兩株新的金黃色葡萄球菌烈性噬菌體的生物學(xué)特性和基因組學(xué)研究

靳曉東，張聰慧，鐘江

復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物學(xué)與微生物工程系, 上海 200438

奶牛乳腺炎是奶牛中常見的乳腺炎癥反應(yīng)，嚴(yán)重影響牛奶的質(zhì)量和產(chǎn)量。其主要致病菌是金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、無乳鏈球菌(Streptococcusagalactiae)等[1]。金黃色葡萄球菌是隱性奶牛乳腺炎的主要致病菌[2]。目前，抗生素是治療奶牛乳腺炎的主要手段[3]，但抗生素長(zhǎng)期使用往往引起細(xì)菌耐藥性，導(dǎo)致治療效果不佳[4]，且牛奶因抗生素殘留而被廢棄，嚴(yán)重影響牛奶產(chǎn)業(yè)[5]。

噬菌體用于抗菌治療具有特異性強(qiáng)、成本低等優(yōu)點(diǎn)，且不會(huì)產(chǎn)生耐藥性等不良反應(yīng)，逐漸引起國(guó)內(nèi)外研究者的重視[6]。已有一些研究成功利用金黃色葡萄球菌噬菌體進(jìn)行了奶牛乳腺炎治療[7-8]，為奶牛乳腺炎的噬菌體療法提供了理論基礎(chǔ)。

噬菌體具有宿主特異性，獲得更多種類的噬菌體，建立噬菌體庫(kù)，對(duì)更好地應(yīng)用噬菌體療法具有重要意義。本研究從奶牛場(chǎng)廢水中分離到兩株金黃色葡萄球菌烈性噬菌體，對(duì)其生物學(xué)和基因組學(xué)特征進(jìn)行了分析。

1 材料與方法

1.1 材料

金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)株ATCC 25923、1株牛源金黃色葡萄球菌cowSA_1、1株人源金黃色葡萄球菌humanSA_1及1株人源表皮葡萄球菌(S.epidermidis)humanSE_1為本實(shí)驗(yàn)室保藏。細(xì)菌培養(yǎng)采用高鹽LB培養(yǎng)基(酵母提取物5 g/L、蛋白胨10 g/L、氯化鈉70 g/L，pH 7.0，分別添加 0.7% 瓊脂糖和 1.8% 瓊脂獲得半固體和固體高鹽LB培養(yǎng)基)。

1.2 方法

1.2.1噬菌體的分離和純化取自上海市寶山區(qū)某奶牛場(chǎng)，樣品為患病奶牛乳房清洗液，4 ℃ 2 000g離心10 min后取上清液，以ATCC 25923作為指示菌，用雙層瓊脂平板法檢測(cè)是否含有裂解性噬菌體。……