TP-IgM-WB在排除早期先天梅毒中的應用

宋瀟，王洪軍，趙延明，楊嘉林，蓋希余

（黑龍江省皮膚病防治所，黑龍江 哈爾濱 150001）

先天梅毒（Congenital syphilis）又稱胎傳梅毒（prenatal syphilis）是胎兒被母體血中的梅毒病原體通過胎盤感染所致，可引起死產、早產等，是一種嚴重影響嬰幼兒身心健康的疾病[1]。先天梅毒患兒大多癥狀不明顯，多為隱性感染，由于母體內梅毒特異性IgG抗體分子量較小可自由通過胎盤進入胎兒體內，致使臨床早期診斷胎傳梅毒困難較大，往往需要通過長期的隨訪才能最終確診，從而錯失最佳治療時間。近年來，梅毒發病率持續增高，胎傳梅毒逐年攀升，它影響了梅毒患兒家庭的生活質量，必須要引起高度重視。早期診斷、及時治療、及早排除可疑的梅毒患兒，減少其家庭精神負擔有著非常重要的社會意義。目前，國內在先天梅毒檢測方法上，以梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）、甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（TRUST）為主[2]，但梅毒螺旋體免疫蛋白印跡試驗（Treponema pallidum IgM Western blot，TP-IgM-WB）曾有過相關研究[3-4]，具備較好的敏感性和特異性。本研究采用16例疑似先天梅毒患兒血標本分別行TRUST、TPPA檢測和TP-IgM-WB檢測，評價疑似患兒血清梅毒（TP-IgM-WB）在排除早期先天梅毒中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析2013年6月～2016年12月到本所性病門診進行確診先天梅毒的1月齡內可疑患兒血樣，共計16例。

1.2 疑似先天梅毒隨訪標準 參照我國預防艾滋病、梅毒、乙肝母嬰傳播工作實施方案要求，患兒符合梅毒TRUST、TPPA同時陽性，或TPPA單項陽性，納入疑似先天梅毒隨訪病例范疇，如隨訪期間出現滴度不降反升或由陰轉陽，可確診為先天梅毒，隨訪至18月齡時如TPPA轉為陰性，可排除先天梅毒。

1.3 標本采集 采集疑似先天梅毒患兒外周靜脈血3 ml，分離血清后置于-20℃冰箱中凍存待檢。

1.4 試劑與檢驗方法 按實驗室規范進行TRUST、TPPA、TP-IgM-WB的檢驗，TRUST試劑由上海榮盛生物技術有限公司生產，TPPA試劑由日本富士瑞必歐株式會社生產，TP-IgM-WB試劑產自于德國歐蒙醫學實驗室診斷試劑有限公司，使用的3種試劑均在有效日期到達前。

1.5 統計學方法 運用SPSS 16.0軟件統計分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

16例可疑梅毒患兒在首診時TRUST、TPPA結果全為陽性，TRUST滴度均未達到母體4倍及以上，未達到胎傳梅毒診斷標準，全部需要進行血清學隨訪，具體滴度為1∶1（7例43.75%），1∶2（5 例 31.25%），1∶4（3 例 18.75%），1∶8（1 例6.25%），經過3、6、12月隨訪，TRUST、TPPA全部轉陰，轉陰情況見表1。

表1 16例疑似梅毒患兒血清學試驗轉陰情況Table 1 16 cases of suspected syphilis children serological test negative situation

16例可疑梅毒患兒首診時的TP-IgM-WB結果全部陰性，45 kD、15 kD、47 kD、17 Kd未出現顯色反應，蛋白印記條帶上陽性對照質控線均出現顯色，說明試驗有效。

疑似患兒隨訪后的TRUST、TPPA結果與TP-IgM-WB結果相符合，差異無統計學意義。

3 討論

目前我國先天梅毒的診斷主要以實驗室梅毒血清學和臨床相結合的方法為主，存在著不足[5]。有臨床癥狀的早期胎傳梅毒或患兒血清TRUST滴度大于等于母體4倍的情況下很容易進行確診，但在實際臨床工作中，多數梅毒患兒出生后并沒有明顯的胎傳梅毒癥狀，同時梅毒血清學TRUST滴度數值和與母體結果一致或低于母體數值，不容易進行及時確診，可能導現漏診的情況發生。TPPA、TRUST等作為常用梅毒抗體血清學檢測方法，檢測的IgG和IgM的混合抗體，其中IgG分離量小于IgM可以自由通過胎盤而IgM則不能通過，所以不能單單通過胎兒出生時的血液TPPA和TRUST陽性結果來確診先天梅毒[6]。分別在3個月、6個月、12個月 、18個月監測TPPA和TRUST血清學變化，對于這些疑似先天梅毒患兒是非常必要的，在血清學結果隨訪3個月時如為陰性，并無先天梅毒臨床表現，可以除外先天梅毒感染；3個月后若TRUST滴度一直不轉陰，維持在較低滴度數值，則在每3個月時進行TPPA隨訪至18月齡，若隨訪期間任意一次TPPA結果陰轉，就可以排除先天梅毒。但是，這種長期的隨訪容易致使真正的先天梅毒患兒錯過最好治療時機，另外，還有依從性不好的家庭也容易出現失訪情況。所以，及時有效的排除先天梅毒感染，對無癥狀的疑似先天梅毒及時確診是至關重要的。

梅毒螺旋體蛋白印跡試驗是檢測梅毒特異性IgM或IgG抗體，其敏感性高、特異性強。Dettori等[7]認為免疫印記法用于梅毒診斷優于FTA-ABS（熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗）和TPHA（梅毒螺旋體血球凝集試驗）方法，對于早期梅毒的陽性率為100%。Marangoni等[8]發現，WB的敏感性、特異性均為99%，高于FTA-ABS(敏感性為90%，特異性為89%)。做到早期診斷先天梅毒，為臨床實現及時有效干預可減少先天梅毒的危害[9]。

考慮TP-IgM的檢測在確診早期梅毒中具有重要的意義[10]，本研究針對2013年6月～2016年12月到本所性病門診進行確診先天梅毒的可疑患兒，其TP-IgM-WB結果與TRUST、TPPA結果進行對比，對于常規TRUST、TPPA方法16例疑似梅毒患兒均需進行隨訪，經過3、6、12月隨訪后，TRUST、TPPA全部陰轉，與首診時的TP-IgM-WB陰性結果全部符合。結果表明，TP-IgM-WB法應用于早期排除先天梅毒感染有較高價值，可有效避免對疑似梅毒患兒的長期隨訪過程，值得臨床上大力推廣應用。