葉琳 蔡賢惠
【摘要】 目的:探討采集量、保存時間、溶血及離心時間與速度對凝血四項檢測結果的影響。方法:選取2016年3月-2017年12月在筆者所在醫院門診及住院患者100例,均行凝血四項檢測,分析不同采集量、保存時間、溶血及離心時間及速度對凝血四項檢測結果的影響。結果:采集量<2 ml標本的凝血酶時間(TT)、活化部分凝血酶時間(APTT)及凝血酶原時間(PT)均長于采集量合格標本,纖維蛋白原(FIB)水平低于采集量合格標本,差異均有統計學意義(P<0.05);采集量>2 ml標本的TT、APTT、PT均短于重新采集合格標本,FIB水平低于采集量合格標本,差異均有統計學意義(P<0.05);室溫內(20 ℃~25 ℃)保存4 h標本APTT明顯長于2 h標本,TT短于2 h標本,差異均有統計學意義(P<0.05);溶血標本的TT長于未溶血標本,APTT、PT短于未溶血標本,差異均有統計學意義(P<0.05);3 000 r/min離心15 min與4 000 r/min離心5 min后,標本的FIB、TT、APTT、PT水平比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。結論:采集量不合理、室溫保存時間過長及標本溶血將影響凝血四項檢測結果,為較快獲得臨床檢測結果可采用4 000 r/min離心5 min替代3 000 r/min離心15 min。
【關鍵詞】 采集量; 保存時間; 溶血及離心時間; 速度; 凝血四項; 檢測結果
doi:10.14033/j.cnki.cfmr.2018.22.019 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805(2018)22-00-02
凝血四項檢查是診斷血栓性或出血性疾病、療效評估和術前預測凝血功能及抗凝血藥物用量監測的重要指標,主要包括凝血酶時間(TT)、活化部分凝血酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)、纖維蛋白原(FIB),其診斷的準確性及可靠性將對臨床疾病診斷和治療造成直接影響[1]。血凝的實驗室檢測不是分析某一中特定物質,而是監測一系列酶促反應終點,故其診斷結果易受凝血標本存儲時間、采集量、離心時間、溶血等多種因素影響[2-3]。因此,對凝血四項檢測結果異常因素進行分析,有助于促進實驗室檢測結果的準確性、可靠性及治療準確性的提高?;诖?,本研究對筆者所在醫院門診及住院患者的100份血液標本展開研究,旨在探討采集量、保存時間、溶血及離心時間與速度對凝血四項檢測結果的影響,為實驗室檢查凝血四項的質量控制提供指導,現報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取2016年3月-2017年12月筆者所在醫院門診及住院患者100例為研究對象,所有患者凝血功能均正常,排除有出血傾向者;所有患者自愿參與本研究并簽署知情同意書。100例研究對象中,男43例,女57例;年齡26~49歲,平均(37.84±6.32)歲。本研究已獲得筆者所在醫院倫理委員會審核通過。
1.2 方法
(1)采集量不同:100例標本中采集量異常40例,其中20例采血量<2ml,20例采血量>2 ml,重新采集血量異常者靜脈外周血2 ml。及時采用離心機進行離心處理,離心速度為3 000 r/min,
10 min后血漿顏色為淡黃色液體,使用美國沃芬公司全自動血凝儀(型號ALC TOP-700)實施凝血四項檢查。(2)保存時間不同:隨機選取20例采集量正常的凝血標本進行即刻凝血四項檢測,并在室溫內(20 ℃~25 ℃)保存標本,分別將這20例標本保存1、2、4 h,在各自到達時間后進行凝血四項檢測。
(3)溶血:采集量正常的標本中溶血(離心后血漿顏色為淺紅色液體)20例,重新采取溶血患者靜脈外周血2 ml(離心后血漿顏色為淡黃色液體),均行凝血四項檢測。(4)離心時間和速度不同:選取采集量正常的凝血標本20例,使用一次性塑料吸管將1 ml吸到干凈的塑料試管中,獲得兩份相同的血液樣本,一份離心速度為3 000 r/min,離心時間為15 min,另一份離心速度為4 000 r/min,離心時間為5 min,即刻對血漿標本進行凝血四項檢測。
