不同產區板藍根藥材質量考察

孫丹丹,王剛,和煥香,郭慶梅

(山東中醫藥大學藥學院，山東 濟南 250355)

板藍根為十字花科植物菘藍(IsatisindigoticaFort.)的干燥根，性寒味苦，歸心、胃經,具有清熱解毒，涼血利咽的作用,臨床用于瘟疫時毒、發熱咽痛、溫毒發斑、痄腮、爛喉丹痧、大頭瘟疫、丹毒及癰腫等癥[1]。現代研究表明，板藍根的主要化學成分有(R，S)告依春、靛苷、香草酸、大黃素、香草醛、棕櫚酸、香草乙酮等[2-8]。板藍根的臨床應用比較廣泛，具有抗癌、抗病毒、治療呼吸道疾病等藥理作用[9-12]。板藍根主要分布在河北、安徽、江蘇、河南等省，其他各省也有少量分布，河北為道地產區[13]。藥材市場各地板藍根藥材流通頻繁，加之臨床應用廣泛，尤其需要對不同產地板藍根的質量進行檢測。因此，本實驗對內蒙古、陜西、甘肅、河北、河南、山東、黑龍江7個產地的板藍根進行質量比較。

1 樣品、儀器與試劑

1.1 樣品

從內蒙古、陜西、甘肅、河北、河南、山東、黑龍江7個不同地區收集板藍根藥材各1 000 g，原藥材經山東中醫藥大學郭慶梅教授鑒定，確認為十字花科菘藍(IsatisindigoticaFort.)。見表1。

表1 板藍根的藥材來源Table 1 The source of Isatidis Radix

1.2 儀器

日立L-2000型高效液相色譜儀(日本日立)；色譜柱Agilent C18柱(250 mm×46 mm，5 μm)； FA2004N型電子天平(上海精密科學儀器有限公司)；SX2-4-10箱式電阻爐(山東省龍口市電爐總廠)；HH-S4雙孔四列電熱恒溫水浴鍋(北京科偉永鑫儀器廠)；101-(1)A數顯式電熱恒溫干燥箱(上海陽光實驗儀器有限公司)；8001型恒溫振蕩器(國華儀器)；KQ-250E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

1.3 試劑

蒸餾水；40%乙醇；甲醇(色譜純，天津科密歐公司)；純凈水(杭州娃哈哈集團)；(R, S)-告依春對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：111753-201706)；1%硝酸銀試液，三氯化鐵，無水乙醇，甲醇，稀鹽酸(均為分析純)。

1.4 樣品制備

分別取板藍根藥材50 g，粉碎，過四號篩，備用。

2 方法與結果

2.1 水分、灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物測定方法

水分、灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物按照2015年版《中國藥典》四部[14]0832第二法烘干法、2302總灰分及酸不溶性灰分測定法、2201醇溶性浸出物測定法中熱浸法進行測定。

2.2 (R, S)-告依春的含量測定

2.2.1 色譜條件

2.2.2 對照品溶液的制備

精密稱取(R, S)-告依春的對照品10.1 mg，置于250 mL的容量瓶里，配置標準溶液，(R, S)-告依春的濃度為40.4 μg/mL。配制好的對照品溶液放置于4 ℃下保存，備用[1]。

2.2.3 供試品溶液的制備

稱取板藍根粉末約2.0 g，精密稱定，置200 mL圓底燒瓶中，精密加入蒸餾水100 mL，稱定重量，加熱回流2 h，放冷，再稱定重量，用蒸餾水補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，經微孔濾膜(0.45 μm)濾過，即得。配制好的供試品溶液放置于4 ℃下保存，備用[1]。

2.2.4 線性關系考察

圖1 (R, S)-告依春標準曲線Fig. 1 (R, S)-goitrin standard curve

分別精密吸取質量濃度為40.4 μg/mL的對照品溶液1.0、2.0、3.0、5.0、10 mL分別置10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，得到質量濃度分別為4.04、8.08、12.12、20.2、40.4 μg/mL的對照品溶液，按2.2.1項下的色譜條件測定峰面積，平行測定3次。以峰面積為縱坐標(y)，濃度為橫坐標(x)，進行回歸分析，回歸方程為y= 109 207.499 6x+ 725 92，r=0.999，(R, S)-告依春在4.04～40.4 μg/mL范圍內與峰面積呈良好的線性關系,見圖1。

2.2.5 精密度試驗

精密吸取質量濃度為40.4 μg/mL的對照品溶液，按2.2.1項下的色譜條件連續進樣6次，結果(R, S)-告依春峰面積相對標準偏差為2.39%(n=6)，表明儀器的精密度良好。

2.2.6 穩定性試驗

精密吸取同一份供試品溶液，按2.2.1項的色譜條件分別于0、2、4、8、12、24 h測定，結果(R, S)-告依春的峰面積相對標準偏差為2.35%，表明供試品溶液在24 h內穩定性較好。

2.2.7 重復性試驗

取同一批樣品6份，按2.2.2項下制備，按2.2.1項下的色譜條件測定，測定(R, S)-告依春的峰面積相對標準偏差為1.74%，表明重復性良好。

2.2.8 加樣回收率試驗

精密稱取已測知含量的樣品6份，按2.2.2項下制備供試品，分別加入一定量的(R, S)-告依春對照品，測定峰面積，平均回收率為100.83%，相對標準偏差為2.46%。

2.2.9 供試品含量測定

精密吸取各供試品溶液，按2.2.1項下的色譜條件，注入液相色譜儀，平行測定3次，計算各樣品中(R, S)-告依春的含量。結果見圖2。

圖2 (R, S)-告依春的HPLC圖Fig. 2 HPLC chart of (R, S)-goitrin

2.3 結果與分析

不同產地的板藍根水分、灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物及(R, S)-告依春含量均符合2015年版《中國藥典》的規定。陜西產地的板藍根水分含量最低，河北產地次之，其他產地相對較高；山東產地的板藍根灰分含量最低，內蒙古產地的次之，除陜西產地的板藍根以外，其他產地的灰分質量分數均在5%以下；山東產地的板藍根酸不溶性灰分含量最低，河南產地的次之，其他產地相對較高；陜西產地板藍根的浸出物含量最高，甘肅產地次之，其他產地相對較低；7個產地的板藍根藥材的(R, S)-告依春含量在0.444 ～1.042 mg/g之間，河南產地中的含量最高，甘肅產地的次之，河北產地的最低。結果見表2。

表2 不同產地板藍根藥材含量測定結果(n≥3)Table 2 Content determination results of Isatidis Radix from different producing areas (n≥3)

3 結論

內蒙古、陜西、甘肅等7個產地板藍根的水分、灰分、浸出物和(R, S)-告依春含量都符合2015年版《中國藥典》的標準，但由于各地區氣候、土壤等條件的差異，使得藥材的含水量、灰分、浸出物等質量指標各有差異，該結果給農業生產中藥材種植、加工、保存提供了可靠的指導意見，同時對臨床用藥起到了指導和規范的作用。