氣相色譜檢測茶青有機磷農(nóng)殘假陽性峰的判定

李惠林

摘 要：利用氣相色譜檢測茶青有機磷農(nóng)殘時，出峰時間為11～15 min的一峰，響應值非常高。在試驗條件不足、無法滿足氣相質(zhì)譜等條件下，很難準確判斷此峰的性質(zhì)。本試驗以質(zhì)譜條件下未檢出茶葉中禁限用農(nóng)藥的當季春茶茶青為材料，隨機抽取一份茶青樣品進行試驗。通過比對不同極性的色譜條件、不同前處理提取方法，分析5種常見的有機磷類農(nóng)殘氣相色譜檢測假陽性峰出峰情況。試驗結果表明，此峰不是茶葉必檢的5種有機磷類農(nóng)藥，可視為假陽性峰。

關鍵詞：茶青；有機磷；氣相色譜檢測；假陽性峰

文章編號： 1005-2690（2018）06-0111-03 中圖分類號： TS255.7；O657.63 文獻標志碼： B

有機磷是目前我國各地區(qū)應用最廣泛的農(nóng)藥之一。近年來，對茶葉檢定要求不斷提高，農(nóng)藥殘留最低限量標準不斷降低，有機磷類部分農(nóng)藥勢必成為茶葉中不得檢出的重要指標。而茶葉中的內(nèi)含物質(zhì)非常豐富，是茶葉營養(yǎng)豐富的保證。但同時內(nèi)含物質(zhì)的多樣，會對某些檢測結果造成影響，勢必成為茶葉農(nóng)藥殘留檢測的難點。加上現(xiàn)今我國農(nóng)業(yè)檢測還未能全面普及質(zhì)譜儀等高等分析儀器，使得大部分能夠第一時間接觸到茶青的檢測機構，在檢測茶青中有機磷的農(nóng)藥殘留時，常常會受到內(nèi)含物的干擾，用單一方法的氣相色譜檢測造成誤判的情況難免發(fā)生，從而錯過了在第一階段就進行茶青農(nóng)殘控制的先機。因此，在單一氣相色譜檢測條件下對茶青有機磷農(nóng)殘假陽性峰進行測定的試驗值得探究。

本文就前處理方法不同、色譜柱極性不同的兩個變量，對茶青在有機磷檢測中常常出現(xiàn)的假陽性峰進行對比分析，并展開探討。

1 材料與方法

1.1 儀器

儀器采用日本島津GC-2014氣相色譜儀，附FPD檢測器，Labsolution色譜工作站，毛細管色譜柱有Rtx-5（30 m×0.25 mm×0.25 μm）、Rtx-50（30 m×0.53 mm×1.0 μm）和Rtx-1701（30 m×0.25 mm×0.25 μm）3種規(guī)格，均質(zhì)機，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，附水浴加熱鍋，氮吹儀。

1.2 試劑

丙酮（色譜純）、乙腈（色譜純）、乙酸乙酯（分析純）、磷酸（85%）、氯化銨（分析純）、氯化鈉（分析純）、無水硫酸鈉（分析純）、助濾劑Celite545、二氯甲烷（分析純）、弗洛里矽柱。農(nóng)藥標準溶液有殺螟硫磷、倍硫磷、對硫磷、甲基對硫磷、毒死蜱（購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研檢測所，濃度均為100 μg/mL）。

1.3 試驗方法

根據(jù)前處理方法不同和色譜柱不同兩個變量進行對比分析。

1.3.1 前處理方法

1.3.1.1 方法一

按NY/T 761—2008蔬菜水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定方法執(zhí)行。本方法以乙腈為浸提液，丙酮為最終溶劑[1]。

1.3.1.2 方法二

按GB/T 14553—2003糧食、水果和蔬菜中有機磷農(nóng)藥測定的氣相色譜法的方法執(zhí)行。本方法以丙酮和二氯甲烷為雙溶劑提取待測物[2]。

1.3.2 色譜柱選擇

依小到大分別選擇弱極性色譜柱Rtx-5、中等極性色譜柱Rtx-50、Rtx-1701這3種色譜柱。

1.3.3 色譜條件

進樣口溫度220 ℃；檢測器溫度250 ℃；柱溫150 ℃（保持2 min），以8 ℃/min的升溫速率升溫至250 ℃（保持12 min）；載氣為氮氣（99.999%），流速10 mL/min；燃氣為氫氣（99.999%），流速75 mL/min；助燃氣為空氣，流速100 mL/min；不分流進樣。

2 結果與討論

在常用的農(nóng)藥中，在11～15 min時間段內(nèi)出現(xiàn)的農(nóng)藥峰有甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱、對硫磷等，其中殺螟硫磷為茶葉必檢[3，4]。在單柱檢測環(huán)境下此峰的出現(xiàn)，使得殺螟硫磷是否檢出常常難以判定。因此，如何判定此峰的性質(zhì)，成為茶葉有機磷檢測的重點和難點（圖1～圖4）。

2.1 前處理方法不同對不同茶葉出峰結果的影響

由圖1可知，NY/T 761—2008和GB/T 14553—2003兩種前處理方法，通過不同溶劑的浸提，都檢出疑似峰。

圖1從上往下，第1、2個峰為Rtx-1701柱條件下兩種前處理方法的峰，第3、4峰為Rtx-5柱條件下兩種前處理方法的峰，第5、6峰為Rtx-50柱條件下兩種前處理方法的峰。

