血漿水通路蛋白5和血管內皮生長因子在新生兒急性呼吸窘迫綜合征中的表達及意義

謝瑞玉　李維春　楊續

[摘要]目的 觀察血漿水通路蛋白5（AQP5）和血管內皮生長因子（VEGF）在新生兒急性呼吸窘迫綜合征中（ARDS）的表達及變化。方法 選取2015年10月～2017年5月我院收治的37例新生兒ARDS患兒血漿標本，同時，收集同期20例非呼吸系統疾病患兒標本。采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）測定AQP5與VEGF濃度并進行統計學分析。結果 ARDS組患兒的血清AQP5水平均顯著高于非呼吸系統疾病組，差異均有統計學意義（P<0.05）；ARDS組患兒入院72 h的AQP5水平顯著高于入院時、入院24 h，差異均有統計學意義（P<0.05）；非呼吸系統疾病組患兒3個時間段的血清AQP5水平比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。ARDS組患兒的VEGF水平均顯著高于非呼吸系統疾病組，差異均有統計學意義（P<0.05）；ARDS組患兒入院24 h的VEGF水平顯著高于患兒入院時、入院72 h，72 h后趨于回落，差異均有統計學意義（P<0.05）；非呼吸系統疾病組患兒入院時的血漿VEGF水平高于患兒入院24、72 h，且隨著出生時間延長逐漸下降，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 AQP5和血管內皮生長因子在新生兒急性呼吸窘迫綜合征時高表達，其可能參與了新生兒呼吸窘迫綜合征的發生、發展。

[關鍵詞]急性呼吸窘迫綜合征；新生兒；水通路蛋白5；血管內皮生長因子

[中圖分類號] R563.8 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）6（c）-0109-03

[Abstract]Objective To observe the expression and changes of plasma water pathway protein 5 （AQP5） and vascular endothelial growth factor （VEGF） in neonatal acute respiratory distress syndrome （ARDS）.Methods From October 2015 to May 2017，37 plasma samples of newborns with ARDS admitted to our hospital were selected and 20 samples of non-respiratory diseases were collected at the same time.AQP 5 and VEGF concentrations were determined by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） and statistically analyzed.Results Serum AQP 5 levels in ARDS group were significantly higher than those in non-respiratory diseases group，and the differences were statistically significant（P<0.05）.The level of AQP 5 in ARDS group at 72 h after adission was significantly higher than that in admission and 24 h after admission， and the difference was statistically significant（P<0.05）.There was no significant difference in serum AQP 5 levels among children with non-respiratory diseases for three time periods （P>0.05）.VEGF levels in ARDS group were significantly higher than those in non-respiratory diseases group， and the differences were statistically significant（P<0.05）.The VEGF level in ARDS group at 24 h after adission was significantly higher than that in admission and 72 h after admission，and it tended to decline after 72 h， the difference was statistically significant（P<0.05）.Plasma VEGF level of children with non-respiratory diseases was higher than that of children in 24，72 h after admission， and decreased gradually with the extension of birth time， with statistical significance （P<0.05）.Conclusion AQP5 and vascular endothelial growth factor are highly expressed in neonatal acute respiratory distress syndrome.They may be involved in the occurrence and development of neonatal respiratory distress syndrome.

[Key words]Acute respiratory distress syndrome；Neonatal；Water pathway protein 5；Vascular endothelial growth factor

新生兒急性呼吸窘迫綜合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）是由多種原因所引起的肺組織急性彌漫性炎癥綜合征，出生后數小時即出現進行性呼吸困難、青紫和呼吸衰竭，是新生兒時期的常見危重癥，好發于早產兒、母親糖尿病、宮內窘迫或窒息新生兒，也是新生兒尤其早產兒死亡的一個重要原因[1-3]。迄今為止，ARDS仍以臨床診斷為主，尚缺乏敏感特異的實驗室診斷指標，吳靈芝等[4]的研究發現，治療前患兒體內外周血單個核細胞中CD24 mRNA 表達水平顯著高于對照組，經過治療后表達下降，提示單個核細胞CD24可能參與疾病的發生。ARDS發生還與基因突變有關，洪達[5]等的研究發現，肺表面活性蛋白C基因發生變異可導致ARDS的發生，應用表面活性物質替代治療和正壓輔助通氣支持可明顯改善癥狀，這一基因改變均否認有家簇遺傳史，呈散在發病[6]。另外，還有研究表明SP-B外顯子的多態性和TOLL樣受體表達水平與NRDS發生也可能存在相關性，但需要進一步證實[7-8]。以上這些研究在臨床上有一定的參考意義，但都不能起到快速和早期診斷的作用，而與肺泡上皮細胞損傷的相關標志物已經引起人們的關注。本研究通過觀察不同時間段血漿水通路蛋白5（AQP5）和血管內皮生長因子VEGF在新生兒急性呼吸窘迫綜合征中的表達水平，旨在探討其在新生兒急性呼吸窘迫綜合征中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年10月～2017年5月我院收治的新生兒ARDS患兒37例，其中男22例，女15例；胎齡平均（36.52±6.26）周；平均體重（3.17±1.36）kg；ARDS的診斷標準參照實用新生兒學第四版[9]，入院時根據臨床及X線胸片診斷即進行機械通氣與肺表面活性物質治療。同時，收集同期20例非呼吸系統疾病（包括臍帶感染、黃疸、濕疹）患兒標本，其中男13例，女7例；胎齡平均（38.85±3.21）周；體重平均（3.42±1.56）kg，兩組患者的一般資料差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，并與患兒家長簽署知情同意書。

