濰坊地區(qū)兒童急性呼吸道感染病毒病原學(xué)分析

蔣華芳 李錦亮 李麗 王媛媛 韓文寧

呼吸道病毒是引起兒童急性呼吸道感染的主要病原體,包括呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)、流感病毒(influenza virus,Flu)、副流感病毒(parainfluenza,PIV)、鼻病毒(human rhinovirus,HRV)、腺病毒(adenovirus,ADV)等。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,偏肺病毒(human metapneumovirus,HMPV)、冠狀病毒(human coronavirus,CoV)、博卡病毒(human bocavirus,BoV)等新的呼吸道病毒不斷被發(fā)現(xiàn)［1］,而呼吸道病毒的流行又有一定的地域、季節(jié)、年齡分布特點［2］。為了解濰坊地區(qū)急性呼吸道感染患兒病毒流行情況,為臨床診治和疾病預(yù)防控制提供參考,本研究對該地區(qū)2016—2017年14歲以下769例住院兒童進(jìn)行了常見呼吸道病毒的檢測和分析。

1 材料與方法

1.1 研究對象 2016年7月至2017年6月濰坊市婦幼保健院兒科因急性呼吸道感染住院患兒共769例,其中男性患兒402例,女性患兒367例,男女比例為1.1∶1。納入研究的患兒年齡最小29 d,最大14歲,按年齡分成4組,其中29 d～6個月組218例,6個月～1歲組203例,1～3歲組178例,3～14歲組170例。急性呼吸道感染診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《諸福堂實用兒科學(xué)》第 7 版［3］。

1.2 標(biāo)本采集與檢測 患兒入院24 h內(nèi),采集鼻咽部分泌物,置于裝有3 ml病毒保存液的收集管內(nèi),編號,立即-70℃冰箱凍存。標(biāo)本采集均獲得患兒家屬知情同意。采用QIAamp Viral RNA試劑盒提取病毒核酸,基于毛細(xì)管電泳的多重RT-PCR法檢測 16種呼吸道病毒,包括 FluA、FluB、sHlNl、PIV-1、 PIV-2、 PIV-3、 RSVA、 RSVB、 HRV、 ADV、HMPV、CoV-NL63、CoV-229E、CoV-OC43、CoV-HKU1以及BoV。試劑盒購自ABT公司,具體操作按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行分析,計數(shù)資料用率(%)表示,組間比較采用χ2檢驗。p＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 總體呼吸道病毒檢出情況 769例標(biāo)本中,259例病毒檢測陽性,年齡最小36 d,最大12歲,總檢出率33.68%(259/769)。其中,RSVA檢出率最高,為8.58%(66/769),占總陽性例數(shù)的25.48%(66/259)。其次為 PIV-2、FluA,檢出率分別為6.37%(49/769)、5.85%(45/769),其余病毒的檢出率見表1。兩種及以上病毒混合感染率為5.46%(42/769),以RSV與其他病毒混合感染最常見。

表1 16種呼吸道病毒檢出情況 ［n(%)］Tab.1 The detection of 16 respiratory viruses ［n(%)］

2.2 不同性別呼吸道病毒檢出情況 769例住院患兒中男性402例,女性367例。男性患兒中34.08%(137/402)呼吸道病毒檢測陽性,女性患兒陽性率為33.24%(122/367),二者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＝0.806)。16種呼吸道病毒在不同性別患兒的陽性率差別均無統(tǒng)計學(xué)意義(表2)。

2.3 不同季節(jié)呼吸道病毒檢出情況 根據(jù)濰坊地區(qū)氣候特點,將每年月份按照3～5月為春季,6～8為夏季,9～11月為秋季,12月至次年2月為冬季進(jìn)行劃分。春、夏、秋、冬四季住院患兒呼吸道病毒檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＝0.001)。在陽性病例中,冬季呼吸道病毒陽性率最高,占34.36%(89/259)。RSV主要在冬春季流行,夏季檢出率最低。PIV在春夏季高發(fā),冬季陽性率最低。Flu、HRV、ADV無明顯季節(jié)流行特點,呈全年散發(fā)(表3)。

2.4 不同年齡組呼吸道病毒檢出情況 不同年齡組患兒總體病毒檢出率不同。按照年齡分組,29 d～6個月組、6個月～1歲組、1～3歲組及3～14歲組的陽性率分別是34.40%、40.89%、30.90%、27.06%。6個月～1歲組病毒陽性率最高,6個月以上患兒隨年齡增長,病毒陽性率逐漸下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2＝8.724,P＝0.033)。 RSV在各年齡組間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＝0.016),低年齡組的檢出率明顯高于高年齡組。Flu在高年齡組的檢出率高于低齡組(P＝0.005),ADV僅在3歲以下患兒中檢出(圖1)。PIV、HRV檢出率在不同年齡組間無顯著性差異(P＞0.05)。HMPV、CoV、BoV因總體檢出率低未進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析(表4)。

表2 16種呼吸道病毒檢出率的性別分布 ［n(%)］Tab.2 The distribution of 16 respiratory viruses in different sex ［n(%)］

表3 16種呼吸道病毒檢出率的季節(jié)分布 ［n(%)］Tab.3 The distribution of 16 respiratory viruses in different seasons ［n(%)］

圖1 各病毒不同年齡組的陽性檢出率Fig.1 The positive detection rates of respiratory viruses in different age groups

2.5 不同呼吸道疾病的病毒檢出情況 不同呼吸道疾病的病毒檢出率不同,臨床診斷以毛細(xì)氣管炎的病毒檢出率最高30.89%(80/259),支氣管肺炎、急性支氣管炎、支氣管哮喘并感染及急性上呼吸道感染的檢出率分別為21.24%、22.39%、15.83%和9.65%。毛細(xì)支氣管炎的主要檢出病原體是RSV。

