關于酒駕乙醇檢測血液樣本保存時效性研究

葉小理

摘要：目的：探討酒駕血液樣本有效保存時間，防止無效檢驗，確保血液中乙醇含量測定結果準確。

關鍵詞：真空抗凝采血管；乙醇含量；血液樣本；保存時效

1、材料與方法

1.1樣本來源

選擇健康成年男性30人，在酒后30 min后至實驗室抽取靜脈血 2 mL 各 10 管 。血樣分別儲存于EDTA-K2 管、枸櫞酸鈉（1：9）管、肝素鈉管等三種真空抗凝采血管中，立即測量各管中血液的乙醇含量，選取其中乙醇濃度≥ 20 mg/100 mL 且含量數值接近的 30 份血樣為研究樣本（三種真空抗凝采血管各10份，分別依次標記為 1～10號），在冰柜 （-20℃）中保存并進行初篩，分別在 0、3、7、14、21、30、42、49 d 測定血液中乙醇含量。根據初篩結果，選擇血液中乙醇含量穩定性較好的采血管，在 -20℃下冷凍存儲，分別在 0、3、7、14、21、30、60、90、120、150 和 180 d 測定血液中乙醇含量，以初始乙醇濃度≥ 20 mg/100 mL且含量數值接近的10 份血樣為研究樣本探討酒駕血液保存時效。

1.2儀器與材料

島津 GC-2010 plus 型氣相色譜儀、島津 HS-20型頂空自動進樣器。

乙醇標準品和叔丁醇標準品均由上海安譜科學儀器有限公司提供，乙醇標準品濃度為 100 mg/100 mL，叔丁醇內標液濃度為40 μg/mL。EDTA-K2管、枸櫞酸鈉（1：9）管、肝素鈉管等真空抗凝采血管均采用江西南昌贛達醫療器械有限公司生產的一次性真空儲血管。

1.3色譜條件

色譜條件：色譜柱為 Rtx-BAC1（30 m×0.32 mm）毛細柱，柱溫 40 ℃載氣為氮氣（純度≥ 99.999%）， 流速 8 mL/min；進樣口溫度 150 ℃；柱流量 5 mL/min，吹掃流量3 mL/min，分流比6.4：1；檢測器為氫火焰離子化檢測器（FID），溫度 250 ℃。頂空進樣：恒溫爐溫度 65 ℃，樣品流路溫度105 ℃，傳輸線溫度 110 ℃，樣品瓶恒溫時間 10 min，樣品瓶加壓時間0.3 min，加壓平衡時間0.3 min，導入時間0.8 min，導入平衡時間 0.4 min，進樣時間 0.5 min，進樣針沖洗時間 0.4 min。

1.4實驗方法

按中華人民共和國公共安全行業標準《生物樣品血液中乙醇的頂空氣相色譜檢驗方法》（GA/T 1073-2013）進行檢驗。采用內標曲線法進行定量測定，標準曲線方程為：y = 0.0574386 x - 0.0266151，y 為乙醇與叔丁醇的峰面積比值，x 為乙醇工作溶液濃度（mg/100 mL）。對同一份血樣進行平行試驗，結果取均值，且雙樣相差應小于等于 5%。

1.5統計學分析

應用 SPSS 20.0 進行重復測量數據的方差分析和單因素方差分析，采用 Duncan 氏新復極差法比較不同處理間的差異顯著性。檢測水準 α≈0.05。

2、結果

2.1-20℃保存條件下三種采血管中血液乙醇含量在各測試時間段的比較

2.1.1三種采血管血液乙醇含量的比較

三種采血管的血液乙醇含量差異有統計學意義（F =221.051， P <0.01）。三種管的血液乙醇含量見表1。

3、討論

綜上所述：本研究證實保存時間對于血液乙醇含量檢測結果有重要影響。建議鑒定部門在采集涉嫌酒駕人員血液后，使用 EDTA-K2 真空抗凝采血管儲存，并于 -20 ℃保存條件下 90 d 內檢驗，以保證血液中乙醇含量測試結果的準確性。

參考文獻：

[1]中華人民共和國國家標準 . 車輛駕駛人員血液、呼氣酒精含量閾值與檢驗： GB 19522-2010[S]. 北京 ： 中國標準出版社，2011.

[2]杜娟，周枝鳳，劉源，等 . 采血消毒對血液中乙醇含量的影響[J]. 中國法醫學雜志， 2015， 30（2）：192-193.