11種殺菌劑對梨樹黑斑病菌的室內毒力測定

曹素芳，王 瑋，趙明新，曹 剛，李紅旭

（甘肅省農業科學院林果花卉研究所，甘肅 蘭州 730070）

梨是世界和我國的重要水果之一，在我國的栽培面積僅次于蘋果[1-2]。由互隔交鏈孢（Alternaria alternata）引起的梨黑斑病是梨主產區危害嚴重的主要病害之一[3-4]，導致梨葉與果實產生黑斑癥狀及早期落葉，對梨樹體健康構成嚴重威脅。該病在甘肅省各地均有發生，尤其在天水秦州區普遍發生，嚴重影響了梨的產量與品質，已成為制約當地梨產業發展的主要因素之一。

目前，生產上防治梨黑斑病主要依靠化學藥劑。為了減少果農在農田用藥時的盲目性，有效降低梨黑斑病菌的侵染概率，減少因該病害造成的經濟損失，我們對近年來生產上應用比較多的11種殺菌劑在室內采用菌絲生長速率法對梨黑斑病菌進行了毒力測定，以期篩選出對黑斑病菌高效低毒的殺菌劑，為生產上科學合理用藥和病害的有效控制提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

病菌分離自天水市秦州區梨園發病嚴重且癥狀典型的梨樹黑斑病病斑，根據菌落特征和病菌顯微鏡檢確認為梨樹黑斑病菌，試驗前將菌種轉接到PDA平板進行培養待用。

1.2 供試藥劑

10%苯醚甲環唑乳油（中國農科院植保所廊坊農藥中試廠），20%丙環唑乳油（中國農科院植保所廊坊農藥中試廠），40%氟硅唑乳油（美國杜邦公司產品），25%戊唑醇乳油（浙江永農化工有限公司），1.5%噻霉酮乳油（陜西西大華特科技有限公司），50%多菌靈可濕性粉劑（山東華陽科技股份有限公司），70%代森錳鋅可濕性粉劑（利民化工股份有限公司），25%嘧菌酯懸浮劑（英國先正達有限公司），12.5%腈菌唑乳油（華北制藥集團愛諾有限公司），75%百菌清可濕性粉劑（江陰蘇利化學有限公司），12.5%烯唑醇可濕性粉劑（江蘇劍牌農藥化工有限公司）。

1.3 供試培養基

培養基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基（PDA），采用常規方法制備，分裝入150 mL三角瓶（每瓶49 mL），高壓蒸汽滅菌后備用。

1.4 供試藥劑母液的配制及保存

根據預試驗的測定結果，在無菌環境下配制各供試藥劑的母液，置于消毒的三角瓶中在4℃冰箱保存備用。

1.5 毒力測定方法

采用菌絲生長速率法[5]。將供試藥劑母液分別稀釋5個系列濃度（表1），各取1 mL加入49 mL定量滅菌冷卻至50～55℃的PDA培養基中，搖勻，制成不同濃度帶藥平板，以加入1 mL無菌水的培養基平板為對照，4次重復。在無菌條件下，用滅菌打孔器自菌落邊緣切取直徑5 mm菌餅，接入帶藥和對照培養基平板中央，菌絲面朝下。

表1 11種殺菌劑對梨樹黑斑病菌的抑制率

表2 11種殺菌劑對病原菌的毒力測定結果

各處理培養皿置于25℃恒溫培養，對照菌落直徑長到培養皿直徑的90%時，用十字交叉法測量各處理的菌落直徑，計算各藥劑處理對病菌菌絲生長的抑制率。采用唐啟義和馮明光[6]的實用統計分析及其DPS數據處理系統軟件，用生物測定-數量型數據機率值分析模型計算各種藥劑的毒力回歸方程（y=bx+a）、EC50和相關系數r。

2 結果與分析

2.1 不同藥劑對病原菌的抑制效果

從表1看出，11種藥劑在設計濃度下均對梨樹黑斑病病原菌有抑制作用。隨著藥劑濃度的升高，其對病原菌的抑制率增加。70%代森錳鋅可濕性粉劑800.00 μg/mL、12.5%烯唑醇可濕性粉劑160.00μg/mL、10%苯醚甲環唑乳油40.0000μg/mL、25%戊唑醇乳油40.000 0 μg/mL、20%丙環唑乳油40.000 0 μg/mL 和 40%氟硅唑乳油 2.000 0 μg/mL對病原菌的抑制率均在91%以上，表明這6種藥劑在該濃度下對病原菌的抑制效果較好。

