乳品中硫氰酸鈉的含量測(cè)定

趙俊英，趙俊明

(1.隴東學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院，甘肅 慶陽(yáng) 745000；2.山東華宇工學(xué)院，山東 德州 253000)

硫氰酸鈉是生乳中天然存在的一種活性抗菌體系，少量的硫氰酸鈉對(duì)乳品起到保鮮作用。國(guó)際乳聯(lián)(IDF)公報(bào)234號(hào)指出，牛乳中的硫氰酸鈉含量是不穩(wěn)定的，可以達(dá)到10～15 mg/kg，但通常的濃度范圍是2～7 mg/kg。硫氰酸鈉的檢測(cè)方法有高效液相色譜法[1]、離子色譜法[2]、分光光度法[3]、動(dòng)力學(xué)光度法、紅外光譜法等。于超等人采用高效液相色譜法測(cè)定乳品中硫氰酸鈉的含量[1]，該方法對(duì)乳及乳制品中硫氰酸鈉有較高的提取率，回收率均在80%以上，該法分析成本較高，而且耗時(shí)。陳基耘采用離子色譜法測(cè)定乳品中硫氰酸鈉的含量[2]，硫氰酸鈉質(zhì)量濃度在0.10～4.00 mg/L范圍內(nèi)與色譜峰面積呈良好的線性，該方法的檢出限為0.01 mg/L，但樣品的處理過(guò)程較為復(fù)雜。 本文采用分光光度法測(cè)定乳品中硫氰酸鈉的含量，操作簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好，回收率高，特別適用于乳品企業(yè)對(duì)硫氰酸鈉的快速檢測(cè)[4]。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)SPECORD50(德國(guó)耶拿公司) 、電子分析天平FA2004N、三氯乙酸(A.R.)、硫氰酸鉀(A.R.)、硝酸鐵(A.R.)、市售純牛奶(蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進(jìn))。

1.2 樣品處理

準(zhǔn)確吸取20.00 mL市售純牛奶與三角瓶中，為除去牛奶中的蛋白質(zhì)、脂肪等雜質(zhì)，邊振搖邊加入三氯乙酸溶液(200 mg/L)5 mL待混合均勻后靜置15min。用定量濾紙過(guò)濾于干凈的三角瓶中，濾液待用。

2 結(jié)果與分析

2.1 吸收波長(zhǎng)的確定

取上述含硫氰酸根濃度為10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)中進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描。主要數(shù)據(jù)見(jiàn)表1，以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，繪制的曲線見(jiàn)圖1。由圖1可以看出，波長(zhǎng)在340～450 nm范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光值逐漸增大，在460～540 nm范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光值逐漸減小。因此，本文采用的測(cè)定波長(zhǎng)為450 nm。

表1 吸收波長(zhǎng)的確定數(shù)據(jù)

圖1 最大波長(zhǎng)的確定

2.2 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

配制一系列含硫氰酸根濃度為0、2、5、10、15、20、25和30 mg/L的待測(cè)溶液。準(zhǔn)確吸取5.00 mL硝酸鐵溶液(16 g/L)于盛有含硫氰酸根濃度為5 mg/L的25 mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度，搖勻待測(cè)。測(cè)得的數(shù)據(jù)見(jiàn)表2，以硫氰酸根濃度為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖2。由圖2可以看出，在硫氰酸根濃度為0～30 mg/L、波長(zhǎng)為450 nm時(shí)，測(cè)得的吸光度和硫氰酸根濃度呈良好線性關(guān)系，回歸方程為y=0.0258x+0.0976，相關(guān)系數(shù)為0.9965。當(dāng)硫氰酸根濃度大于30 mg/L時(shí)，繪制的曲線偏離了標(biāo)準(zhǔn)曲線，不適用改曲線計(jì)算樣品中硫氰酸根的含量。

表2 含硫氰酸根濃度梯度溶液的吸光值數(shù)據(jù)

