高純度依帕司他的制備方法

劉向紅，楊亞軍，李兆林，劉 旭

（寧夏康亞藥業股份有限公司，寧夏銀川 750002）

依帕司他（epalrestat 1），化學名 5-［（1Z，2E）-2-甲基-3-苯基-2-丙烯亞基］-4-氧代-2-硫代-3-噻唑烷乙酸，是一種醛糖還原酶抑制劑，由小野公司在1992年在日本上市，臨床上用于治療糖尿病及其并發癥，如神經病變、末梢神經障礙癥、震動感覺異常、心搏異常、角膜上皮病變、視網膜病變和微血管病變等[1，2]，其結構式（見圖1）。

圖1 依帕司他結構式Fig.1 Structural formula of epalrestat

依帕司他的合成方法已有不少文獻報道，總結文獻方法主要有如下幾種合成方法：方法一[3]，以3-羧甲基羅丹寧和α-甲基肉桂醛作為起始原料，進行縮合反應一步制得依帕司他。方法二[4]，以甘氨酸為起始原料，先與二硫化碳、濃氨水發生縮合反應，制得N-羧甲基二硫代氨基甲酸銨，再和氯乙酸經烴化、環合制得中間體3-羧甲基羅丹寧，最后以冰醋酸為反應溶劑，在無水醋酸鈉催化下與α-甲基肉桂醛進行縮合反應，制得依帕司他。此方法得到3-羧甲基羅丹寧的收率為80%，得到依帕司他的收率為60%，總收率為48%。方法三[5]，該方法采用“一鍋煮”的方法，以甘氨酸為起始原料，先和二硫化碳、濃氨水發生縮合反應，所得N-羧甲基二硫代氨基甲酸銨，不經過分離，反應液先蒸除低沸點物質，然后直接加入氯乙酸經烴化、環合反應制得中間體3-羧甲基羅丹寧，最后以冰醋酸為反應溶劑，在無水醋酸鈉催化下與α-甲基肉桂醛進行縮合反應，制得依帕司他。此方法得到3-羧甲基羅丹寧的收率為85.3%，得到依帕司他的收率為64%，總收率為54.6%。方法四[6]，是以甘氨酸為起始原料，先與二硫化碳、濃氨水發生縮合反應，制得N-羧甲基二硫代氨基甲酸銨，再和氯乙酸鈉經烴化、環合制得重要中間體3-羧甲基羅丹寧，最后以無水乙醇為反應溶劑，在濃氨水催化下與α-甲基肉桂醛進行縮合反應，制得依帕司他。此方法制得3-羧甲基羅丹寧的收率為86.0%，得到依帕司他的收率為85.2%，總收率為73.3%。

圖2 依帕司他的合成路線Fig.2 Synthetic route of epalrestat

在深入研究和細致比較文獻報道的工藝路線的基礎上，沿用以甘氨酸為起始原料，先與二硫化碳、濃氨水發生縮合反應，制得N-羧甲基二硫代氨基甲酸銨，再和氯乙酸鈉經烴化、環合制得重要中間體3-羧甲基羅丹寧，最后以無水乙醇為反應溶劑，在濃氨水催化下與α-甲基肉桂醛進行縮合反應，制得依帕司他粗品，合成路線（見圖2）。

在粗品精制中用甲酸、乙酸及四氫呋喃等溶劑精制得到的產品2Z-異構體含量都在0.5%以上，與日本原研藥不高于0.2%的要求差距較大，不符合化學原料藥達到或者接近國際標準要求[7]。依帕司他對光不穩定，暴露在光甚至它的溶液在室溫下也會發生雙鍵的異構化，很難保證產品質量，為了保證患者的用藥安全，在對依帕司他合成的同時，開發了一種高質量依帕司他的精制方法。通過對精制條件的摸索，最終發現在避光條件下用1，4-二氧六環溶解，過濾，濾液溫度降至50℃～60℃時，加入80%甲醇水溶液，35℃～45℃保溫析晶3.5 h，所得成品的異構體雜質可以控制在0.2%以下，提高了產品質量。此工藝已完成100 L反應釜中試放大，且重現性較好。

1 實驗

1.1 色譜條件

照高效液相色譜法（《中國藥典》2015版四部通則0512）實驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-0.4%醋酸（62:38）為流動相；檢測波長為396 nm，流速為1 mL/min；柱溫為30℃。

1.2 測定方法

嚴格避光操作，取本品約20 mg，精密稱定，置50 mL量瓶中，加甲醇15 mL超聲溶解，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；精密量取1 mL，置100 mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，作為對照溶液；立即取對照溶液20 μL，注入液相色譜儀，調節檢測靈敏度使主成分峰高約為滿量程的20%，再取上述兩種溶液各20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主峰保留時間的2～3倍，在相對保留時間為1.0的物質為依帕司他主峰，在相對保留時間為0.65～0.87的雜質峰為依帕司他立體異構體，供試品溶液如顯立體異構體峰，其峰面積不得大于對照品溶液主峰面積的1.5倍（1.5%）。

1.3 依帕司他精品的制備方法1

避光下于1 000 mL單口瓶中依次加入依帕司他粗品50.0 g，800 mL 98%甲酸溶解，加熱回流30 min后，趁熱過濾，降溫析晶，降溫至55℃保溫析晶4 h抽濾，少量甲酸洗滌，產品避光50℃真空干燥8 h，得依帕司他21.6 g，液相檢測純度92.18%（見圖3），收率43.2%。

1.4 依帕司他精品的制備方法2

避光下于1 000 mL單口瓶中依次加入依帕司他粗品50.0 g，500 mL四氫呋喃溶解，加熱至回流，趁熱過濾，降溫至45℃～50℃保溫析晶4 h抽濾，濾餅少量四氫呋喃洗滌，產品避光50℃真空干燥8 h，得依帕司他36.0 g，液相檢測純度92.18%（見圖4），收率72.0%。

圖3 甲酸精制色譜圖Fig.3 The HPLC spectrum of formic acid refined epalrestat

1.5 依帕司他精品的制備方法3

避光下于1 000 mL單口瓶中依次加入依帕司他粗品98.7 g，1，4-二氧六環200 mL，加熱至完全溶解，過濾，濾液溫度降至50℃～60℃，加入780 mL 80%的甲醇水溶液，攪拌均勻，35℃～45℃保溫析晶3.5 h，抽濾，濾餅用少量無水甲醇（10 mL×3）洗滌，避光50℃真空干燥8 h，得橙黃色細針狀結晶性粉末79.5 g，純度99.73%（見圖5），收率為80.5%。熔點225℃～227℃。

圖4 四氫呋喃精制色譜圖Fig.4 The HPLC spectrum of tetrahydrofuran refined epalrestat

圖5 依帕司他精品液相圖Fig.5 The HPLC spectrum of refined epalrestat

2 結果和討論

在參考文獻基礎上合成了依帕司他粗品，避光下用1，4-二氧六環先將粗品溶解，過濾，濾液溫度降至50℃～60℃，加入80%的甲醇水溶液，35℃～45℃保溫析晶3.5 h，抽濾，所得依帕司他精品純度可達99.7%，異構體雜質可以控制在0.2%以下。本方法操作簡單，周期短，可重現性強，所得產品收率高，對依帕司他的質量控制具有重要參考價值。