王娟娟,閔育娜,劉瑞芳,王哲鵬,劉福柱,牛竹葉
(1.西北農林科技大學 動物科技學院,陜西楊凌 712100;2.陜西華秦農牧科技有限公司,陜西楊凌 712100)
略陽烏雞是中國重要的地方烏雞品種,主產區位于陜西省漢中市略陽縣及周邊區域,因此而得名。略陽烏雞是中國烏雞中體型最大的品種,具有典型的“六烏” 特征,即烏皮、烏喙、烏腿、烏趾、烏舌、烏冠,被譽為“禽中明珠”[1]。因該品種體型較大、產肉性能較高、肉質鮮美,所以不僅具有較高的藥用價值,而且具有較高的肉用價值, 開發潛力很大。前人的研究主要集中在略陽烏雞種質特性等方面[2-3],但有關飼料營養調控的研究較少。
蛋白質是構成一切生命機體細胞和組織結構不可缺少的組分,對動物維持生命活動具有極其重要的作用。有關日糧蛋白質對家禽生長發育及生理代謝的影響國內外已有廣泛研究[4-10]。然而,目前基于略陽烏雞生理遺傳特點的蛋白質營養需要研究較少,且7~12周齡略陽烏雞的蛋白質需要量尚未見報道。本研究通過分析日糧中不同蛋白質質量分數對7~12周齡略陽烏雞生長性能、主要組織器官發育及血清生化指標的影響,初步確定其適宜蛋白質需要量,為該雞種的精準飼養和高效選育提供參考依據。
選用600只43日齡體質量相近的健康略陽烏雞,公母各半。
采用單因子完全隨機試驗設計,分5個處理組,每處理分別飼喂代謝能相同、粗蛋白質質量分數不同的日糧,每個處理6個重復,每個重復20只雞(公母各半)。試驗日糧參照《NY/T33-2004黃雞飼養標準》中黃羽肉雞營養需要、地方雞種營養需要研究和NRC(1994)蛋雞與肉種雞營養需要量標準,并根據略陽烏雞生長特性略加調整(表1)。
籠養,保持舍內溫度為18~21 ℃,濕度為55%~65%。光照時間由每天16~18 h逐漸減至自然光照(每周減少0.5 h)。每天飼喂4 次,嚴格進行定時定量飼喂,嚴控飼料拋灑,每次加料量為料槽的1/4高度。舍內每周消毒1次,雞群按常規免疫程序進行免疫。

表1 試驗日糧配方及營養水平 Table 1 Composition of experimental diets and nutritional level
注:①預混料為每千克飼糧提供維生素A 10 000 IU,維生素D33 000 IU,維生素E 20.15 IU,維生素K36 mg,維生素B16 mg,維生素B212.85 mg,維生素B66 mg,維生素B125 mg,葉酸6 mg,泛酸12 mg,煙酸40 mg,生物素5 mg,銅7.68 mg,鐵74 mg,鋅76 mg,錳80 mg,硒0.068 5 mg,碘0.2 mg,乙氧喹2.8 mg,石粉4.5 g。②括號內為實測值,其他為計算值。
Note:① Supplied the following per kilogram of total diet:Vitamin A (retinyl acetate) 10 000 IU,Vitamin D3(cholecalciferol) 3 000 IU,Vitamin E (DL-α-tocopheryl acetate) 20.15 IU,Vitamin K3(menadione sodium bisulfate) 6 mg,Thiamine 6 mg,Riboflavin 12.85 mg,Pyridoxine hydrochloride 6 mg,Cobalamin 5 mg,Folic acid 6 mg,Calcium-D-pantothenate 12 mg,Nicotinic acid 40 mg,Biotin 5 mg,Cu (CuSO4·5H2O) 7.68 mg,Fe (FeSO4·7H2O) 74 mg,Zn (ZnO) 76 mg,Mn (MnSO4·H2O) 80 mg,Se (NaSeO3) 0.068 5 mg,I (KI) 0.2 mg,Ethoxycarbonyl quinoline 2.8 mg,Limestone 4.5 g.② The values in brackets are measured.
1.4.1 生長性能指標測定 飼養期間以重復為單位記錄每周喂料量,每3周以重復為單位記錄試驗雞空腹體質量(禁食12 h,自由飲水),計算平均日增量、日采食量及料質量比。
1.4.2 主要組織器官發育測定 于12 周齡末每處理組各重復隨機抽取與該處理組平均體質量相當的雞2 只(公母各1只),屠宰后測定主要組織器官發育指標,并計算組織或器官指數,計算公式為:某器官指數或組織的質量占活體質量的百分率(%)=某器官或組織的質量(g)/活體質量(g)×100。
1.4.3 血液生化指標測定 在12周齡末每處理組各重復隨機抽取與該處理組平均體質量相當的雞2 只(公母各1 只),在屠宰前每只翅靜脈采血5 mL,靜置2 h后3 000 r/min離心10 min獲得血清,立即保存于-20 ℃,用于測定血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮、尿酸、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶和三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)和胰島素的質量濃度。血清生化指標采用全自動生化分析儀測定(HATICHI 7180,日本):總蛋白及白蛋白質量濃度采用中生北控生物科技股份有限公司的試劑盒測定;尿素氮及尿酸質量濃度采用上海科華生物工程股份有限公司的試劑盒測定。T3、T4和胰島素質量濃度采用北京北方生物技術研究所生產的放免試劑盒及伽瑪計數器(Packard 8500,USA)測定。
用Excel軟件進行數據整理,采用SAS軟件中General linear model 模型的單因子方差分析程序進行數據分析,對差異顯著的進行Duncan’s多重比較。結果以“平均值±標準差”表示。采用SAS軟件中NLIN模型進行線性回歸分析,二次曲線回歸方程模型如下:
y=ax2+bx+c
其中y為平均日增量或料質量比,a和b為二次曲線回歸方程回歸系數,c為截距,x為日糧蛋白質水平(g/kg),-b/2a為日糧最適蛋白質質量分數。
由表2可知,日糧蛋白質質量分數對7~12周齡略陽烏雞平均日采食量沒有顯著影響(P>0.05),而對平均日增質量及料質量比有顯著影響(P<0.05)。18.06% 蛋白質量分數組平均日增質量顯著高于12.39%、14.20%、16.60% 和20.15% 組(P<0.05)。18.06% 蛋白質量分數組料質量比顯著高于12.39%、14.20%和20.15%組(P<0.05),但與16.60%組差異不顯著(P>0.05)。日增量及料質量比與日糧蛋白質質量分數存在顯著的二次曲線關系(P<0.05),隨著日糧蛋白質量分數的增加,平均日增量呈先上升后下降的趨勢,而料質量比呈先下降后上升的趨勢,且經回歸分析差異顯著(表3)。

