倪圳偉
(成都市實驗外國語學校,四川 成都 610213)
桑葚又名烏椹、桑蔗、桑果等,是桑科植物桑(Morus alba L.)的果穗,其含有花青素、維生素、多糖、氨基酸等成分,是著名的藥食同源中藥,不僅具有生津潤燥和滋陰補血的功效,還可以用于治療須發早白、腸燥便秘、肝腎陰虛、心悸失眠等癥狀[1]。《本草綱目》和其他醫藥典籍中記載了桑葚的用法和應用價值,在臨床上其可用于防癌抗癌、治療貧血、防止血管硬化等。而桑葚中所含的多糖類成分具有抗輻射、抗氧化、免疫調節等功能。近年來,國內多位學者對桑葚多糖的提取工藝進行了研究。
本文總結了近年來桑葚多糖提取工藝的研究概況,希望能為桑葚多糖提取工藝的深入研究和桑葚的開發利用提供參考。
植物中的有效成分主要存在于以纖維素為主構成的細胞壁內,溶出存在阻力,影響了提取效果。利用纖維素酶來分解纖維素,有利于植物中有效成分的提取和溶出。劉曉露等[2]利用纖維素酶來分解纖維素,從桑葚中提取桑葚多糖,并且通過單因素試驗來考察酶解溫度、酶用量、酶解時間等因素對桑葚多糖提取率的影響。從試驗中可知,當酶解時間為150 min時,桑葚多糖提取率最高;超過150 min,會因雜質的溶解而使提取率有所下降,并發現酶法提取試驗受溫度影響最大,其次是酶解時間,而酶用量在試驗范圍內影響最小。最終通過正交試驗篩選出最佳工藝條件:酶解時間150 min、酶用量40 mL、酶解溫度45℃,該條件下桑葚多糖的提取率可達14.77%。
超聲波輔助提取的原理是利用超聲波的空化效應來增大介質分子運動速度,從而使可溶性成分更快地溶出。該方法可縮短提取時間,還可以避免溫度對其有效成分的影響,從而提高提取率。劉玉玲等[3]運用超聲波輔助提取法提取桑葚多糖,得出最佳工藝條件:藥材以90%乙醇浸泡2次,每次6 h,脫脂、過濾,濾液揮干乙醇后加水,在60℃下超聲提取30 min,過濾后的濾渣用該超聲提取條件提取2次,合并3次濾液并濃縮,該條件下桑葚多糖提取率為9.42%。景榮琴等人[4]通過響應面法用多元二次回歸方程來進行對比分析,從而得到桑葚多糖超聲波輔助提取的優化工藝參數,并利用正交試驗設計研究其影響因素,優化得出其最佳提取工藝條件:溫度72℃、超聲時間23.5 min、料液比1∶27(g/mL),在此條件下,多糖的提取率為17.78%。通過對比發現,該方法比水提法更省時、更高效。
酶—超聲波聯合提取是指在使用酶法提取時,同時也使用超聲波法提取。因為纖維素酶可使細胞壁被分解,從而利于有效成分溶出。而將超聲波和酶法提取相結合,其提取的效率高于這兩種單一的方法,可縮短提取所需時間、提高產量,從而節約成本。劉勝利等人利用單因素考察和正交試驗,對酶法提取、超聲波提取、酶—超聲波聯合提取進行了對比,并得出酶—超聲波聯合提取法的最佳工藝條件:提取時間30 min,提取率為16.86%。
而桑葚多糖的超聲波提取中發現提取工藝受料液比影響最大,其次是溫度,最后是提取時間,得出其最佳工藝條件:溫度70℃、料液比1∶35(g/mL)、超聲時間50 min,該條件下桑葚多糖提取率為14.49%。而酶法提取受溫度影響最大,其次是酶用量,其最佳工藝條件:酶解時間150 min、反應溫度45℃、酶用量2.0 mL,桑葚多糖提取率為14.77%。總體來說,酶—超聲聯合提取方法要優于其他兩種方法。
微波輔助提取的原理是利用微波本身具有的穿透性、選擇性和加熱速率進行提取。微波輔助法能降低能耗和減少雜質,并且縮短生產時間,從而提高提取物純度和提取率。張玲玲等人[5]通過考察微波輻射時間、溶劑pH值、提取次數、液固比等因素對提取率的影響,并且結合了正交試驗進行研究,優化得到其最佳工藝條件:微波輻射 150 s、提取 3 次、料液比 1∶25(g/mL),該條件下桑葚多糖提取率為11.31%。
唐長波等[6]通過單因素試驗、中心組合試驗及響應面分析法,得出桑葚多糖微波輔助提取的最佳工藝參數:微波時間10.4 min、微波功率300 W、料液比1∶50(g/mL),該條件下桑葚多糖提取率5.73%。與超聲波提取熱回流相比,微波提取方法更快、更節能、效率更高。
大孔樹脂純化具有可再生循環利用、產品純度高等優點,且大孔樹脂對桑葚多糖具有較高的吸附性。惠賢民[7]通過動態試驗和靜態吸附,對比了提取物溶液的pH值、洗脫劑和流速等因素對其吸附性能的影響,得出其最佳工藝條件:在室溫下,洗脫劑采用70%乙醇,上柱液體pH值為中性至弱堿性,流速為3 BV/h,當流速達到7 BV/h時,洗脫率達90%以上。趙喜蘭[8]用AB-8大孔樹脂以蒸餾水1 mL/min的流速洗脫后的洗脫液多糖純度可達73.1%,該洗脫液用80%乙醇醇沉后,再以含質量分數為5%三氯酸的正丁醇+氯仿正丁醇(5∶1)來除蛋白,并用DEAE-纖維素柱分離得到了酸性多糖P-2、P-3和中性多糖P-1,并且發現其均有明顯的降糖作用。
目前,桑葚多糖的傳統提取方法主要用乙醇、酸、堿來進行浸提,但是這些方法不僅耗時長、成本高,而且在安全方面還存在隱患,以及酸堿條件下容易破壞多糖自身的空間結構和活性。
相對于傳統的提取方法,酶法提取、超聲波輔助提取、酶—超聲波聯合提取、微波輔助提取以及大孔樹脂吸附提取等,在提取桑葚多糖成分的效率方面顯著提高。其中,酶—超聲波聯合提取法結合了酶法提取和超聲波輔助提取法的優點,值得進一步深入研究其工業應用的可行性。