4種戊唑醇劑型對大型溞的急性毒性評價

主艷飛 ，慕 衛 ，劉 峰 ，于偉麗 ，左文靜 ，莊占興 *，宋化穩

（1.山東農業大學植物保護學院，山東泰安 271018；2.山東省農藥科學研究院，山東省化學重點實驗室，濟南250033）

農藥污染是世界主要環境污染之一，農藥在施用過程中由于噴灑和流失會進入附近的土壤和水體環境中，造成土壤和水體污染，并引起土壤和水體中非靶標生物的中毒或死亡[1]。戊唑醇屬三唑類內吸殺菌劑，是農業生產中常用殺菌劑，其主要作用機理是抑制麥角甾醇中間體的氧化脫甲基反應[2]。戊唑醇長期大量使用已對生態環境造成一定的壓力和影響。有研究表明：戊唑醇對玉米螟赤眼蜂的毒性為高風險[3]；戊唑醇對家蠶的急性毒性為中等毒[4]；戊唑醇對花翅搖蚊的毒性為中等毒，EC50值為3.056 mg/kg[5]。其對水生生物的毒性因物種的不同而略有差異。根據《化學農藥環境安全評價試驗準則第13部分：溞類急性活動抑制試驗》[6]毒性評價標準，其等級劃分多為中等毒。研究表明，戊唑醇對魚類[7]、大型溞[8]、羊角月牙藻[9]等均為中等毒。吳生敢等[10]研究表明，戊唑醇對斜生柵列藻的毒性為高毒，對大型溞和斑馬魚的毒性為中等毒。

相同成分不同劑型的化學農藥對生態環境的毒性受助溶劑、消解動態及環境行為等因素的影響。據理化性質，戊唑醇可以加工為乳油、可濕性粉劑、懸浮劑、濕拌種劑、水乳劑、懸浮種衣劑、水分散粒劑等[11]。不同劑型的戊唑醇對不同水生生物的毒性評價鮮有報道。因此，有必要進一步研究不同劑型戊唑醇對水生生物的急性毒性，制定科學合理的用藥方案，選擇合適劑型以減少環境污染和浪費。本文采用半靜態法測試95%戊唑醇原藥（TC）、50%戊唑醇懸浮劑（SC）、85%戊唑醇水分散粒劑（WG）、250 g/L戊唑醇水乳劑（EW）、80%戊唑醇可濕性粉劑（WP）對大型溞的急性毒性，評估戊唑醇4種常見劑型產品對大型溞的毒性差異，分析篩選出環保劑型，以期減少農藥使用過程對生態環境的污染。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試藥劑：95%戊唑醇TC由陜西康禾立豐生物科技藥業有限公司提供；50%戊唑醇SC由青島東生藥業有限公司提供；85%戊唑醇WG由青島泰生生物科技有限公司提供；250 g/L戊唑醇EW由青島凱源祥化工有限公司提供；80%戊唑醇WP由上海升聯化工有限公司提供。

大型溞（Daphnia magna）引種于中國疾病預防控制中心環境與健康相關產品安全所。試驗選用實驗室條件下，孤雌繁殖3代以上、出生時間為6～24 h、健康活潑的幼溞。

試驗用水為ISO標準稀釋水。稀釋水pH值為6.0～9.0，硬度為140～250 mg/L（以CaCO3計），溶解氧3.0 mg/L以上。在此水體中，大型溞生長健康。恒溫光照培養箱內進行試驗，光照/黑暗時間比為16/8，溫度為（20±2）℃。

1.2 試驗方法

試驗參照《化學農藥環境安全評價試驗準則第13部分：溞類急性活動抑制試驗》（GB/T 31270.13—2014）[6]，采用半靜態法測定各制劑對大型溞的急性毒性。根據預試驗結果，每個制劑設置5個試驗有效成分質量濃度，見表1。將試驗藥液分裝至6個燒杯中（其中1個燒杯用于水質測定），每個燒杯中加入30 mL藥液，每個濃度設置3次重復，每次重復10只幼溞。同時設置空白對照。試驗期間不喂食，于藥劑處理后24 h和48 h測定燒杯中溶液的溶氧量、pH值，同時觀察大型溞中毒癥狀和受抑制數。根據GB/T 31270.13—2014中農藥對溞類的毒性分級標準對戊唑醇TC及4種劑型進行毒性等級劃分。

