羅勒多糖含量測定及其藥理活性研究進展

丁銳，劉超祥 (亳州職業(yè)技術學院藥學院,安徽 亳州 236800)

范蘭蘭 (安徽中醫(yī)藥大學藥學院，安徽 合肥 230000)

陳娜 (亳州職業(yè)技術學院藥學院,安徽 亳州 236800)

羅勒(Ocimumbasilicum)為唇形科(Lamiaceae)羅勒屬一年生草本植物，主要分布中國南部省份及西部新疆等省份；國外主要分布于東南亞、南美洲及非洲部分地區(qū)。羅勒全草和種子藥用價值較高，其性溫味辛，有疏風行氣、化濕消食、活血、解毒等功能；可用于感冒、咳嗽、中暑、月經(jīng)不調、跌打損傷等疾病的治療[1]。藥理研究證實，羅勒提取物有抗菌、抗炎鎮(zhèn)痛、抑制腫瘤轉移、降血糖和降血脂等活性作用[2,3]。筆者對羅勒多糖提取工藝、含量測定方法及其生物活性研究進展進行了綜述。

1 羅勒多糖的提取及含量測定

孫林芳等[4]用苯酚-硫酸法測得羅勒多糖含量為8.04%，蒽酮-硫酸法測得羅勒多糖含量為7.99%。羅軒等[5]測定丁香羅勒多糖含量為9.1%，是抗前列腺癌的主要成分之一。楊建等[6]用超聲提取進行研究，考察羅勒多糖含量，發(fā)現(xiàn)乙醇濃度對提取效果影響顯著。楊京霞等[7]探討羅勒多糖的最佳提取工藝，發(fā)現(xiàn)其含量為26.87%。于華靜等[8]對羅勒多糖進行分離純化，發(fā)現(xiàn)水提醇沉法提取效率高，離子交換柱對羅勒多糖分離效果較好。呂雯等[9]測定羅勒多糖的相對分子量分布在80000～100000之間。

2 羅勒多糖的藥理學活性

2.1 抑菌作用

羅勒精油含有多種活性成分，其中甲基丁香酚、茴香腦類等成分有較強的抑菌活性，對金黃色葡萄球菌屬、腸球菌屬和假單胞菌均有較好抑制效果，并能通過抑制大腸埃希菌治療出血性腸炎及溶血性尿毒綜合征[10～13]。

張穎穎等[14]發(fā)現(xiàn)羅勒多糖對金黃色葡萄球菌、枯草芽胞桿菌、普通變形桿菌、大腸埃希菌、糞腸球菌及肺炎克雷伯菌等都有較好的抑制效果，對銅綠假單胞菌的抑制效果較差。方茹等[15]研究羅勒粗多糖溶液對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌的生長均有抑制作用，但濃度低于18mg/mL時對大腸桿菌沒有抑菌作用，低于20mg/mL時對金黃色葡萄球菌沒有抑菌作用。

2.2 抗淋巴管腫瘤作用

羅勒多糖抑制淋巴管新生，抗腫瘤轉移的分子機制可能是通過降低HLECs體外成管能力并顯著下調VEGFR-3的表達[16]。連松剛等[17]探討羅勒多糖對培養(yǎng)體系中HLECs體外成管能力及相應信號通路的影響，分析在羅勒多糖干預下VEGF-C/D及VEGFR-2/3mRNA及蛋白的表達水平，初步揭示了羅勒多糖對該信號通路的作用；通過檢測凋亡調節(jié)基因Bax和Bcl-2的表達水平，研究了羅勒多糖對HLECs活性的干預機制。

2.3 抗肝癌作用

郭小顏等[18]發(fā)現(xiàn)羅勒多糖對H22肝癌淋巴道轉移模型小鼠原位腫瘤有抑制作用，其減少瘤周淋巴管數(shù)的抗轉移的分子機制可能是通過調控VEGF-C/VEGFR-3信號通路來實現(xiàn)的。馮兵等[19]通過發(fā)現(xiàn)羅勒多糖對缺氧條件下不同轉移潛能肝癌細胞MHCC97H和MHCC97L組蛋白H3K9me2甲基化水平均有調節(jié)作用，其中對高轉移潛能肝癌細胞MHCC97H組蛋白H3K9me2甲基化的調節(jié)與組蛋白甲基轉移酶G9a和去甲基化酶JMJD1A有關，而對低轉移潛能肝癌細胞MHCC97L組蛋白H3K9me2甲基化的調節(jié)可能是通過其他通路發(fā)揮作用。

朱慶均等[20]發(fā)現(xiàn)羅勒多糖能明顯延長肝癌H22淋巴道轉移模型小鼠的生存期，并可改善受試動物的生存質量。羅勒膠囊對大鼠移植性肝癌具有明顯改善TACE術后缺氧的作用，并通過降低術后腫瘤乏氧微環(huán)境中HIF-1α和VEGF及血清sICAM-1的表達，起到對TACE術后肝癌侵襲轉移的抑制作用。

