N-乙酰-5-羥色胺對(duì)視網(wǎng)膜缺血-再灌注損傷大鼠視網(wǎng)膜 Fas、FasL 蛋白表達(dá)的影響△

楊明 劉建曉 徐寧 李光祖 王俊 王曉莉 趙巖松

視網(wǎng)膜缺血-再灌注損傷(retina ischemia-reperfusion injury，RIRI)常見于青光眼、視網(wǎng)膜中央動(dòng)脈閉塞等多種眼科疾病，可導(dǎo)致視網(wǎng)膜細(xì)胞損傷及視網(wǎng)膜功能損害，甚至導(dǎo)致失明。目前臨床對(duì)RIRI尚缺乏行之有效的治療方案。因此，尋找RIRI的防治方法已成為眼科研究的熱點(diǎn)。細(xì)胞凋亡是RIRI的主要發(fā)生機(jī)制，死亡受體途徑是由細(xì)胞膜上死亡受體介導(dǎo)的重要凋亡機(jī)制，F(xiàn)as、Fas配體(FasL)蛋白是該途徑的核心蛋白，其中，F(xiàn)as又稱為APO-1/CD95，而FasL是一種Ⅱ型蛋白，可以跨膜和分泌，均屬腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF)受體家族的重要成員[1]。Fas與其配體FasL結(jié)合后，激活凋亡通路的Caspase-3(含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3)，又稱死亡蛋白，引起凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[2]。N-乙酰-5-羥色胺(N-acetylserotonin，NAS)是褪黑素前體物質(zhì)[3]，具有抗氧化[4]、抗缺血[5]等生物活性作用[6]。我們前期研究發(fā)現(xiàn)NAS對(duì)大鼠 RIRI 具有神經(jīng)保護(hù)作用，其機(jī)制與 NAS 減輕RIRI大鼠神經(jīng)細(xì)胞的凋亡有關(guān)[7]，但是 NAS 如何減輕 RIRI 大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡有待進(jìn)一步研究。本研究采用高眼壓法建立RIRI模型，通過腹腔注射NAS進(jìn)行干預(yù)，探討 NAS減輕RIRI大鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組取健康成年 Sprague Dawley 大鼠 54 只，體質(zhì)量200～250 g，雄性(購自濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司并授權(quán)使用)。采用隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠隨機(jī)分為正常組(6 只)、RIRI組(24 只)與 NAS組(24 只)；通過高眼壓法建立大鼠 RIRI模型，依據(jù)造模后不同時(shí)間點(diǎn)又分為 6 h、12 h、24 h及72 h四個(gè)亞組。NAS組于造模前 30 min 腹腔注射 NAS (5 mg·kg-1)，RIRI組腹腔注射等劑量的生理鹽水。

1.1.2主要試劑NAS (美國 Sigma-Aldrich 公司)；……