表1 不同劑型戊唑醇的急性毒性試驗濃度

1.3 數據統計

試驗結果用SPSS16.0統計軟件處理，計算供試藥劑對大型溞24 h、48 h的半數抑制濃度（EC50）值和95%置信限。

2 結果與分析

2.1 大型溞在5種戊唑醇制劑中的中毒癥狀

試驗期間，空白對照組大型溞未出現死亡和可見異常行為，不同劑型戊唑醇對大型溞表現出不同程度抑制作用，染毒后的大型溞游動減慢，觸角后束，基本觀察不到擺動，體色發白，不再透明，沉于杯底。各藥劑處理組試驗大型溞出現不同程度的死亡，48 h死亡率達到峰值。

2.2 戊唑醇TC及4種制劑對大型溞的急性毒性評價結果

戊唑醇TC及4種制劑對大型溞的急性毒性試驗結果見表2。50%戊唑醇SC對大型溞24、48 h的EC50值最小，分別為1.807 mg/L和1.374 mg/L。95%戊唑醇TC對大型溞24、48 h的EC50值最大，分別為17.493 mg/L和8.396 mg/L。在本實驗條件下，戊唑醇TC及4種劑型對大型溞的急性毒性均為中等毒。

3 討論

隨著農藥用量的逐年增加，農藥助劑的安全性問題日益受到關注。雖然農藥助劑對靶標生物沒有直接的生物活性，但對人類、有益生物和環境存在一定的毒害作用[11]。受所用助劑溶劑等材料、有效成分含量等因素影響，相同化學農藥的不同劑型產品對環境生物的急性毒性存在顯著差異。王雅東等[12]測得430 g/L戊唑醇SC、60 g/L戊唑醇FS、25%戊唑醇EW對斑馬魚96 h的半致死濃度（LC50）分別為7.81 mg/L、5.28 mg/L和3.10 mg/L，3種劑型戊唑醇對斑馬魚的急性毒性均為II級，且以懸浮劑對斑馬魚的急性毒性最低。季靜等[13]測定了40%毒死蜱EC和30%毒死蜱CS對魚類、鳥類、家蠶和蜜蜂等4種環境生物的毒性。毒死蜱EC對斑馬魚的LC50值（96 h）為0.68 mg/L，毒性為高毒，毒死蜱CS對斑馬魚的LC50值為47.30 mg/L，毒性為低毒。兩者毒性差異非常大。因此，評價不同農藥劑型產品對水生生物的安全性對合理使用農藥、開發低毒劑型、減少農藥對農業生態環境的污染、保護生態多樣性具有重要意義。

龔會琴等[8]研究結果顯示，戊唑醇TC對大型溞的LC50值（48 h）為8.05 mg/L，毒性為中等毒。吳生敢等[10]研究結果表明，60 g/L戊唑醇FS對大型溞和斑馬魚的毒性為中等毒。戊唑醇其他劑型產品對大型溞的急性毒性研究鮮少報道。雖然不同研究的急性毒性結果有所差異，但是戊唑醇對大型溞的急性毒性均劃分為中等毒。

表2 戊唑醇TC及不同制劑對大型溞急性毒性試驗結果

分析表2具體數據，相同劑型產品隨受試物濃度的增加和試驗時間的延長，大型溞中毒程度加重，戊唑醇TC及其4種劑型產品的48 h急性毒性均比同劑型產品24 h毒性高；不同劑型中95%戊唑醇TC對大型溞急性毒性數據最高，毒性最低。其余4種劑型的戊唑醇毒性比較，80%戊唑醇WP＜250 g/L戊唑醇EW＜85%戊唑醇WG＜50%戊唑醇SC。80%戊唑醇WP的急性毒性是50%戊唑醇SC毒性的4倍左右，是85%戊唑醇WG毒性的2倍左右，是250 g/L戊唑醇EW毒性的2倍左右。一般來說，不同劑型間的毒性差異主要因為有機溶劑和乳化劑的作用。

同一種有效成分不同廠家生產的相同劑型產品也會存在不同的毒性。針對于本文研究的4種戊唑醇劑型產品，80%戊唑醇WP毒性最低，實際使用中推薦優先使用，并嚴格按照正確使用方式及控制用量，減少戊唑醇對水生生物的影響，保護生態系統。

4 結論

戊唑醇TC及其4種制劑產品對大型溞急性毒性為中等毒，不同劑型產品對大型溞毒性不同，其中戊唑醇WP對大型溞的急性毒性最低。在農業生產中，推薦使用戊唑醇WP劑型控制植物病害，以減少農藥對生態系統的影響。