大花杓蘭根際與非根際土壤真菌多樣性的高通量測序分析

付亞娟，張江麗，侯曉強(qiáng)

(1.廊坊師范學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院，河北廊坊 065000；2.河北省高校食藥用菌應(yīng)用技術(shù)研發(fā)中心，河北廊坊 065000)

大花杓蘭(CypripediummacranthumSw.)為蘭科杓蘭屬，是兼具觀賞價值和藥用價值的多年生草本植物[1]。近年來，商業(yè)性過度采挖及生存環(huán)境的破壞，大花杓蘭野生種群快速縮小，已被列為國家Ⅰ級瀕危保護(hù)植物。大花杓蘭也是典型菌根真菌植物，其種子萌發(fā)、植株生長發(fā)育都與菌根真菌密切相關(guān)[2]，但關(guān)于大花杓蘭菌根真菌的研究報道較少。張毓等[3]從野生大花杓蘭須根中分離到1株瘤菌根屬(Epulorhiza)真菌，并證實(shí)該真菌對大花杓蘭種子萌發(fā)有促進(jìn)作用。Shimura等[4]對從大花杓蘭成株、幼苗及原球莖分離的瘤菌根真菌進(jìn)行促萌發(fā)試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)來自成株的菌根真菌較幼苗及原球莖，具有更高的促萌發(fā)率。張亞平[5]研究發(fā)現(xiàn)，雞油菌目(Cantharellales)真菌能顯著地促進(jìn)大花杓蘭原球莖的生長和發(fā)育。目前，由于大花杓蘭菌根真菌在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)條件下不易分離培養(yǎng)、加上大花杓蘭組培技術(shù)瓶頸尚未完全突破，很大程度上制約了大花杓蘭的保育進(jìn)程。

根際土壤真菌是土壤-植物生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分，真菌群落的組成及豐度與植物生長發(fā)育、土傳病害的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[6]。因而植物根際土壤真菌群落多樣性及生態(tài)功能已成為微生物分子生態(tài)學(xué)研究的熱點(diǎn)。相對于傳統(tǒng)培養(yǎng)方法，克隆文庫技術(shù)可以避免非培養(yǎng)微生物所帶來的誤差，但仍有一定的局限性，它僅能反映出樣品中少數(shù)優(yōu)勢菌群信息。……