圖2 硫氰酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.3 樣品測(cè)定

選取蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進(jìn)等市售純牛奶按上述方法進(jìn)行測(cè)定，經(jīng)多次測(cè)定生鮮乳本底吸光值(生乳硫氰酸根為陰性時(shí)的吸光值)為0.0854±0.0047，本實(shí)驗(yàn)計(jì)算中選用0.0901，測(cè)定結(jié)果表3。

測(cè)得樣品的凈吸光值以及從標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中硫氰酸鈉含量的數(shù)據(jù)如下表所示，符合衛(wèi)生部對(duì)乳品中硫氰酸鈉含量的規(guī)定。由表3可以看出，蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進(jìn)等市售純牛奶中硫氰酸鈉的含量分別為0.5581、1.6202、2.1899、3.0078 mg/L，符合國(guó)際乳聯(lián)(IDF)公報(bào)中，國(guó)內(nèi)外科學(xué)界研究的健康牛奶中硫氰酸鈉含量為0.4～22 mg/L的成果。

表3 樣品中硫氰酸根含量測(cè)定結(jié)果

2.4 回收率試驗(yàn)結(jié)果

對(duì)于以上4種樣品(2.3)進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，按上述試驗(yàn)方法1.2制取4種樣品的乳清液，分別置于4個(gè)標(biāo)有蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進(jìn)的干凈錐形瓶中，以備待用。準(zhǔn)確吸取10.00 mL 蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進(jìn)等市售純牛奶的乳清液于25 mL容量瓶中，再向其中加入1.00 mL含硫氰酸根濃度為1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L的加標(biāo)溶液，然后準(zhǔn)確吸入5.00 mL硝酸鐵溶液(16 g/L)用蒸餾水定容至刻度，搖勻待測(cè)。

按上述2.3試驗(yàn)方法測(cè)定，測(cè)得回收率試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。由表4可以看出，蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進(jìn)等市售純牛奶的回收率分別為90.6%、96.8%、91.8%、96.4%，滿足回收率在80%～120%的要求，表明該方法準(zhǔn)確度較高。

表4 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.5 干擾測(cè)定

以免濾液中含有的三氯乙酸干擾實(shí)驗(yàn)，須進(jìn)行干擾測(cè)定。取三氯乙酸溶液5.00 mL于干凈的容量瓶中，再加入5.00 mL硝酸鐵溶液(16 g/L)，加蒸餾水定容并搖勻，使用紫外分光光度計(jì)測(cè)定其吸光值。

按上述方法，對(duì)樣品蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進(jìn)等市售純牛奶進(jìn)行干擾測(cè)定，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表5。由表5可以看出，干擾測(cè)定結(jié)果為0.0854±0.0047，本實(shí)驗(yàn)計(jì)算中選用0.0901。

表5 干擾測(cè)定結(jié)果

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果

取市售蒙牛純牛奶五份，按1.2方法制備乳清液，再按2.3方法測(cè)定其硫氰酸根含量，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表6。由表6可以看出，市售純牛奶蒙牛(1)～(5)的含量分別為0.5775、0.5796、0.5814、0.5849、0.5871 mg/L，且RSD=0.7%，表明紫外分光光度法重現(xiàn)性較高。

表6 重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

本文采用紫外分光光度法測(cè)定硫氰酸鈉的含量。在硫氰酸根濃度為0～30 mg/L、波長(zhǎng)為450 nm時(shí)，測(cè)得的吸光度和硫氰酸根濃度呈良好線性關(guān)系，回歸方程為y=0.0258x+0.0976，相關(guān)系數(shù)為0.9965，測(cè)得蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進(jìn)等乳品中硫氰酸根的含量分別為0.5581、1.6202、2.1899、3.0078 mg/L，加標(biāo)回收率為90.6%～96.8%。結(jié)果表明，硫氰酸鈉的含量在正常范圍內(nèi)，因此蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進(jìn)等乳品不存在任何風(fēng)險(xiǎn)。而且本方法具有操作簡(jiǎn)便、回收率高、成本低、分析周期短、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。非常適合中小企業(yè)對(duì)乳品中硫氰酸鈉含量進(jìn)行快速檢測(cè)。