1.3 觀察指標
記錄不同采集量、不同保存時間、溶血和未溶血及不同離心時間與速度的凝血四項(FIB、TT、APTT、PT)檢測結果。
1.4 統計學處理
本研究數據采用SPSS 21.0統計學軟件進行分析和處理,計量資料以(x±s)表示,采用t檢驗,計數資料以率(%)表示,采用字2檢驗,P<0.05為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 采集量不同標本凝血四項檢測結果
與重新采集量合格標本比較,采集量<2 ml標本的TT、APTT及PT均明顯較高,FIB水平較低,差異均有統計學意義(P<0.05);采集量>2 ml標本的TT、APTT、PT均短于重新采集合格標本,FIB水平較低,差異均有統計學意義(P<0.05),見表1、表2。
2.2 不同保存時間標本凝血四項檢測結果
即刻及1、2、4 h標本的FIB、PT比較,差異無統計學意義(P>0.05);4 h標本的APTT明顯長于2 h標本,TT短于2 h標本,差異均有統計學意義(P<0.05),見表3。
2.3 溶血和未溶血標本凝血四項檢測結果
與未溶血標本比較,溶血標本的TT明顯較長,APTT、PT較短,差異均有統計學意義(P<0.05);溶血與未溶血標本的FIB水平比較,差異無統計學意義(P>0.05),見表4。
2.4 不同離心時間與速度標本凝血四項檢測結果
3 000 r/min離心15 min與4 000 r/min離心5 min處理后,標本的FIB、TT、APTT、PT水平比較,差異均無統計學意義
(P>0.05),見表5。
3 討論
在凝血四項檢測中確保檢測結果質量的重要環節為血標本采集,抗凝劑和標本比例將對被檢標本的結果造成直接的影響。有關研究表明,抗凝劑濃度減少或增加均將直接影響凝血因子,且血量減少0.5 ml將延長凝固時間,增加0.5 ml將縮短凝固時間[4]。本研究中,采集量<2 ml標本的TT、APTT及PT均明顯長于重新采集合格標本,FIB水平較低,而采集量>2 ml標本的TT、APTT及PT均短于重新采集合格標本,FIB水平較低,與上述報道相似,分析其主要原因為標本注入血太多將造成抗凝劑相對過少,造成血液凝固或血中出現微小凝塊,進而縮短凝固時間;而注血太少將造成抗凝劑相對過多,延長凝固時間[5-6]。
本研究中,4 h標本APTT明顯長于2 h標本,TT短于2 h標本,而即刻及1、2、4 h標本的FIB、PT比較未見明顯差異,表明在室溫下保存時間過長將影響凝血四項檢測結果的準確性。分析其主要原因為長時間保存在室溫(20 ℃~25 ℃)條件下,將造成易變凝血因子Ⅷ及Ⅴ因子對熱不穩定,逐漸喪失凝血因子活性,影響凝固時間[7-8]。在臨床生化檢驗工作中標本發生溶血是一種常見影響因素,本研究中溶血標本的TT明顯長于未溶血標本,APTT、PT較短,而FIB水平比較未見明顯差異,證實溶血將造成凝血四項檢測結果異常。抽血過程不當或不順利等機械因素而破壞紅細胞是標本溶血的主要原因,溶血標本將造成成熟紅細胞膜破裂,釋放出磷脂,加之溶血標本的凝血活性與血小板第Ⅲ因子相似,進而對凝血四項檢測結果造成影響[9-10]。本研究中,3 000 r/min,15 min與4 000 r/min,5 min離心處理后,標本的FIB、TT、APTT、PT水平比較未見明顯差異。提示4 000 r/min離心5 min可替代3 000 r/min離心15 min對血小板血漿進行制備,縮短標本處理時間,較快地獲得準確的凝血檢驗報告[11-12]。
綜上所述,采集量不合格、室溫保存時間過長及溶血將影響凝血四項檢測結果的可靠性及準確性,應控制凝血標本采集量、離心及保存到送檢過程等環節,規范操作流程。
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(收稿日期:2018-03-14)