北方地區針葉樹外生菌根真菌樣本的采集與保存

肖巍

(遼寧省沙地治理與利用研究所，遼寧 阜新 123000)

菌根是土壤中高等植物根系與菌根真菌菌絲的結合，是一種常見的植物共生現象。在長期的生存過程中，這不僅有利于菌根真菌的生存，也有利于提高植物在惡劣環境的抵抗力[1]。菌根能擴大宿主植物的根系的吸收面積，增加營養物質的吸收，產生生長素，促進寄主植物的生長，改善植物的根際環境，提高的抗病性[2]。正是需要深入研究的重要基礎性工作，通過開展樣品采集和保存，收集相關的數據，為相關研究奠定基礎。

1 外生菌根的調查

1.1 一般調查

在一定區域內，當原始資料相對較少且對菌根狀況不了解的情況下，通常先進行一般調查。調查時間一般選在雨季初期，6-8月是林地內菌根真菌子實體大量出現的季節。調查內容主要包括菌根菌種類、多度以及樹種感染菌根菌的情況等。對生境情況也要做詳盡的記錄，如植被情況、立地條件、宿主植物等。一般調查法隨機性較強，調查范圍大且具有一定的代表性。

1.2 重點調查

在一般調查基礎上，可以針對具體問題進行重點調查。如菌根真菌在生態系統演替中的變化規律、不同季節菌根真菌的侵染情況等。

1.2.1 設置標準地 重點調查需要根據具體情況設置標準地。如果面積較小，可進行全面踏查。如果面積較大，可設置若干個樣方。一般情況下，標準地面積應占調查總面積1%。每個樣地需要設立標志，編排序號。

1.2.2 定期進行調查 重點調查需要定期進行。子實體大多數在雨季生長，秋季降雨減少后停止生長。調查時間一般在春季開始觀測，秋季停止觀測，期間每隔一定時間調查或觀測取樣一次。非雨季可以在15～20 d觀測一次，由于雨季內種類變化較大，可以適當縮短，如5～10 d觀測一次。

1.2.3 調查內容 一般應包括真菌種類、生態習性、生長情況、多度等。與其相關的地形地貌、土壤環境、植被情況、林分組成等也應一一記錄，并做好現場影像資料的記錄。如真菌種類調查，則應重點記錄真菌種類，如季節性變化觀測則重點記錄種類變化及生長情況。

2 菌根標本的采集

標本是研究工作最基本、最重要的實物資料之一，標本的質量對研究工作有著重要意義。

2.1 菌根標本的采集

菌根樣品的采集可用鐵鍬或土壤刀挖取，也可根據具體情況用土鉆或者其他特制取樣器取樣。取出的根系會攜帶大量泥土，可用小刀將表面泥土剝去，需要小心處理，切忌碰掉菌根，用水浸泡或者漂洗。清洗好的菌根標本可立即進行觀察記錄，也可裝入塑料袋帶回室內觀測。塑料袋內要有松軟保濕的填充物或者充氣保存，不至于擠壓損壞和萎蔫。

2.2 菌根菌標本的采集

菌根真菌子實體通常具有較高的含水量，子實體組織易于受到破壞[3]。而子實體的結構等特征又是重要的分類依據，所以要求采集完整、有代表性的子實體。對于帶有菌索的菌類，應繼續進行追蹤檢查。對采集到的標本要及時處理，以防標本腐爛或蟲蛀。首先觀察和記錄，并采取現場進行影像記錄，以準確記錄其形態特征。仔細去除樣品表面的泥沙后，表面附吸水紙，并把它放入紙袋，不要水洗。若后續進行分離培養，采集時要酌情增加樣本數量。也可攜帶裝好培養基的試管，現場進行分離保存。

3 菌根標本的保存

菌根標本可在恒溫50～60 ℃條件下干燥12～24 h后，取出烘干標本，用塑料薄膜壓制，或按蠟葉標本制作法用臺紙保存。要注意保護根部的菌根，以免脫落。子實體標本需要用快速烘干法，以盡可能保持原狀。

對于微觀結構觀測，可以制作切片標本。對于菌根真菌有進一步生理研究，可以分離子實體到相應培養基中，分離提純以保存菌種，待下一步研究使用。

4 小結與討論

4.1 調查工作很重要，可以了解掌握菌根真菌資源以及對生境的敏感變化情況；重視采集和保存工作，用好方式方法，做好工具選擇、溫濕度控制等每個細節，以確保菌根真菌標本的質量，是菌根研究的基本技能。

4.2 隨著對菌根研究的深入，菌根技術在林業生產中的應用越來越受到人們的高度重視，如引種育苗、逆境造林等。在我國北方部分地區，生態脆弱，氣候干旱，土壤貧瘠，而油松、紅松、落葉松、樟子松等松科樹種是我國北方的主要針葉造林樹種。就立地條件而言，不同的立地條件適合于一定種類菌種的生長；就樹種而言，不同的樹種適合使用不同的菌種。所以，需要進一步加強菌根技術研究以及在林業中的應用推廣，進而更加有效地解決生產實際中的問題。