普魯蘭酶產(chǎn)生菌的誘變選育及其發(fā)酵工藝的優(yōu)化

盧佳琦 李市場 劉永康 馮騰柱 王大紅

(河南科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院/洛陽市微生物發(fā)酵工程技術(shù)研究中心/ 河南省食品原料工程技術(shù)研究中心，河南 洛陽 471023)

低能離子束修飾技術(shù)作為一種有效的物理誘變方法，目前已在農(nóng)作物、植物和微生物等育種中得到廣泛繁應(yīng)用，并取得了良好的誘變效果[1-4]。不同于傳統(tǒng)的物理、化學(xué)誘變方法，低能離子束技術(shù)在誘變過程中因其具有突變率高、突變譜廣、損傷輕、易穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，已得到廣泛認(rèn)可[5-8]。

普魯蘭酶對支鏈淀粉中的α-1,6糖苷鍵具有專一性，能夠?qū)⒅ф湹矸壑械乃兄ф溔壳袛啵罱K形成直鏈淀粉的一類脫支酶，在淀粉加工生產(chǎn)過程中具有一定的實(shí)用價(jià)值[9]。目前，國外普魯蘭酶的商業(yè)市場已被NOVO公司壟斷，雖然國內(nèi)有諾維信和杰能科等公司生產(chǎn)普魯蘭酶，但生產(chǎn)成本高，酶活不穩(wěn)定且酶活產(chǎn)量與國外有較大的差異[10-12]，因此選育普魯蘭酶高產(chǎn)菌仍是人們廣泛關(guān)注的問題。王新[13]通過紫外誘變、紫外-氯化鋰復(fù)合誘變及硫酸二乙酯對假交替單胞菌M25進(jìn)行處理得到一株普魯蘭酶產(chǎn)生菌；謝能中等[14]通過PCR法得到普魯蘭酶完整的編碼基因，為構(gòu)建基因工程菌奠定了基礎(chǔ)。但利用低能離子束修飾技術(shù)誘變選育普魯蘭酶產(chǎn)生菌的研究尚鮮見報(bào)道。本研究利用低能離子束修飾技術(shù)對普魯蘭酶產(chǎn)生菌株進(jìn)行誘變處理，進(jìn)而選育出一株普魯蘭酶產(chǎn)酶酶活高的菌株，然后通過響應(yīng)面法對其發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化并對其發(fā)酵特性進(jìn)行初步研究，旨在為利用低能離子束技術(shù)誘變普魯蘭酶產(chǎn)生菌的研究提供一定的理論依據(jù)。……