腎移植患者他克莫司血藥谷濃度與肝腎功能及血常規指標的關系

孫藝哲 張平安

(武漢大學人民醫院檢驗科，湖北 武漢 430060)

腎移植對終末期腎衰竭病人是較有效且生存率較高的治療方法[1]，腎移植的年增長率穩步上升。雖然腎移植存在移植排斥反應的風險，但是新型免疫抑制劑的應用提高了移植器官的存活率[2]，其中鈣調磷酸酶抑制劑類的藥物如他克莫司(FK506)在臨床的應用最多，服用該藥物的患者具有死亡率較低、移植器官成功率較高、移植存活率較高等特點，是目前臨床上應用廣泛的免疫抑制劑[3]。研究表明FK506與其他鈣調磷酸酶抑制劑相比，其免疫抑制作用是其他藥物的數十倍以上[4]，且對已經發生的排斥反應也可以較好的抑制，用于治療慢性排斥反應時伴隨的細菌以及病毒感染也較其他藥物少[5]。雖然FK506在預防急性排斥反應上非常有效，但是其藥物反應變化大，治療窗口也比較窄[6]。目前沒有不同情況下個性化用藥的相關細則，因此為了在臨床上更好的應用此藥物，需要經常監測其血藥濃度水平，及時調整藥物劑量，及時監測患者身體機能的各項指標情況。此前，本院曾在2013年做了類似研究[7]，但當時的研究對象僅50例，相關指標也不齊全，本次研究收集了腎移植患者標本446例，監測治療過程中的FK506血藥濃度，同時檢測其肝功能、腎功能和血常規相關指標，并分析FK506血藥濃度對患者肝功能、腎功能和血常規相關指標之影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年5月至2017年6月在本院進行腎移植的患者466例為研究對象，動態監測其FK506血藥濃度共計5688次，其中男女比例為2.5∶1，年齡為14 ～70歲，收集其術后FK506的血藥濃度監測情況，以及生化和血常規指標。

1.2儀器與試劑 FK506(批號：8R019UL)血藥濃度由全自動免疫發光分析儀(儀器VIVO和試劑均由SIEMENS公司提供)測定，血生化指標ALT(批號：382995)、AST(批號：379527)、TP(批號：387540)、ALB(批號：380556)、TBIL(批號：385683)、ALP(批號：384067)、GGT(批號：393979)、TBA(批號：17-0308)、PA(批號：1738689)、CHE(批號：376906)、C1q(批號：20170110)、GLU(批號：374718)、UREA(批號：388175)、Cr(批號：49091)、UA(批號：376948)、LAP(批號：D1L654/DG493)由全自動生化分析儀檢測(檢測儀器為SIEMENS ADVIA 2400全自動生化儀，SIEMENS公司提供試劑)，血常規指標WBC、RBC、Hb、PLT、NEU%%、LYM%、MONO%由HST五分類血球流水線檢測(儀器SYSMEX HST302，試劑由SYSMEX公司提供)。血樣采集：在服藥前于清晨空腹采集靜脈血2 mL置于EDTA抗凝真空采血管用于血常規檢測和FK506檢測，另外再采集3 mL置于肝素抗凝真空采血管用于生化指標檢測。

1.3方法 分組：將FK506按不同濃度分為6組(Ⅰ組≤ 5 μg/L，5 μg/L<Ⅱ組≤7 μg/L，7 μg/L<Ⅲ組≤9 μg/L，9 μg/L<Ⅳ組≤12 μg/L ，12 μg/L<Ⅴ組≤15 μg/L，Ⅵ組>15 μg/L)。實驗方法：FK506采取均相放大酶免疫法，首先準備含50 μL前處理液和200 μL甲醇的EP管，然后精準吸取200 μL待測樣本的全血，加入到之前準備好的EP管中，振蕩30 s，14 000 r/min離心6 min，取上清液上機檢測。生化指標檢測：生化指標包括ALT、AST、TP、ALB、TBIL、ALP、GGT、TBA、PA、C1q、CHE、GLU、UREA、Cr、UA、LAP，均在全自動生化分析儀(SIEMENS ADVIA 2400)上完成檢測。血常規檢測：血常規檢測項目包括WBC、RBC、PLT、Hb、NEU%、LYM%、MONO%，均在HST血球流水線上完成檢測。

2 結 果

2.1不同FK506血藥濃度的腎移植患者生化指標的比較 不同FK506濃度的腎移植患者ALT、AST、TP、ALB、TBIL、GGT、PA、GLU、UREA和Cr的差異均有統計學意義(P<0.05)，而ALP、TBA、C1q、CHE、UA和LAP等指標的差異無統計學意義(P>0.05)。其中ALT隨FK506血藥濃度增加而升高，TP則呈現中間高兩頭低的趨勢；FK506濃度Ⅰ組、Ⅴ組、Ⅵ組的GLU、UREA和Cr均值均明顯超出參考范圍的上限；Ⅵ組的PA均值也接近參考范圍的下限。見表1。

