HPV E6/E7 mRNA檢測在年輕女性宮頸癌篩查及宮頸疾病診治中的應用價值

李滿元 劉文 王寶 趙勁松 王佳美

(錦州市婦嬰醫(yī)院， 遼寧錦州 121000)

臨床研究[1]發(fā)現(xiàn)，人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌的重要致病因素之一，宮頸癌患者中絕大多數(shù)人合并HPV感染，多數(shù)宮頸癌患者早期確診后經過治療可以治愈，治愈率高達85%以上。年輕女性中HPV感染率較高，大部分為一過性無癥狀感染，致癌率低，但持續(xù)HPV感染的女性患者，其宮頸癌發(fā)病率較高，通過對年輕女性實施HPV E6/E7 mRNA檢測可以作為區(qū)分患者HPV感染是否存在持續(xù)性的重要手段，臨床應用日益廣泛[2]。本實驗評估了HPV E6/E7 mRNA檢測用于年輕女性宮頸癌篩查及宮頸疾病診治中的應用價值，現(xiàn)將實驗結果分析如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取我院2017年6月至2018年5月收治的實施TCT檢查陽性的260例女性患者。應用數(shù)字表法將患者分為觀察組與對照組，各130例。對照組患者實施HPV DNA檢測，觀察組患者實施HPV E6/E7 mRNA檢測。觀察組患者年齡20～30歲，平均(24.16±3.48)歲。對照組患者年齡20～30歲，平均(25.19±3.59)歲。納入標準：入組患者年齡介于20～30歲，入組實驗前接受TCT篩查，結果呈陽性。排除標準：排除年齡>30歲，過往宮頸手術史者，妊娠期或哺乳期女性，入組前3～7 d有性生活者，陰道接受藥物治療或理療者，其他可能影響實驗結果的病例。所有患者入組前知曉實驗內容，簽署知情同意書，實驗方法符合院倫理委員會相關標準。兩組患者年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2檢測方法

1.2.1TCT檢測 所有患者入組前，3～7 d禁止性生活，禁止使用藥物沖洗陰道或服用影響TCT檢測的藥物。由專職醫(yī)護應用TCT采集毛刷，收集患者脫落細胞放入專用采樣瓶中備檢。對患者檢測結果應用陰道細胞學的分類及報告細則(TBS)分級：細胞呈炎癥反應性改變(NILM)、非典型鱗狀上皮細胞(ASC)、上皮內高度病變(ASC-H)、低度鱗狀上皮內病變(LSIL)、高度鱗狀上皮內病變(HSIL)。

1.2.2HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA檢測[3]所有患者入院治療后，同期行HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA檢測。患者選擇膀胱截石位，完全顯露宮頸后，用無菌棉簽清潔宮頸表面分泌物后，使用無菌宮頸采集刷頭沿著宮頸表面，順時針旋轉2～4周采集樣本，將專用采集刷頭浸入儀器對應的測試細胞保存液中后完全漂洗，確保采集刷頭上樣本全部進入細胞保存液，密封后，貼標簽送病理科檢測，對樣本處理、探針雜交、信號放大、讀板測定等試驗后，以檢測值≥1診斷為陽性。

1.2.3病理檢測[3]對HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA檢測陽性患者行陰道鏡活檢+病理檢測。病理分級：宮頸炎癥、宮頸上皮內瘤變(CIN)Ⅰ級、CINⅡ級、CINⅢ級、宮頸癌。

1.3觀察指標 統(tǒng)計兩組患者的TBS分級結果、HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA檢測結果陽性率及上述兩種檢測結果與病理檢測結果的相關性。

1.4統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0軟件對所有數(shù)據實施預處理。計數(shù)資料應用χ2檢驗，以P<0.05為差異統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1兩組患者TBS分級情況比較 兩組患者應用TCT檢測后TBS分級情況接近，組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組患者TBS分級情況比較[(n)%，n=130]

2.2兩組患者檢測結果比較 觀察組患者檢測陽性病例42例，占比為32.31%；對照組患者檢測陽性病例53例，占比為40.77%；兩組患者的陽性檢出率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.3兩組患者中檢測陽性患者的病理檢測結果比較 觀察組患者CINⅡ級以下檢出率低于對照組患者(P<0.05)；兩組患者病理分級為CINⅡ以上檢出率差異不大，無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 兩組患者中檢測陽性患者的病理檢測結果比較[(n)%，n=130]

3 討 論

HPV病毒持續(xù)感染是女性宮頸癌發(fā)病的高危風險因素之一，隨著女性患者對宮頸癌的認識及早期篩查意愿的不斷增強，定期檢測HPV的感染情況對于防控宮頸癌的發(fā)展具有較高臨床應用價值[4]。宮頸癌發(fā)病近年來出現(xiàn)低齡化的走勢，對于30歲以下有過性生活的中青年女性，其宮頸癌發(fā)病率呈逐年增高趨勢，故對于此類人群的宮頸癌早期檢測成為目前學術界研究的重點[5]。

臨床研究[6]發(fā)現(xiàn)，TCT檢查聯(lián)合HPV DNA檢測技術對于宮頸癌早期篩查具一定預測價值，少數(shù)年輕女性發(fā)生HPV感染后，經過一段時間感染被自我修復，此類患者應用HPV DNA檢測時會被定義為陽性，導致該檢測技術對于年輕女性的宮頸癌篩查假陽性率增高。HPV E6/E7 mRNA檢測可以輕松避免年輕女性過往HPV感染出現(xiàn)的篩查假陽性現(xiàn)象，提高病理診斷符合率[7]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，HPV病毒中E6/E7 基因是宮頸癌的主要致病基因[8]，E6通過抑制宿主p53基因表達阻斷細胞凋亡過程，影響相關細胞的抗癌作用；E7可抑制pRB基因表達影響細胞周期，促進炎癥細胞大量增殖惡變，進而發(fā)展為癌癥[9]。HPV E6/E7 mRNA的水平可以預測HPV病毒活性及癌變風險，通過評估患者體內HPV E6/E7 mRNA水平的高低，對于宮頸癌的早期篩查具有較高臨床價值[10]。

我院通過對TCT檢查陽性患者實施HPV E6/E7 mRNA檢測，兩組患者應用TCT檢測后TBS分級情況接近，實驗分組患者臨床資料無差別，符合實驗要求；觀察組患者陽性檢出率為32.31%低于對照組患者的陽性檢出率40.77%；兩組患者CINⅡ級以下檢出率存在顯著差異，病理分級為CINⅡ以上檢出率差異不大，上述結果表明對照組患者采用的HPV DNA檢測技術對于既往出現(xiàn)過HPV感染，而現(xiàn)在自愈的患者存在假陽性診斷，而HPV E6/E7 mRNA檢測可有效排除上述既往出現(xiàn)過HPV感染目前無癥狀的患者，大幅提高診斷準確度，降低假陽性率，提高病理診斷符合率。

綜上所述，臨床對TCT檢查陽性的年輕女性實施HPV E6/E7 mRNA檢測，可提高宮頸癌的篩查準確度，有助于區(qū)分不同類型的宮頸疾病的臨床診治，值得廣泛推廣與應用。由于本次實驗病例樣本數(shù)量較少，所得結論存在一定局限性，日后會加入更大量病例樣本做持續(xù)性研究。