孫 威 裴笑月 馬 帥 賈 翼 于 劍*
(1 大連大學(xué)附屬新華醫(yī)院普外科,遼寧 大連 116021;2 大連大學(xué)附屬新華醫(yī)院病理科,遼寧 大連 116021;3 大連大學(xué)附屬新華醫(yī)院腫瘤內(nèi)科,遼寧 大連 116021)
腫瘤的發(fā)生發(fā)展涉及到一系列因子的變化,Mena蛋白調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞,在腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移方面起作用,對評估預(yù)后有意義,故有望成為腫瘤診斷和指導(dǎo)治療的新的腫瘤標(biāo)志物。Mena蛋白在多種腫瘤中過表達(dá),如乳腺癌、黑色素瘤等[1],但與大腸癌的關(guān)系少見報道。本研究采用免疫組織化學(xué)方法檢測大腸癌及癌旁組織、息肉、正常淋巴結(jié)及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中Mena 蛋白的表達(dá)水平,觀察不同大腸癌組織中Mena蛋白的表達(dá),探討其表達(dá)變化與臨床的關(guān)系。
1.1 一般資料:收集大連大學(xué)附屬新華醫(yī)院病理科2014年1月至2014年12月的大腸癌標(biāo)本存檔蠟塊共20例、癌旁組織20例、正常淋巴結(jié)組織20例、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織20例、大腸息肉(腺瘤)組織20例。大腸癌組織中男性14例,女性6例,年齡34~76歲。按2010版《消化系統(tǒng)腫瘤WHO分類》標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分類[2]。
1.2 組織芯片的制備:癌旁正常黏膜組織、癌組織、息肉(腺瘤組織)組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織及正常淋巴結(jié)組織。
1.3 免疫組織化學(xué)染色:已知陽性對照片及PBS代替一抗陰性對照片進(jìn)行對照。Mena單克隆抗體及非生物素免疫組化ElivisionTM plus檢測試劑盒均按照說明書進(jìn)行實(shí)際操作。
1.4 方法:大腸癌組、癌旁組織組、息肉(腺瘤)組及淋巴結(jié)組樣本為石蠟包埋組織,照試劑說明書進(jìn)行:4 μm切片、二甲苯脫蠟、梯度酒精水化后高壓鍋熱處理5~8 min,過氧化物酶阻斷血清封閉,加I抗60 min,磷酸鹽緩沖液洗3次,每次2 min;……