健，2017，32（15）：3504-3506.

[18]劉桂芳.HPV E6E7蛋白和宮頸癌的關系探討[J].中國衛生標準管理，2017，8（19）：70-71.

[19]盧曉平.人乳頭瘤病毒在宮頸癌及癌前病變中的意義[J].實用臨床醫藥雜志，2017，21（17）：221-222.

[20]魏彩平.人乳頭瘤病毒E6/E7蛋白在宮頸病變篩查中的應用[J].川北醫學院學報，2017，32（5）：670-672.