2.4 抗肺癌作用

羅勒多糖具有明顯的抑制黑色素瘤B16-F10人工肺自發(fā)性轉移行為的作用，羅勒多糖通過多個藥效靶點綜合作用，能使具有細胞通訊功能缺陷的PG細胞產(chǎn)生一定程度的恢復作用[22]。曲迅等[23]研究發(fā)現(xiàn)羅勒多糖處理組細胞的侵襲與轉移能力明顯低于對照組，細胞通訊功能有一定程度的恢復,熒光染料傳遞毗鄰3-4列細胞，細胞內促進腫瘤細胞轉移的基因c-myc、Tiam-1表達程度低于對照組,而抑制腫瘤細胞轉移的基因nm23表達程度高于對照組；它是一種通過多個藥效靶點綜合作用的具有抗人高轉移肺癌細胞侵襲以及轉移作用的新藥。

羅勒多糖與紫杉醇藥物合用可提高線粒體膜通透性,使胞漿內鈣離子濃度明顯升高，同時線粒體膜電位下降,通過影響細胞周期促進細胞凋亡,增強化療效果[24]。羅勒多糖能增強紫杉醇對人肺腺癌A549細胞株增殖的抑制作用,增強化療效果,這種增效作用使胞漿內鈣離子濃度升高、線粒體膜電位下降、影響細胞周期，從而導致細胞凋亡增加[25]。石煥等[26]發(fā)現(xiàn)羅勒多糖可通過下調MT1-MMP的表達抑制MDA-MB-231細胞的侵襲。

2.5 抗卵巢癌作用

羅勒多糖通過上調VEGFR2在SKOV3細胞的表達介導，從而抑制卵巢癌細胞SKOV3細胞的侵襲能力[27]。羅勒多糖抗卵巢癌轉移的作用機理與降低骨橋蛋白表達、抑制基質金屬蛋白酶-2的分泌、降低卵巢癌細胞侵襲運動能力等因素有關[28]。

張丹等[29]觀察分析羅勒多糖對卵巢癌SKOV3細胞腫瘤轉移相關基因SEMA4C表達的影響，發(fā)現(xiàn)其下調腫瘤轉移相關基因SEMA4C的表達，機制可能是抗卵巢癌淋巴道轉移。王婷等[30]發(fā)現(xiàn)羅勒多糖能夠促進人卵巢癌細胞株SKOV3的凋亡，抑制SKOV3細胞增殖，常氧環(huán)境下羅勒多糖作用相反。張妲等[31]通過觀察分析羅勒多糖對人卵巢癌SKOV3細胞骨架及SEMA4C表達的影響，發(fā)現(xiàn)可以改變卵巢癌SKOV3細胞微絲和微管系統(tǒng)，也可抑制卵巢癌細胞中SEMA4CmRNA和蛋白的表達，且隨著藥物濃度的增大，抑制作用越明顯。

呂靜等[32]研究羅勒多糖及姜黃素對卵巢癌細胞系SKOV3遷移活性的影響和機制，發(fā)現(xiàn)羅勒多糖雖可通過影響OPN及MMP9通路抑制SKOV3細胞的遷移，但其與姜黃素可能利用不同的OPN配體。羅勒多糖與姜黃素對人外周血來源DCs遷移活性的影響存在差異，體外實驗證實羅勒多糖在抑制腫瘤細胞遷移活性的同時，不影響DCs的遷移活性，羅勒多糖可能成為有效的抗腫瘤轉移制劑的候選藥物。

2.6 抗乳腺癌作用

郭文菁等[33]探討羅勒多糖對人乳腺癌細胞株對金屬蛋白酶組織抑制劑表達的影響及對TIMPs的作用，發(fā)現(xiàn)羅勒多糖在不同含氧環(huán)境對MDA-231細胞及TIMPs基因表達的影響效應存在差異，提示設計抗腫瘤藥物及生物療法機制應考慮氧環(huán)境的影響。

2.7 降血糖血脂作用

陳峰等[34]研究海南羅勒水提取物和羅勒多糖的降糖作用，發(fā)現(xiàn)兩者降糖作用無明顯差異，羅勒多糖具有較弱的降血脂作用，其水提取物低劑量組、中劑量組具有顯著的降血脂作用。

2.8 其他作用

于華靜等[35]通過羅勒多糖作用荷瘤小鼠化療的實驗觀察，發(fā)現(xiàn)羅勒多糖能增強紫杉醇的抑瘤作用和提高小鼠生存率，且對肝腎無損傷。

3 展望

羅勒植物資源豐富，作為藥食兩用的植物應用歷史悠久，具有獨特的藥理作用。羅勒對蚊蟲叮咬部位有特殊的消炎、止癢和鎮(zhèn)痛效果，通過動物模型及對腫瘤細胞系作用效果的研究，發(fā)現(xiàn)羅勒多糖具有抗肝癌、抗肺癌、抗卵巢癌等多種生物活性，對進一步綜合開發(fā)和臨床推廣應用有著重要的現(xiàn)實意義。