藥物水光注射治療黃褐斑對患者CK10、SOD及MDA表達水平的影響

李卉 胡霜紅 王娟

[摘要]目的：探討藥物水光注射治療黃褐斑的療效及對患者細胞角蛋白10（Cytokeratin 10，CK10）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）及丙二醛（Malondialdehyde，MDA）表達水平的影響。方法：選取筆者醫院2016年5月-2017年5月收治的黃褐斑患者160例，隨機分為傳統組與藥物組，每組80例。傳統組采用傳統穴位注射法治療，藥物組采用藥物水光注射治療。觀察兩組患者額部病損皮膚基底上層CK10表達程度、血清SOD、MDA水平并進行比較分析。結果：治療后，藥物組與傳統組CK10表達程度明顯減弱，藥物組明顯低于傳統組，差異有統計學意義（P<0.05）。藥物組與傳統組SOD表達水平均顯著升高，藥物組明顯高于傳統組，差異有統計學意義（P<0.05）。藥物組MDA水平明顯低于治療前，差異有統計學意義（P<0.05）；傳統組MDA下降不明顯，差異無統計學意義（P>0.05）。藥物組總有效率為93.75%顯著高于傳統組的75.00%，差異有統計學意義（P<0.05）。結論：應用藥物水光注射治療黃褐斑，可降低病損皮膚基底上層CK10表達程度，改善血清SOD和MDA水平，療效較好。

[關鍵詞]水光注射；黃褐斑；細胞角蛋白10；超氧化物歧化酶；丙二醛

[中圖分類號]R758.4+2 [文獻標志碼]A [文章編號]1008-6455（2018）07-0075-03

Abstract： Objective To investigate the effect of drugwater injection in the treatment of chloasma and the effect on the expression level of cytokeratin 10 （Cytokeratin 10， CK10）， superoxide dismutase （Superoxide dismutase， SOD） and malondialdehyde （Malondialdehyde， MDA） in patients. Methods 160 cases of Chloasma in our hospital from May 2016 to May 2017 were randomly divided into the traditional group and the drug group， 80 cases in each group. The traditional group used the traditional acupoint injection，and the drug group with drug water injection. The expression level of CK10，serum SOD and MDA in the upper basal layer of skin onforehead were compared between the drug group and the traditional group. Results After treatment， the expression level of CK10 in the drug group and the traditional group was significantly reduced， and the drug group was significantly lower than that in the traditional group， the differences were statistically significant（P<0.05）. The expression levels of SOD in both the drug group and the traditional group were significantly increased， and the drug group was significantly higher than the traditional group（P<0.05）. The level of MDA in the drug group was significantly lower than that before the treatment（P<0.05）. There was no significant difference in MDA in the traditional group（P>0.05）. The total effective rate in the drug group was 93.75%， which was significantly higher than that in the traditional group（75.00%，P<0.05）. Conclusion The treatment of Chloasma with drug water injection can reduce the expression level of CK10 on the upper basal layer of skin lesions， improve the level of serum SOD and MDA， and improve the curative effect.

Key words： water injection； chloasma； CK10； SOD； MDA

黃褐斑主要表現為黃褐色及淡黃色斑片，主要在兩頰和前頰部分，屬于獲得性色素沉著皮膚病[1]。化妝品使用不當、日曬、精神因素及避孕藥等均是黃褐斑的主要誘因，多發于中青年女性。現臨床主要通過內服藥物、外用脫色劑及光化學手段對黃褐斑進行治療，盡管治療效果明顯，但由于部分患者存在較強的局部刺激甚至灼傷皮膚，具有較明顯的副作用甚至較高的復發率[2-3]。穴位注射以傳統經絡理論為基礎，將已提純藥物注射至經絡，對硬皮病、白塞氏綜合征等國際疑難病均具有優良效果，與針灸治療作用機理存在差別[4]。研究[5-6]提示藥物水光注射通過特制注射工具吸起皮膚并利用負壓將藥物注射至靶向部位的療法，具有并發癥少，臨床療效高等特點，但關于黃褐斑的臨床研究資料較少。故此，本研究探討了藥物水光注射和穴位注射治療黃褐斑的療效及對患者CK10、SOD及MDA表達水平的影響，現報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料：選取筆者醫院2016年5月-2017年5月收治的黃褐斑患者160例，均為女性，隨機分為傳統組與藥物組，每組80例。傳統組采用傳統穴位注射法治療，藥物組采用藥物水光注射治療。傳統組平均年齡（38.73±5.42）歲，平均病程（5.76±1.05）歲；藥物組平均年齡（37.25±6.39）歲，平均病程（5.63±0.98）歲。兩組患者病程等一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 納入及排除標準[7]

