超聲波輔助去除白果中銀杏酸的工藝優化

潘蕓，肖朝耿，程坷偉，陶緣，楊勝利*

(1.浙江工業大學 藥學院，浙江 杭州 310014； 2.浙江省農業科學院 食品科學研究所，浙江 杭州 310021； 3.浙江康恩貝養營堂食品有限公司，浙江 東陽 322100)

白果中含有豐富的營養物質，具備較高的食藥用價值。日常食用的白果就是銀杏加工制成的干果[1-2]。未加工的白果中含有多種毒性成分，多食會中毒，甚至可導致生命危險[3-4]，但在加熱煮好或曬干加工之后，銀杏果中的有毒成分大量減少，可以直接食用，也可以制成各種各樣的零食和飲料，不過仍存在一定的安全隱患。銀杏脫毒是指利用物理、化學或生物的方法脫去銀杏酸等有毒成分，從而適于人們食用和藥用[5-6]。鑒于此，本文采用超聲波輔助，開展白果中銀杏酸脫毒技術研究。

1 材料與方法

1.1 材料

銀杏樣品系市售帶殼銀杏。

主要儀器：HSW-24型電熱恒溫水浴鍋，上海一恒科技有限公司；R206型旋轉蒸發器，上海申生科技有限公司；JJ500型電子天平，美國雙杰(兄弟)集團有限公司；THZ-82A型水浴恒溫振蕩器，金壇市杰瑞爾電器有限公司；JP-1000B型高速多功能粉碎機，永康市久品工貿有限公司；KQ2200型超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司。

1.2 樣品預處理

購買帶殼的新鮮銀杏，用工具去殼，同時除去種皮，之后在粉碎機內粉碎成糊狀。取糊狀的銀杏果干燥、研磨，過60目篩，得到銀杏粉。

1.3 處理設計

用電子天平稱取1.00 g的銀杏粉，加入20 mL的90%乙醇溶液作為提取劑，超聲20 min，過濾，得到銀杏酸物質的提取液，用分光光度法測定其中的銀杏酸含量。

實驗過程中保持其他因素不變，分別考查料液比(1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60)和提取劑(90%乙醇、水、正己烷)對脫除銀杏酸的影響。在考查料液比的影響時，固定銀杏粉稱樣量，通過改變提取劑的用量調整料液比。在考查提取劑的影響時，每種提取劑條件下均分別超聲20、30、40、50 min。超聲結束后過濾，得到銀杏酸物質的提取液，90%乙醇溶液的提取液可以直接稀釋測量吸光度，以正己烷、水為提取劑得到的濾液需要旋轉蒸發后再經過90%乙醇溶液溶解、過濾、稀釋一定倍數后再測量吸光度。

1.4 銀杏酸含量測定

采用分光光度法。用電子分析天平稱取標準品銀杏酸2.00 mg，用無水乙醇溶解，定容至50 mL，配成40 mg·L-1的標準溶液。分別量取標準溶液0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL于10 mL容量瓶中，加入乙醇定容，振蕩搖勻，在310 nm處測定吸光度，繪制標準曲線。取處理過的樣品，同樣在310 nm處測定吸光度值，推算出提取液中的銀杏酸含量。

2 結果與分析

2.1 銀杏酸標準曲線

如圖1所示，銀杏酸0～8.0 mg·L-1，吸光值與含量線性良好，適于測定銀杏酸含量。

圖1 銀杏酸標準曲線

2.2 浸提劑及超聲時間對超聲波法去除銀杏酸的影響

銀杏酸是一類水楊酸衍生物，溶解性與水楊酸相似，易溶于乙醇、乙醚、氯仿，微溶于水，在沸水中溶解。由圖2可知，以90%乙醇為提取劑時，提取液中銀杏酸的含量最高，其次是水，而以正己烷為提取劑的效果較差。故選擇90%乙醇作為去除白果中銀杏酸的提取劑。

圖2 不同提取劑比對銀杏酸去除的影響

隨著超聲時間延長，提取出的銀杏酸含量先增加，至40 min時達到最大值，之后提取液中的銀杏酸含量下降。故選擇最適的超聲時間為40 min。

2.3 料液比對超聲波法去除銀杏酸的影響

由圖3可知，在試驗條件下，隨著料液比降低(1∶20～1∶60)，提取液中銀杏酸的含量先增加，至1∶50時達到最大，之后略有下降，但是脫除率仍然在增加。

圖3 不同料液比對銀杏酸去除效果的影響

3 小結與討論

經檢測，本研究所使用的白果銀杏酸含量為293.6 mg·kg-1。經過處理后，銀杏酸含量大幅度降低。采用超聲波輔助的方法，在料液比為1∶50時，脫除液中銀杏酸含量達到5.45 mg·L-1，即1 g白果脫除287.5 mg銀杏酸，銀杏酸脫除率達到97.9%，脫毒后的白果粉中銀杏酸含量約為6.1 mg·kg-1；當料液比為1∶60時，脫除液中銀杏酸含量達到4.84 mg·L-1，即1 g白果脫除290.4 mg銀杏酸，銀杏酸脫除率達到98.9%，脫毒后的白果粉中銀杏酸含量約為3.2 mg·kg-1。目前，食用白果中銀杏酸含量并沒有國家標準，在檢索范圍內僅見國際上關于銀杏葉提取物中銀杏酸含量必須低于5 μg·g-1的限量要求，與此對照，本文方法可滿足相關要求。白果食品的脫毒處理在毒理學上是可證明其安全性的，由于原料成本低，且具有較好的食療效果，白果食品發展具有較大潛力，本研究為保證白果食用安全提供了可資借鑒的工藝方法，但將白果開發為“快消食品”的加工工藝等仍有待改進，其消費市場也有待擴展。