呋喃唑酮代謝物在食品檢測中的研究新進展

徐 駿 ，劉 坤 ，李 丹 ，陳 晨 ，任崢峰 ，張 文

（1.吉林省安信食品技術服務有限責任公司；2.吉林省食品所，吉林長春130118）

由于呋喃唑酮便宜、耐性好、抗菌效果好,所以現階段亂用現象比較明顯。為了減少這種亂象的發生,對食品進行呋喃唑酮檢測是很有必要的。呋喃唑酮本身對人體沒有毒害,而其代謝產物通過毒理學研究表明對人體有毒害作用,這類物質具有致癌、致突變作用。因此，研究呋喃唑酮的檢測新進展是很有意義的[1]。

1 食品檢測中呋喃唑酮代謝物的研究新進展

據報道，現在研究食品中呋喃唑酮代謝物的檢測，比較常用的方法有酶聯免疫法、熒光免疫快速檢測試劑卡法、膠體金免疫層析法、化學發光檢測試劑盒法、酶標抗原直接競爭 ELISA方法、單克隆抗體和膠體金免疫層析試紙條法等。

隨著研究的不斷深入，對食品檢測中的呋喃唑酮代謝物的檢測方法也在不斷地發展進步，李春生和他的團隊建立了一種快速檢測呋喃唑酮代謝物殘留的方法。試驗用呋喃唑酮代謝物的衍生物與牛血清白蛋白的偶聯物免疫小鼠，利用單克隆抗體技術制備雜交瘤細胞，用間接和間接競爭ELISA法對陽性克隆進行篩選。單克隆細胞株誘生腹水后，經純化即為單克隆抗體，用于膠體金標記，制備呋喃唑酮代謝物膠體金免疫層析試紙條。融合后得到2株穩定分泌抗體的雜交瘤細胞株，其中，4G3純化后的抗體效價達到1:100萬，對CPAOZ的 50%抑制質量濃度為 1.7μg/L，親和常數 Ka=1.6×109L/mol。該抗體制備的膠體金試紙條的檢測限為4μg/L，與其他 3種硝基呋喃代謝物的衍生物 CPAHD、CPSEM和CPAMOZ均不存在交叉反應，對樣品的檢測與高效液相色譜結果一致。他們研制出了抗呋喃唑酮代謝物特異性單克隆抗體，并研制了以單抗為基礎的膠體金免疫層析試紙條，能夠實現呋喃唑酮代謝物殘留的快速、靈敏的檢測[2]。

史曉亞等研究了呋喃唑酮代謝物間接競爭酶聯免疫的檢測方法。他們利用活化酯法將卵清蛋白和半抗原連接成為包被原，對包被原和單克隆抗體的稀釋倍數，封閉液濃度、競爭時間、酶標二抗孵育時間和顯色反應時間進行優化，得到了較好的指標，并進行了方法學評價，得到的結果較好。結果表明，最佳條件為包被原和單克隆抗體稀釋倍數分別為800倍和6400倍，封閉液是 1%脫脂乳，競爭時間是60 min，辣根過氧化物酶標記羊抗鼠二抗孵育時間是45min，顯色時間是 15min。這種方法特異性強，準確性、精密度和重現性均良好，可用于動物源性食品中呋喃唑酮代謝物的快速篩查[3]。

趙義良等研究出了免疫熒光檢測的技術,他們研發了一種快速檢測呋喃唑酮代謝物的試劑卡。具體的研究內容如下：他們利用EDC介導偶聯抗體,因為銪熒光微球具有下列優點：持續穩定性好，不易受干擾，強度大，把它作為熒光標記物。通過優化銪熒光微球與單抗之間的用量，改善試劑卡的顯色梯度，把試劑卡的靈敏度提高。通過研究他們得到了如下結論：這種試劑卡對呋喃唑酮代謝物的檢出限低，存儲時間長；檢測結果安全可靠。所以，呋喃唑酮代謝物試劑卡可以用來作為食品中呋喃唑酮代謝物的檢測，為食品安全提供保障[4]。

2 展望

近年來，我們研究了很多在食品檢測中的呋喃唑酮代謝物的殘留測定，但開發的這些方法都有各自的優缺點。所以，今后研究時要開發出更為合適的檢測方法，多研究其機理，探討更為簡便可行的檢測方法和前處技術，為食品安全研究提供有效的幫助。