微生物檢驗中培養基的質量控制要素淺析

游靜

（湖南應用技術學院，湖南常德415000）

隨著科學技術的進步，各種微生物檢驗試劑被細分化，檢測工作也因此更加快捷方便。但是，檢測過程中尤其是在微生物的分離培養中會遇到難分離、生化反應不明顯等現象，這時培養基的質量起到了決定性的因素。培養基是保證微生物繁殖、維持其活力的物質，是微生物生存的場所，其存在狀態主要有液體、半固體或者固體。如果培養基的質量達不到微生物生存的條件，那么微生物檢驗結果就會受到影響，所以做好培養基的質量控制對于保障檢驗結果的準確性意義重大。基于此，就培養基的選購、驗收及配制過程中的注意事項做以下分析。

1 培養基的選購與驗收

1.1 培養基的采購

實驗室所用培養基除實驗過程特殊要求外，基本選用市場上方便又快捷的商業化合成培養基。商業化培養基有以下優點：（1）不需要實驗人員動手配制，節約時間成本；（2）不會有其它物質的污染，避免給實驗結果帶來物質干擾；（3）操作誤差較小等。但是市面上人工合成的培養基質量參差不齊，不同廠家培養基對同一樣品檢測得到的結果可能會出現很大的差異。因此，實驗室在選購過程之中應該注重質量，選購通過質量管理體系認證、信譽度高、知名度高且質量有保障的廠家的產品。選購質量有保證的培養基，是出具準確檢測結果的基礎。

1.2 培養基的驗收

培養基要應用到實驗過程中，需經實驗室驗收合格后才可使用。培養基購買后應交由專業人員進行驗收，認真核驗并記錄培養基的名稱、培養基的數量、批號以及有效日期，同時查驗相應培養基的質檢報告，保證其有良好的理化指標和微生物性能測量指標，做到每種培養基質量可溯源。做好一切的檢驗工作之后方可入庫儲存。

培養基在實驗室具體投入使用之前必須要進行測試，保證其各項指標都符合使用標準，主要是理化指標以及微生物性能指標測試。

1.2.1 理化指標測試

理化指標測試主要是指培養基的pH值、顏色、澄清度以及穩定性等方面的檢測。具體檢測過程中，工作人員應對這些外在因素進行具體研究，觀察其與商家提供的質檢標準是否符合。做好這些因素的控制，保障培養基的質量，需要廠家在生產過程中從原材料以及生產過程、生產工藝等幾方面進行控制。如果出現問題，工作人員應及時更換培養基，同時與生產廠家進行溝通，督促其調整自己的生產工藝，做好生產原料質量的控制，保障培養基質量。工作人員在檢驗過程中一旦發現任何問題，應立即停止該培養基的使用，因為微生物檢測過程中培養基較小的質量差異都會對檢驗結果造成巨大的影響。

1.2.2 性能指標測試

利用培養基進行微生物實驗必須要保證除了實驗的微生物以外沒有其他的微生物可以存活，以避免對最終實驗結果產生影響。培養基在投入生產使用之前，工作人員應對培養基的生長率、選擇性和特異性進行具體檢測，確保試驗過程中不會有外在因素對實驗結果產生不利影響。生長率是指實驗菌種在培養基上的存活率，培養基對該實驗菌種的促生長率，確保微生物在該培養基上能夠長久地存活，且不斷繁殖，方便以后觀察與實驗。選擇性是指培養基對于其他非實驗生物的抑制性，避免其對最終的試驗結果產生不利影響。而特異性則是指培養基的指示能力，實驗菌種在培養機制上會形成相應的菌落，該群落的外部形態必須與實驗數據、以往的經驗相符合，否則該培養基則存在質量方面的問題。在具體的實驗過程中，實驗人員應對培養基的質量進行控制，具體的方法包括定量法、半定量法、定性法。其中半定量法和定性法應用使用較為廣泛。

2 培養基配制過程中的注意事項

2.1 配制要求

2.1.1 一般要求

為了確保實驗結果的準確性，培養基的配制必須按照相應的要求進行，做好配制記錄，記錄好培養基的名稱等各方面外部條件，確保培養基的質量，確保其能夠保障實驗順利完成。

2.1.2 實驗用水

實驗過程中，培養基的配制用水有著嚴格的要求，pH值應為中性，水溫保持在25 ℃左右。除了規定的要求以外，水中的菌落不能對實驗產生影響，應按照相應的標準進行具體的菌落總數測定，檢驗水污染狀況。為了避免這種情況，實驗過程中一般使用蒸餾水，這樣可以減少其它因素的干擾。

2.2 配制步驟

培養基的配制具體分為稱量、溶解和分裝3個步驟。稱量過程中應注意空氣濕度，在具體實踐過程中應選擇濕度較低的房間，防止培養基受潮，滋生細菌。此外，在具體稱量過程中還應正確使用天平，定量選擇，精確到位。還要使用專業的稱量物、量取儀器，防止交叉感染。分裝器具應盡量選擇玻璃容器，不建議選擇銅鐵制品的容器，因為這些容器本身在配制過程中會釋放鐵離子到培養基中，這對于細菌的成長與菌落菌株的控制十分不利。溶解時應注意溫度、適當加熱，分步驟、多層次加水，保障培養基能夠充分融合。分裝過程是將培養基分配到不同的容器中，應注意容器至少比培養基體積大1/5。

2.3 滅菌要求

滅菌是保證培養基質量的關鍵步驟，滅菌方法分為干熱滅菌和濕熱滅菌2種，這2種方法各有優點，但一般選擇濕熱滅菌。在具體實踐過程中，應切實保證培養基的質量，滅菌應以不損害培養基質量為前提。具體操作條件為在121 ℃環境中滅菌15～20 min。滅菌完成后，應采用具體的檢測方法進行滅菌效果的檢驗。不同培養基的滅菌方法存在差異，有些只需要高溫加熱煮沸即可。因此，工作人員在具體檢驗過程中要注意具體問題具體分析。

2.4 存儲

培養基的存儲首先應保證其在適宜菌種生長的溫度中，不可過高或過低。滅菌完成后，應立刻緊密封鎖容器蓋，避免受潮或者是空氣中的細菌落入培養基中，影響到實驗觀察。此外，還應該保證培養基在其有效期內能夠使用完，避免影響到最終結果。培養基使用后，應對各培養菌種、培養基做好標識，方便今后觀察選用。

3 結語

微生物檢測過程中，培養基的質量直接影響微生物檢驗結果。做好培養基的質量控制對提升微生物檢驗效果有著很大的幫助。通過對培養基的選購、驗收及配制過程中的注意事項進行分析，為實驗室以后開展檢驗工作做好培養基的控制提供了參考。