表4 16種呼吸道病毒檢出率的年齡分布 ［例數(shù)(%)］Tab.4 The distribution of 16 respiratory viruses in different age groups ［cases(%)］

3 討論

兒童呼吸道感染以病毒感染為主,不同病毒的流行與發(fā)病年齡、季節(jié)及地區(qū)呈現(xiàn)一定的相關(guān)性。了解濰坊地區(qū)兒童呼吸道病毒感染的病毒病原譜,有助于提高臨床診療效果,減少抗生素的不合理應(yīng)用。

兒童呼吸道感染病毒陽性率不同地區(qū)有一定差別。2016—2017年濰坊地區(qū)住院兒童急性呼吸道感染病毒總檢出率33.68%,高于九江地區(qū)18.86%［4］,低于南京地區(qū) 10.93%［5］。 檢測陽性率居于前3位的病毒是RSV 9.23%,PIV 7.93%,Flu 6.89%,分別占總分離病毒數(shù)的27.41%、23.55%、20.46%,其他病毒檢出率相對較低,說明濰坊地區(qū)兒童呼吸道病毒感染的主要病原體是RSV、PIV、Flu。賴劍秀等［6］報道臺州地區(qū)7種常見呼吸道病毒前 3位為 FluA、RSV、FluB,構(gòu)成比依次為38.63%、31.48%、12.08%。本研究與其在分布和構(gòu)成比方面有一定差別,考慮濰坊地區(qū)氣候干燥,冬季氣溫低,可能更適合RSV生存繁殖。混合感染以RSV合并其他病毒感染為主,這與RSV檢出率高有一定關(guān)系。

本研究發(fā)現(xiàn),兒童急性呼吸道感染的病毒檢出率男性34.08%,女性33.24%,不同性別間檢出率無明顯差異。此結(jié)果與國內(nèi)大多數(shù)研究一致,認(rèn)為呼吸道病毒在感染患兒時不存在性別差異［7-8］,但中國香港、法國學(xué)者報道當(dāng)?shù)睾粑啦《靖腥镜臋z出率男女存在顯著差異［9-10］。

呼吸道感染與季節(jié)分布有一定的相關(guān)性。一年四季中,冬季呼吸道病毒檢出率最高42.18%,夏季最低25.82%。冬季仍是呼吸道病毒感染的高發(fā)季節(jié),考慮與低溫環(huán)境下病毒存活時間長,冬季兒童呼吸道抵抗力低,病毒普遍易感有關(guān)。各呼吸道病毒在不同季節(jié)呈現(xiàn)一定的流行特點,RSV主要在冬春季檢出,PIV以春夏為主,這與李權(quán)恒等［11］的研究結(jié)果一致。而檢出率位于第3位的Flu無明顯季節(jié)特點,北京哨點醫(yī)院嚴(yán)重急性呼吸道感染病例中Flu在冬春季高發(fā)。不同的研究結(jié)果可能與以下因素有關(guān):首先,每年Flu的活動強度不同。其次,兩項研究的病例納入標(biāo)準(zhǔn)不同。最后,哨點醫(yī)院監(jiān)測數(shù)據(jù)樣本量大,可能更具有說服力［12］。不同年齡段呼吸道病毒的檢出率明顯不同。納入研究的住院病例中,3歲以下患兒占大多數(shù),年齡越大,因呼吸道感染的住院病例越少。3歲以上兒童病毒感染陽性率低,考慮于其機體抵抗力相對較高,呼吸道感染后以門診治療為主有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn),隨年齡增長,呼吸道病毒檢出率呈下降趨勢,與莫江萍等［13］的研究結(jié)果一致。6個月～1歲組病毒陽性率最高,考慮與嬰兒母傳抗體水平逐漸下降,自身免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善,免疫功能低下有關(guān)。29 d～6個月組嬰兒病毒陽性率34.40%,與該年齡段嬰兒以居家活動為主,生活環(huán)境單一,與外界接觸少有一定關(guān)系。本研究發(fā)現(xiàn)RSV在嬰幼兒中感染率較高,Flu集中在大年齡組兒童發(fā)病。PIV檢出率在不同年齡組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義,與錢昕等［14］報道的結(jié)果一致。

兒童急性呼吸道感染中以毛細(xì)支氣管炎的病毒檢出率最高,且RSV占大多數(shù),患兒表現(xiàn)出喘息的癥狀,提示RSV感染可能是引起喘息發(fā)作的原因之一［15］。急性上呼吸道感染僅占檢測陽性病例數(shù)的9.65%,考慮該類患兒以口服藥物治療為主,與納入研究的病例數(shù)少有關(guān)。ADV僅在3歲以下組中檢出,雖然檢出率低,但ADV下呼吸道感染的臨床表現(xiàn)重,并引起肺功能損害［16］,故ADV感染在嬰幼兒下呼吸道感染中仍是一個不可忽視的原因。但青海一項針對發(fā)熱呼吸道癥候群病例的研究提示ADV在5～18歲組檢出率較高,考慮與該研究納入的人群較廣有關(guān)［17］。

綜上所述,濰坊地區(qū)住院兒童急性呼吸道感染的主要病毒病原體是RSV、PIV、Flu。隨年齡增長,病毒陽性率逐漸下降,冬季仍是病毒感染的高發(fā)季節(jié)。本研究也有一定局限性,因時間短、納入病例少,一些病毒(HMPV、CoV、BoV)的檢出率低,不能反映其感染流行特點,有待進(jìn)一步多中心、大樣本的檢測與研究。

利益沖突:無