2.2 不同殺菌劑對病原菌的毒力測定

各藥劑對梨樹黑斑病菌的毒力大小不同（表2）。40%氟硅唑乳油EC50值最低，為0.401 6 μg/mL，表明40%氟硅唑乳油對病原菌的毒力作用最強；其次是10%苯醚甲環唑乳油、20%丙環唑乳油和25%戊唑醇乳油，EC50值分別為 1.4780 μg/mL、2.018 5 μg/mL和 4.101 0 μg/mL；而 1.5%噻霉酮乳油和75%百菌清可濕性粉劑EC50較高，分別達886.520 0 μg/mL 和 759.468 0 μg/mL，表明這兩種藥劑對病原菌的毒力作用最弱。相關性（r）分析表明，75%百菌清可濕性粉劑對病原菌的相關性系數為0.876 1，沒有達到顯著水平，其它10種供試藥劑均達到極顯著水平。

2.3 病原菌對不同藥劑的敏感性

從毒力回歸方程看出，不同藥劑處理的斜率（b值）不同（表2）。40%氟硅唑乳油、50%多菌靈可濕性粉劑和70%代森錳鋅可濕性粉劑的b值較大，分別達到1.465 7、1.430 4和1.528 9，表明病原菌對40%氟硅唑乳油、50%多菌靈可濕性粉劑和70%代森錳鋅可濕性粉劑較敏感。而75%百菌清可濕性粉劑和25%嘧菌酯懸浮劑的b值較小，分別為0.530 7和0.611 2，表明病原菌對75%百菌清可濕性粉劑和25%嘧菌酯懸浮劑不敏感。

3 小結與討論

選用11種殺菌劑測定了對梨黑斑病菌菌絲生長抑制作用，結果表明，10%苯醚甲環唑乳油、25%戊唑醇乳油、40%氟硅唑、12.5%烯唑醇可濕性粉劑、20%丙環唑乳油及70%代森錳鋅可濕性粉劑對梨黑斑病菌菌絲生長抑制率均能達到90%以上。在供試的11種殺菌劑中，對病原菌菌絲生長毒力最強的是40%氟硅唑乳油；EC50為0.401 6 μg/mL；其次為10%苯醚甲環唑乳油、20%丙環唑乳油和25%戊唑醇乳油；1.5%噻霉酮乳油的毒力最弱，為886.520 0 μg/mL，從毒力回歸方程的b值分析看出，梨樹黑斑病病菌對70%代森錳鋅可濕性粉劑、40%氟硅唑乳油和50%多菌靈可濕性粉劑敏感性較高。綜合比較分析，40%氟硅唑乳油、10%苯醚甲環唑乳油、20%丙環唑乳油及25%戊唑醇乳油這4個處理可以作為防治梨黑斑病的首選藥劑和劑量。

化學殺菌劑是防治梨黑斑病的主要手段。本研究通過對梨黑斑病菌的藥劑篩選，初步明確了對病菌有較高毒力的殺菌劑，結果與付余波[7]和崔建潮[8]的報道基本一致。本試驗所測的藥劑EC50值相對較高，這可能與菌株地理來源不同有關。朱紅艷[9]研究表明，苯醚甲環唑對梨黑斑病菌菌株的EC50分布在0.719 0～1.488 6 μg/mL范圍內，菌株表現為敏感，但存在敏感性降低的菌株。本研究測得的苯醚甲環唑的EC50值為1.478 0 μg/mL，也可能與病原菌對藥劑的敏感性降低有關。黑斑病菌分生孢子產生在病害循環中是非常關鍵的一環，本研究僅測定了供試藥劑對病原菌菌絲的毒力大小，對分生孢子的毒力大小還需進一步研究。

在長期的農藥使用過程中，梨樹病害對常規性的殺菌劑勢必會產生一定的抗藥性，還易造成農藥殘留和環境污染。在生產實際中，還應根據根據梨黑斑病的發病規律，交替使用藥劑，以有效控制梨黑斑病的發生。還應通過整形修剪改善田間通風透光條件及溫濕度變化等其它農業措施，降低發病條件，減少農藥的使用量，以延緩病原菌抗藥性的產生，延長這些殺菌劑的使用壽命。本試驗只供田間病害防治時選藥提供參考，為了更進一步明確藥效，還應對這些殺菌劑進行系統的田間防效試驗。