1.2.1 納入標準：①經皮膚組織病理檢測確診黃褐斑的患者：面部呈淡褐色至深褐色、對稱性分布且界限清楚的斑片，無炎癥和鱗屑；女性多見，青春期后多發；癥狀不明顯；夏重冬輕有季節性；②近3個月未接受相關治療者；③患者及家屬均知情同意。

1.2.2 排除標準：①血友病患者；②免疫功能低下者；③合并惡性腫瘤、嚴重臟器功能不全、血液系統疾病者；④妊娠或哺乳期婦女；⑤有認知功能障礙者，如精神病患者。

1.3 治療方法

1.3.1 穴位注射法：取顴髎、四白為注射點；額部皮損選陽白；太陽穴處皮損則太陽穴為注射點；鼻部皮損選迎香；眉間皮損選印堂；下頦皮損選承漿；可根據皮損可多選或單選。患者平臥碘伏消毒注射穴位3遍后，無菌紗布擦拭，注射器（5ml）抽取復方當歸注射液，美容注射用小針頭（30G）進行面部穴位注射，每穴0.4ml注射并按壓片刻；注射器原配針頭注射肝俞、氣海、血海、三陰交，每穴0.5ml并按壓片刻；1次/周，4個月/療程，共治療4個月[8]。

1.3.2 藥物水光注射：全臉外敷厚度約3mm的復方利多卡因，保鮮膜包被1h后碘伏消毒3遍，生理鹽水溶液沖洗后，水光注射儀套上水光槍頭，20%負壓，模式為Dose very fast；針長0.6～1.2mm定點給藥復方當歸注射液2ml；患者仰臥位，負壓吸起皮膚，在黃褐斑皮損區域注射，直至皮損區被腫起的小皮丘全覆蓋，剩下的藥液不重疊從面上部、面中部、面下部依次注射，直至注射完；1次/月，共治療4個月[9]。

1.4 觀察指標及檢查方法：SP法檢測并比較藥物組與傳統組患者額部病損皮膚基底上層CK10表達程度：石蠟切片脫蠟水化后室溫10min靜置；抗原修復；室溫10min羊血清封閉，滴加CK10抗體于濕盒中，室溫下1h，PBS洗片；滴加二抗，10min室溫放置，PBS洗片；滴加鏈霉菌抗生物素-過氧化物酶，10min室溫放置，PBS洗片；DAB顯色、蘇木素復染及梯度乙醇脫水，封片后顯微鏡觀察[10]。

取患者治療前后空腹靜脈血，離心后分離血清，酶聯免疫法檢測血清SOD、MDA水平，試劑盒均購于南京建成生物研究所，試驗操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.5 評價標準：治愈：色斑消失，面積消退≥90%；顯效：色斑消失或變淡，面積消退介于60%～89%；有效：色斑變淡，面積消退介于30%～59%；無效：色斑無明顯變化，面積消退≤30%。總有效率=（治愈+顯效+有效）例數/總例數×100%。

