宋殿臣
(遼寧省清原滿族自治縣北山家林場,遼寧清原113316)
植物所能忍受的低溫耐受極限就是該植物的半致死溫度,低溫保持半致死溫度以下或持續下降,將導致植株死亡。這是由于低溫脅迫致使植物細胞膜功能受到破壞增加透性,細胞內電解質呈顯著滲出,受損程度越大,滲出率越高;因此可以通過測定植物組織電解質滲透情況來判定植物的凍害程度。本實驗采用電導法測定3種槭樹3年生幼苗嫩枝在溫度持續下降時的相對電導率,配合Logistic曲線方程推導半致死溫度更能準確地反映植物所耐受的低溫極限,從而確定3種槭樹半致死溫度。
供實驗所用材料為3種槭樹的2018年當年生枝條,元寶楓于沈陽農業大學植物園采集;色木槭和擰筋槭于遼寧省實驗林場苗圃內采集。采集時,選擇生長旺盛樹齡為中齡的目的植株,截取植株中上部1年生枝條,采集后段取直徑大于5mm、長度為20cm小段備用。
將采集的枝條先后用自來水、蒸餾水分別沖洗3次,然后用吸水紙吸干水分。將各樹種的枝條分成8組,每組4段枝條,其中一組置于20~25℃室溫作對照,其余各組放入低溫冰箱內。樣品分別降溫至-15℃停滯24h,再從-15℃降溫,降溫至-20℃停滯24h,再從-20℃降溫,每次降溫5℃,每個設定溫度停留24h后再繼續降溫。即-15℃降至-45℃,每次設定溫度停滯24h后取出1組樣品,再繼續降溫直至設定溫度為-45℃,停滯24h后取出最后一組樣品。將低溫處理結束后取出的樣品放置于0~4℃的冰箱內解凍12h,再置于20~25℃室溫下恢復12h。
3.1 將處理后的枝條,避開芽眼切成若干個2mm厚的小段,每組4個重復,每個重復準確稱取1.00g放入試管中加入30mL的去離子水浸泡12h,期間不斷搖動試管,用DSS-120型電導儀測定每個重復的初電導(L1),然后封口在沸水中煮30min,冷卻到20~25℃室溫測定每個重復的終電導(L2)。取得數據后,對各組4個重復進行方差分析,經分析8組每個重復不具有顯著性差異,得出平均每組平均電導率。
V(%)=[(L1-L)/(L2-L)-(Lβ1-L)/(Lβ2-L)]×100%
式中:V為相對電導率;L為蒸餾水的導電值;Lβ為對照樣本導電值。
3.3 將溫度和相對電導率之間的關系,用Logistic方程y=K/(1+ae-bx)進行回歸分析,相關度(R)顯著時,再計算半致死溫度X。
3.4 在Logistic方程y=K/(1+ae-bx)中,K值在方程回歸分析時定為100%。a、b為參數,對此方程求二階導數,并令其等于零,即可得到曲線的拐點X(X=lna/b),X即為半致死溫度。

表1 3種樹種溫度與相對電導數據表

圖1 不同溫度下相對電導率的變化

樹種回歸模型半致死溫度相關度元寶楓y=100/(1+3.84e-0.037x)36.570.9563色木槭y=100/(1+4.508e-0.0324x)46.50.9831擰筋槭y=100/(1+4.312e-0.0308x)47.40.9724
4.1 從表2可以推論,溫度變化與相對電導率呈反比例關系,說明隨著低溫脅迫的加深,溫度不斷降低,植物枝條電解質滲出相應增加,相對電導率隨之增加。
4.2 3種槭樹幼苗枝條溫度從-15~-35℃溫度梯度間,電解質滲出率變化不大,-35~-40℃溫度梯度間元寶楓電解質滲出率明顯增加,而色木槭、擰筋槭的電解質滲出率也有少量增加,但增加幅度明顯小于元寶楓;-40~-45℃溫度梯間元寶楓電解質滲出率不再有明顯變化,色木槭、擰筋槭電解質滲出率依然穩定上升。
4.3 3種槭樹3年生幼苗當年生枝條遭受低溫脅迫時,低溫下膜質以液晶相向凝膠相轉變, 造成細胞膜膜相分離,細胞當中電解質外滲從而引起低溫傷害。當溫度達到一定低溫,電解質外滲急劇增加,造成的傷害不可逆轉,植株死亡;這個低溫極限被稱作半致死溫度。
4.4 經過用 Logistic 方程進行回歸分析,溫度變化與相對電導率相關關系顯著,相關度接近于1;因之對半致死溫度進行數量化分析,得到元寶楓、色木槭、擰筋槭3年生幼苗半致死溫度分別為-36.57℃、-46.5℃、-47.4℃,從而為遼東地區培育3種槭樹幼苗提供區域化依據。