表1 不同FK506血藥濃度的腎移植患者的生化指標的比較

2.2不同FK506血藥濃度的腎移植患者血常規指標的比較 WBC、RBC、Hb、NEU%、LYM%和MONO%的差異均有統計學意義(P<0.05)，而PLT的差異無統計學意義(P>0.05)。其中WBC隨FK506血藥濃度增加而升高，RBC則呈現中間高兩頭低的趨勢。Ⅰ組、Ⅴ組、Ⅵ組的NEU%均值均明顯超出參考范圍的上限，而且Ⅵ組的WBC均值也超出參考范圍的上限，而Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組血藥濃度范圍內NEU%均值正常。見表2。

表2 不同FK506血藥濃度的腎移植患者血常規指標的比較

3 討 論

不同病人腎移植術后不同時間FK506的血藥濃度也不同，但臨床上[8]一般會將FK506血藥濃度控制在正常范圍5～5 μg/L內，若FK506血藥濃度>15 μg/L，腎毒性等不良反應風險可能會增加，若FK506血藥濃度<5 μg/L，則可能導致移植腎排斥反應的風險增加。FK506在人體的代謝過程中主要是通過肝臟代謝，它有較強的親肝性，在肝移植過程中用小劑量即可產生免疫抑制作用，遠遠低于對肝臟造成損傷的劑量[9]，本次研究也發現，雖然一些肝功能指標隨著FK506血藥濃度的升高發生顯著變化，ALT、AST、TP、ALB、TBIL、GGT、PA均有顯著性差異(P<0.05)，但大多都在正常范圍內，由此可見FK506對肝臟的損傷較小，因此FK506已經成為肝臟移植的一線用藥[10]，但是在Ⅵ組(>15 μg/L)時，PA接近正常范圍的下限，說明在FK506藥物濃度>15 μg/L時，PA接近異常，可能會對肝臟產生損害。

通過常規檢查轉氨酶、白蛋白來判斷肝臟功能存在局限性，因為這些指標半衰期長，PA由肝細胞合成，半衰期約12 h，是一種負急性時相蛋白。在急性感染過程中，PA會急速下降，因此在反映早期肝損害時其敏感性更高[11]。此外，PA也是藥物中毒導致肝臟損傷時最早發生變化的指標，在藥物用量過大導致藥物中毒時，24 h內PA即發生顯著下降[12]。本研究中發現當 FK506血藥濃度在> 15 μg/L時，患者的PA值發生明顯下降，存在顯著性差異(P<0.05)。因此在服用FK506過程中，PA是一個較好的肝功能監測指標。另外，腎功能指標血UREA、血Cr存在顯著性差異(P<0.05)，在FK506血藥濃度在< 5 μg/L時，血UREA、血Cr均明顯升高超出參考范圍兩倍以上。這可能是由于FK506血藥濃度過低導致的排異反應；在血藥濃度> 12 μg/L時，血UREA、血Cr均明顯升高超出參考范圍兩倍以上，則可能是藥物濃度過高導致的腎臟毒性作用。FK506這種鈣調神經磷酸酶抑制劑存在明顯的腎毒性[13]，UREA和血Cr這些指標在腎臟功能嚴重受損時才會發生變化，因此有人建議使用尿微量蛋白等指標可以早期發現腎臟損害[14]。此外，從表1可以發現Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ組的GLU均值均明顯超出參考范圍的上限，而Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組血藥濃度范圍5 ～12 μg/L內GLU均值正常。因此可以推測當將血藥濃度控制在5～12 μg/L時，可能較好的控制血糖水平，否則會導致血糖異常。有相關研究[15]認為是FK506是通過抑制機體內PPAR-γ因子的表達，從而影響脂肪組織脂肪因子的表達，最終影響了胰島素信號通路的轉導。

不同FK506血藥濃度組間血常規指標存在差異。隨著血藥濃度的升高，WBC、NEU%隨之升高，超出參考范圍上限，說明在FK506血藥濃度>12 μg/L時，身體可能發生炎性反應。當FK506血藥濃度在>12 μg/L范圍之外時，RBC和Hb明顯下降，我們分析認為，可能由于FK506牢固結合在紅細胞上，當體內FK506血藥濃度過高時，機體為了清除多余的FK506，同時將紅細胞也清除出去，導致RBC和Hb降低。此前國內有學者[16]認為患者Hb值與FK506血藥濃度成正相關，結果與本研究之不一致，可能由于此前研究樣本量過少導致結論的不準確。以往的研究[11]一直將FK506血藥濃度控制在5～15 μg/L范圍內，但本次研究發現在12～15 μg/L這個范圍內，GLU、NEU%、UREA、Cr這幾個指標均值也超出參考范圍上限，因此是否將FK506血藥濃度控制在5～12 μg/L范圍內更為安全。這還需要更細致的研究去驗證。

綜上所述，雖然FK506目前廣泛應用于移植，但對于個性化用藥仍缺乏明確方案，由于FK506對人體的影響很復雜，這需要臨床醫生針對各項指標和臨床表現予以細致分析，制定出更加合理和個性化的方案。