山葵墨入病的預(yù)防研究

孫若軒

【摘 要】每當(dāng)芥末作為高級(jí)調(diào)料出現(xiàn)在我們餐桌上時(shí)，我都會(huì)思考，芥末是由什么制作而成呢？它的價(jià)格為什么會(huì)這么高呢？經(jīng)過(guò)查閱資料后了解到，上等芥末的原材料為山葵（直徑2-3cm的山葵根價(jià)格大約在40萬(wàn)/噸），山葵是極為珍貴的調(diào)味食品，在國(guó)際市場(chǎng)上需求量極大，但是產(chǎn)量極少。山葵的生長(zhǎng)條件特殊，對(duì)溫度、濕度和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求都非常嚴(yán)格，適宜生長(zhǎng)種植的地方有限。同時(shí)，在種植區(qū)域較少的客觀情況下，山葵還會(huì)受到墨入病（俗稱黑斑病，黑心病）的侵害，嚴(yán)重制約了其產(chǎn)量，并降低其價(jià)值。在一次和父母到廣元拜訪朋友的情況下我了解到，四川廣元部分山區(qū)就有種植。因此，在發(fā)現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)條件得情況下，通過(guò)設(shè)計(jì)有關(guān)山葵墨入病致病菌葵莖點(diǎn)霉抑菌效果的比對(duì)試驗(yàn)，尋找出一種更有效的抑制山葵墨入病的方法，盡量提升其產(chǎn)量和質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】山葵種植；墨入病；抑菌研究

中圖分類號(hào)： S436.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A 文章編號(hào)： 2095-2457（2018）23-0230-002

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2018.23.104

【Abstract】When mustard appears on our table as a high grade condiment， I wonder， what is it made of？ And why is the price so high？ After consulting the materials， I learned that the raw materials of the best mustard are horseradish（The price of horseradish， 2-3cm in diameter， is about 400，000 per ton）， which is a very precious flavoring food. It is in great demand in the international market， but its yield is very small. The growing conditions of horseradish are special， the demand for temperature， humidity and nutrients is very strict， and the suitable places for growing and planting are limited. At the same time， under the objective situation of fewer planting areas， horseradish will also be affected by some kinds of disease， which seriously restricts its production and reduces its value. When I visited friends in guangyuan with my parents， I learned that there are horseradish planting in some mountainous areas of guangyuan， sichuan province. Therefore， in the case found that the experimental conditions， through the design about the bacteriostatic effect of horseradish virus comparison test， find out a more effective method of inhibition of horseradish virus， try to improve the yield and quality.

【Key words】Studies on horseradish cultivation； Virus in horseradish； Antibacterial research

0 引言

在芥末價(jià)格比較貴而我又喜愛(ài)芥末的情況下，我萌生了研究芥末原材料——山葵的念頭：希望通過(guò)調(diào)研和試驗(yàn)研究，尋找出一種更有效的提升山葵產(chǎn)量和質(zhì)量，預(yù)防山葵病變的方法。在父母朋友為我提供研究條件的情況下，通過(guò)實(shí)地調(diào)研后，我開(kāi)始了我對(duì)山葵墨入病（俗稱黑斑病，黑心病）的研究。

芥末加工的上等原料山葵，經(jīng)濟(jì)價(jià)值極高，無(wú)論在日本還是在中國(guó)，市場(chǎng)需求量都非常大。但根據(jù)調(diào)研和查閱資料發(fā)現(xiàn)，山葵受到墨入病侵害嚴(yán)重，是除了地域因素外制約其生長(zhǎng)的主要因素。這種病害會(huì)引起山葵產(chǎn)量下降，品質(zhì)降低。一般山葵的葉發(fā)病率為25%～70%，枝干發(fā)病率為90%～100%，損失在30%～70%之間，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)B帶毀壞整片種植區(qū)域。因此，山葵墨入病的防治研究對(duì)于提高山葵產(chǎn)量和質(zhì)量具有一定的意義。

根據(jù)資料顯示，山葵墨入病的病原為葵莖點(diǎn)霉，該病菌適宜的生長(zhǎng)溫度為19～25℃；適宜生長(zhǎng)的pH值為6.0～9.0。墨入病在山葵整個(gè)生育期都可發(fā)病，隨著山葵幼苗的生長(zhǎng)，枝干發(fā)病率增加，發(fā)病程度加重。山葵種苗攜帶病菌是墨入病發(fā)病的主要因素，帶菌率可以達(dá)到17%-85%。而病菌在田間除了通過(guò)雨水飛濺和灌溉水傳播外，還可以通過(guò)各種農(nóng)事活動(dòng)、昆蟲(chóng)、種子、苗、土壤進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播。所以，墨入病傳播途徑廣，傳播率高，致病能力強(qiáng)。因此，在挑選好幼苗的前提下，要防止病害的傳播蔓延，挑選抑菌效果好，消毒能力強(qiáng)的藥劑尤其重要。

經(jīng)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，目前常用方法是使用藥劑對(duì)山葵種子和山葵幼苗進(jìn)行浸泡處理。經(jīng)查閱資料，了解到有五種常見(jiàn)易得、適合用于生產(chǎn)的抑菌藥劑，分別是：（1）50%苯菌靈1500倍液；（2）70%托布津1500倍液；（3）45%特克多懸浮劑2000倍液；（4）50%施寶功可濕性粉劑2000倍液；（5）5%霉能靈可濕性粉劑1000倍液。另外，我想創(chuàng)新性地對(duì)五種藥劑進(jìn)行兩兩搭配使用，打破使用單一藥劑的局限。