1.6 統計學分析：應用SPSS 20.0分析處理數據資料，計量資料采用均數±標準差進行統計描述，組間比較采用t檢驗；等級資料用非參數檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者治療前后CK10表達比較：治療前藥物組與傳統組CK10比較，差異無統計學意義（P>0.05）；治療后藥物組與傳統組CK10表達程度明顯減弱，藥物組明顯低于傳統組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 兩組患者治療前后SOD表達水平比較：治療前藥物組與傳統組SOD比較，差異無統計學意義（P>0.05）；治療后藥物組與傳統組SOD表達水平均顯著升高，藥物組明顯高于傳統組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.3 兩組患者治療前后MDA水平比較：治療前藥物組與傳統組MDA水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）；治療后藥物組MDA水平明顯低于治療前，差異有統計學意義（P<0.05）；治療后傳統組MDA下降不明顯，差異無統計學意義（P>0.05）。見表3。

2.4 兩組患者臨床療效比較：藥物組總有效率為93.75%顯著高于傳統組的75.00%，差異有統計學意義（P<0.05）。見表4。典型病例見圖1～4。

3 討論

黃褐斑屬于慢性疾病多為面失所養而成，具體發病機制尚存在分歧，發病機制主要可分為以下兩點：①黃褐斑多位于表皮層，主要為表皮黑色素增多[11]；②黃褐斑表皮黑色素存在明顯增多[12]。肝脾腎三臟器功能失調致使氣血無法尚榮于面是黃褐斑的主要病機，患者多存在肝腎不足、腎水不充及腎陰虧虛進而導致虛火上炎及水火不濟等病機，穴位注射技術對多種慢性病均具有滿意療效，但部分患者因治療次數頻繁對正常的工作和生活均造成了一定影響[13]。

研究[14]提示藥物水光注射可以對皮膚有效補水，使皮膚更有光澤，有提升緊致、改善細紋的效果；與藥物聯合作用，可有效改善色斑、痘印、敏感、抗衰等。本次注射過程中使用復方當歸注射液（由當歸、川芎、紅花組成），可有效調暢氣機；當歸種的壬二酸、阿魏酸可保護膜脂質不受氧化，具有抗脂質過氧化作用并拮抗自由基對組織的損傷，改善血液循環，促進色素吸收[15]。

角蛋白可在細胞內形成網狀結構，屬于上皮細胞的主要蛋白和結構蛋白，可隨細胞分化程度的升高逐漸增加分子量，與多種皮膚病關系密切[16]。本研究結果顯示，治療后藥物組與傳統組患者CK10水平明顯減弱，藥物組減弱更明顯。上述結果說明藥物水光注射治療黃褐斑，可更有效地降低病損皮膚基底上層CK10表達程度。研究發現黑色素顆粒的轉運和合成可受到多種蛋白的調節影響，其由角質細胞分化后逐漸排出體外，藥物水光注射復方當歸注射液中的當歸、川芎、紅花合用具有活血通經、祛瘀止痛、調理生機的作用；能夠降低CK10表達，降低皮膚的分化程度和細胞代謝速率，進而延緩皮膚老化。

相關研究[17]提示黃褐斑患者MDA水平較高，SOD水平降低，這提示黃褐斑患者存在強烈的過氧化反應，這可能是加重黃褐斑病情的重要因素。MDA具有顯著細胞毒性，屬于脂質過氧化終產物，可準確反映機體的自由基損傷程度；SOD能顯著抑制機體氧自由基活性、減輕氧化應激損傷進而消除新陳代謝的有害物質。本研究結果顯示治療后兩組患者的SOD水平顯著升高，藥物組明顯高于傳統組；藥物組MDA水平明顯降低，傳統組MDA水平下降不明顯。復方當歸注射液中的川芎嗪能明顯升高SOD活性，降低黃褐斑患者過氧化脂質（LPO）含量，對治療黃褐斑臨床實用價值較高，川芎嗪在50～400ng/ml較低的相對安全濃度可有效降低酪氨酸酶活性，抑制黑素細胞增殖，進而減少黑素合成。水光注射將藥物注射于中胚層，可以幫助滋養肌表腠理，改善局部皮膚的血供營養情況，淡化色斑，故而對黃褐斑的治療效果更好。

綜上所述，藥物水光注射治療黃褐斑，可降低病損皮膚基底上層CK10表達程度，改善血清SOD和MDA水平，提高治療效果。

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[收稿日期]2018-04-25 [修回日期]2018-06-07

編輯/朱婉蓉