由圖可知，在相同柱條件下，不同的兩種前處理方法出峰時間無法區(qū)分，各自的兩峰之間并沒有太大的差別，并且與上述提到的甲基對硫磷等5種物質(zhì)出峰時間都非常接近。若無氣相質(zhì)譜檢測等條件，此茶青通過前處理方法的不同，根本無法區(qū)分是否含有甲基對硫磷等5種常見農(nóng)藥殘留；在相同的柱極性下，此峰的性質(zhì)既無法確定，也無法區(qū)分，說明從處理方法上無法進一步排查此峰。在檢驗過程中，暫時不能通過前處理方法的不同將此物質(zhì)與有機磷類標準物質(zhì)分離，可能需要在后期數(shù)據(jù)處理上進一步加以區(qū)分。

2.2 色譜柱極性不同對不同標品出峰時間的影響

由圖2可知，在Rtx-5色譜柱中，從上往下依次為甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱、對硫磷、茶青1（通過NY/T 761—2008方法處理的茶青，下同）的峰。由圖可看出，倍硫磷、毒死蜱的分離程度較弱，2種農(nóng)藥標準在此柱上幾乎無法明顯區(qū)分。而在此條件下，可以看到茶青1與甲基對硫磷較為相近。

由圖3可知，在Rtx-50色譜柱中，從上往下依次為甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱、對硫磷、茶青1的峰。由圖可看出，殺螟硫磷、毒死蜱、對硫磷的分離程度較弱，待測農(nóng)藥標準本身在此柱上都無法區(qū)分，茶青樣與5個峰都較為相近，單柱條件下，根本無法區(qū)分疑似峰的性質(zhì)，在這5種標準品比對下，較容易被判定為殺螟硫磷。

由圖4可知，在Rtx-1701色譜柱中，從上往下依次為甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱、對硫磷、茶青1的峰。由圖可看出，甲基對硫磷、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱4種峰分離程度較弱，茶青1與毒死蜱的峰幾乎重合，單柱條件下，很容易被判定為毒死蜱農(nóng)藥殘留。

綜上所述，不同有機磷標準物質(zhì)在不同的色譜條件下分離情況不同，出峰時間與峰大小都有相應的差別。因為Rtx-1701色譜柱極性較大，在此柱中，5種有機磷標準物質(zhì)分離情況較好，而在Rtx-5和Rtx-50柱條件下，部分標準物質(zhì)會出現(xiàn)重疊。通過調(diào)整分析方法的認定范圍，在不同的色譜柱極性條件下，茶青中檢出的疑似峰分別被判定為不同物質(zhì)。

2.3 茶葉假陽性峰判定結果

通過兩種變量前處理方法不同、色譜柱極性不同的交叉試驗，驗證出在此條件下性質(zhì)較接近的5種標準品及茶青樣品的出峰情況，得出峰時間及峰面積，見表1。

此茶青通過Rtx-5柱檢出峰出峰時間判定被認定為甲基對硫磷；通過Rtx-50柱檢出被認定為殺螟硫磷；通過Rtx-1701柱檢出被認定為毒死蜱。通過不同極性色譜柱的分離比對得出不同結論可看出，此峰不是5種有機磷類任何一種，可視為假陽性峰。

綜上所述，在檢測條件不足的情況下，通過前處理方法的不同，無法排查茶青有機磷試驗中疑似峰的性質(zhì)。但可以通過不同極性色譜柱進樣得出不同判定結果的方法證明是否為假陽性峰。

3 結論

通過不同極性的色譜柱比對結果，可以證明茶葉中出現(xiàn)的該類物質(zhì)不是上述茶葉必檢的5類有機磷類物質(zhì)中的任何一種。由試驗可得出結論，以GB 2763—2016 《食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量》國家標準中推薦的茶葉中有機磷類前處理方法GB/T 14553—2003 和NY/T 761—2008對茶青進行處理，對疑似峰的排除沒有明顯的效果，但是可以通過雙柱或三柱氣相色譜檢測法等對此類疑似的陽性峰進行逐一排查。此類方法對于設備和人員操作要求都不是很高，可以用作判斷茶葉檢出峰是否為假陽性峰的參考，以提高茶葉農(nóng)藥殘留檢測的準確性。

參考文獻：

[ 1 ] 周爽，趙偉軍.有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥在蔬菜中的多種殘留組分的分析[J].吉林林業(yè)科技，2011（05）：1-3.

[ 2 ] 熊英，楊俊英，康月瓊，等.蔬菜中13種有機磷農(nóng)藥殘留量的雙柱法氣相色譜測定[J].西南農(nóng)業(yè)學報，2009（02）：528-531.

[ 3 ] 陳智東，陳浩.一種快速測定蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留的氣相色譜前處理方法[J].農(nóng)藥科學與管理，2008（10）：20-22.

[ 4 ] 蔣迎，魯成迎，汪慶華，等.茶葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留雙柱氣相色譜檢測技術初探[J].中國茶葉加工，2005（03）：41-42，44.

（收稿日期：2018-05-10）