我將使用上述藥劑對(duì)從病變?nèi)~片中提取，在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的葵莖點(diǎn)霉進(jìn)行抑菌能力實(shí)驗(yàn)。并對(duì)比單一藥劑與復(fù)合使用方式抑菌能力的大小，對(duì)藥劑的抑菌能力進(jìn)行定性定量的評(píng)價(jià)，最終得出最優(yōu)的抑菌藥劑及使用方式。

1 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

我在山葵養(yǎng)殖基地工作人員的幫助下，通過(guò)病變特征挑選病變的山葵，首先摘取同一植物上的病變程度相當(dāng)?shù)娜~片、葉柄、莖干，其次，再分別摘取病變程度不同的葉片、葉柄、莖干。

采集好樣品之后，參考資料，著手制作PDA培養(yǎng)基（全稱馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，是一種最常用的菌落培養(yǎng)物質(zhì)）：馬鈴薯洗凈去皮，稱取200g馬鈴薯切成小塊，加水煮爛（煮沸20～30分鐘，能被玻璃棒戳破即可），用八層紗布過(guò)濾，加熱，再據(jù)實(shí)際實(shí)驗(yàn)需要加瓊脂（15-20g），繼續(xù)加熱攪拌混勻，待瓊脂溶解完后，加入20g葡萄糖，2gKH2PO4，0.5gMgSO4，10mg維生素B1，攪拌均勻，稍冷卻后定容1升，調(diào)PH為7-8，分裝，滅菌20分鐘后取出，乘其未冷卻凝固前倒出，冷卻后用于實(shí)驗(yàn)。

準(zhǔn)備好培養(yǎng)基后，提取葵莖點(diǎn)霉來(lái)進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，提取過(guò)程如下：選取山葵的某一個(gè)病變部位作為樣本，首先用無(wú)菌水沖洗，放入75%乙醇中消毒1min，再用無(wú)菌水沖洗3次左右，然后用滅菌的濾紙吸去多余的水分，剪取病變處的植物組織，用鑷子將植物組織塊放在之前制備好的PDA培養(yǎng)基上，然后放入22-25℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5天左右。之后，再挑取出上述培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落，獲得培養(yǎng)物。

2 實(shí)驗(yàn)過(guò)程

2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)置

（1）對(duì)照組：將不加任何農(nóng)藥的培養(yǎng)基設(shè)置為三組平行的空白對(duì)照組。

（2）單一抑菌劑實(shí)驗(yàn)組：苯菌靈、甲基托布津、霉能靈、百菌清、鏈霉素（設(shè)置三組平行對(duì)照）

（3）混合抑菌劑實(shí)驗(yàn)組：苯菌靈+托布津、苯菌靈+特克多懸浮劑、苯菌靈+施寶功可濕性粉劑、苯菌靈+霉能靈可濕性粉劑、托布津+特克多懸浮劑、托布津+施寶功可濕性粉劑、托布津+霉能靈可濕性粉劑、特克多懸浮劑+施寶功可濕性粉劑、特克多懸浮劑+霉能靈可濕性粉劑、施寶功可濕性粉劑+霉能靈可濕性粉劑（設(shè)置三組平行對(duì)照）

2.2 實(shí)驗(yàn)方法

按照單獨(dú)抑菌劑實(shí)驗(yàn)組和混合抑菌劑實(shí)驗(yàn)組的計(jì)劃配置好抑菌藥劑，同時(shí)再按照培養(yǎng)基的制作方法和對(duì)比實(shí)驗(yàn)的組數(shù)制作16*3=48個(gè)培養(yǎng)基。分別在培養(yǎng)基中單獨(dú)加入配置好的相應(yīng)實(shí)驗(yàn)組的抑菌藥劑。再加定量入事先已培養(yǎng)好的，生長(zhǎng)一致的山葵墨入菌菌落，放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5天。首先通過(guò)肉眼觀察菌落形態(tài)，再利用下列公式計(jì)算抑菌率：

抑菌率=（對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑）/對(duì)照菌落直徑*100%

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

（1）單一抑菌劑效果：

苯菌靈>甲基托布津>百菌清>霉能靈>鏈霉素

（2）混合抑菌劑效果：

①&②、①&③、①&④、①&⑤>②&③>②&⑤>④&⑤>②&④>③&④）>③&⑤

其中：①：苯菌靈②：甲基托布津③：霉能靈④：百菌清⑤：鏈霉素

4 小結(jié)

通過(guò)對(duì)比實(shí)驗(yàn)結(jié)果我發(fā)現(xiàn)，復(fù)合藥劑使用后的抑菌效果沒(méi)有單一藥劑的抑菌效果明顯，說(shuō)明當(dāng)兩種或兩種以上藥物合并使用后，反而會(huì)使各自的抑菌作用減弱或消失，不推薦使用。在單一藥劑中，苯菌靈的滅菌效果最好，如果山葵在生產(chǎn)過(guò)程中出現(xiàn)大規(guī)模植株患病的情況，更建議噴灑苯菌靈。