1.2 研究方法

分別采集ARDS組、非呼吸系統疾病患兒入院時，24、72 h的血液標本，3000 r/min離心15 min，血漿置-80°保存備用。采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）測定ARDS組、非呼吸系統疾病組的AQP5與VEGF水平，試劑盒由上海語純生物科技有限公司提供，嚴格按照使用說明書進行操作。

1.3 統計學方法

采用統計學軟件SPSS 16.0分析數據，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1 兩組患兒血清AQP5水平的比較

ARDS組患兒的血清AQP5水平均顯著高于非呼吸系統疾病組，差異均有統計學意義（P<0.05）；ARDS組患兒入院72 h的AQP5水平顯著高于入院時、入院24 h，差異均有統計學意義（P<0.05）；非呼吸系統疾病組患兒3個時間段的血清AQP5水平比較，差異均無統計學意義（P>0.05）（表1）。

2.2 兩組患兒血清VEGF水平的比較

ARDS組患兒的VEGF水平均顯著高于非呼吸系統疾病組，差異均有統計學意義（P<0.05）；ARDS組患兒入院24 h的VEGF水平顯著高于患兒入院時、入院72 h的水平，72 h后趨于回落，差異均有統計學意義（P<0.05）；非呼吸系統疾病組患兒的入院時血漿VEGF水平高于患兒入院24、72 h，且隨著出生時間延長逐漸下降，差異有統計學意義（P<0.05）（表2）。

3討論

新生兒呼吸窘迫綜合征是由肺表面活性物質缺乏或破壞過多，肺泡表面張力增高，肺泡萎陷，進行性肺不張，肺換氣不足，病情持續發展，可引起高碳酸血癥和低氧血癥，進而酸中毒，并引起炎癥因子的釋放，最終導致肺泡上皮細胞和毛細血管內皮損傷。肺泡上皮細胞由覆蓋其表面90%～95%的Ⅰ型肺泡上皮細胞和Ⅱ型上皮細胞構成，AQP5定位于肺泡Ⅰ型上皮細胞，對生理和病理條件下的肺泡內液體的清除起著重要作用。多種肺損傷的動物模型研究表明[10-12]，內毒素、脂多糖的誘導及腫瘤壞死因子的刺激，均可導致AQP5表達下調，進而導致肺水腫，引起肺損傷，并將定位于肺泡Ⅰ型上皮細胞頂膜區的小分子AQP5釋放出來，通過肺-血屏障釋放到血液中，致血漿中的AQP5水平增高。胡金繪等[13]通過觀察不同通氣方式對新生兒血清AQP5水平的影響，結果發現AQP5水平與ARDS的肺損傷程度及機械通氣時間有關。本研究顯示，ARDS組患兒的AQP5水平在入院時，入院24、72 h時顯著高于非呼吸系統疾病組，差異有統計學意義（P<0.05），提示AQP5參與新生兒ARDS的表達；ARDS組患兒RAGE水平在入院時，入院24、72 h時的血漿AQP5水平呈遞增趨勢，差異有統計學意義（P<0.05），入院72 h時水平最高，提示AQP5可能參與新生兒ARDS的發生、發展，觀察AQP5的變化有助于ARDS的療效觀察和預后判斷。

VEGF是特異作用于血管內皮的生長因子，又稱血管通透因子，肺組織中許多細胞如肺泡Ⅱ型上皮細胞、肺泡巨噬細胞等均可釋放VEGF，在維持肺的正常生理功能及抗損傷修復中具有重要意義。正常生理條件下，組織細胞中的VEGF并不直接釋放進入血液中，在ARDS早期由于各種因素刺激，激活巨噬細胞和中性粒細胞，引起肺內及全身的炎癥反應，導致肺泡-毛細血管廣泛損傷，肺泡氣-血屏障破壞，血管通透性增加，釋放大量VEGF，并由肺組織向血液釋放增加，引起血漿中的VEGF水平增高[14]。本研究顯示，ARDS組患兒的VEGF水平在入院時，入院24、72 h時顯著高于非呼吸系統疾病組，差異均有統計學意義（P<0.05），提示VEGF參與新生兒ARDS表達；ARDS組患兒入院時，入院24、72 h VEGF水平的比較，差異有統計學意義（P<0.05），以24 h時最高，72 h開始回落，與文獻報道一致[15]，可能與ARDS患兒經治療后，炎癥反應得到控制，修復的肺泡上皮細胞與內皮細胞釋放的炎癥介質減少有關[16]，提示血漿中VEGF水平可以反映ARDS的發生、發展，觀察VEGF的變化有助于臨床醫生對ARDS的治療效果和預后判斷[17]。

綜上所述，AQP5和VEGF在新生兒急性呼吸窘迫綜合征中的表達增加，其可能參與了新生兒呼吸窘迫綜合征的發生、發展。監測血漿AQP5、VEGF水平在疾病的早期診斷、療效評價及預后判斷中具有一定的臨床價值。

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（收稿日期：2017-12-25 本文編輯：白 婧）