表2 日糧不同蛋白質質量分數的7~12周齡略陽烏雞生長性能Table 2 Dietary CP mass farction on growth performance in Lueyang black-boned chickens from 7 to 12wk of age
注:同列不同字母表示差異顯著(P<0.05)。下同。
Note:Values within a line with difference superscript letters were significantly different(P<0.05).The same bellow.

表3 7~12周齡略陽烏雞日糧蛋白質需要量的回歸分析Table 3 Regression analysis of protein requirement in Lueyang black-boned chickens from 7 to 12wk of age
注:y表示日增量(g/d)、料質量比,x表示日糧蛋白質質量分數(g/kg)。
Note:y.Daily gain,F/G.x.dietary protein mass farction .
2.2.1 組織器官質量 由表4可知,日糧蛋白質質量分數對12周齡末略陽烏雞胰腺、胸腺和法氏囊的質量影響顯著(P<0.05),對心臟、肝臟、肌胃和脾臟的質量影響不顯著(P>0.05)。20.15%組略陽烏雞胰腺質量顯著高于12.39%、14.20% 和18.06% 組(心臟、肝臟、肌胃和脾臟質量,P<0.05),但與16.60% 組差異不顯著 (P>0.05)。20.15% 略陽烏雞胸腺質量和法氏囊質量均顯著高于12.39% 水平組(P<0.05),但與14.20%、16.60% 和18.06% 組差異不顯著(P>0.05)。
2.2.2 組織器官質量占體質量比 由表5可知,日糧蛋白質質量分數對12周齡末略陽烏雞胸肌率影響顯著(P<0.05),而對腿肌率和腹脂率影響不顯著 (P>0.05)。20.15%組略陽烏雞胸肌率顯著高于12.39% 和14.20% 組(P<0.05),而與16.60% 和18.06% 組差異不顯著(P>0.05)。
由表6可知,日糧蛋白質質量分數僅對12周齡末略陽烏雞胰腺指數影響顯著(P<0.05),對心臟、肝臟、肌胃、胸腺、脾臟和法氏囊指數影響不顯著(P>0.05)。20.15%組略陽烏雞胰腺指數顯著高于12.39% 和18.06% 組(P<0.05),而與14.20% 和16.60% 組差異不顯著 (P>0.05)。

表4 日糧不同蛋白質質量分數組12周齡末略陽烏雞部分器官質量Table 4 Dietary CP mass fraction on some tissues and organs in 12-wk-old Lueyang black-boned chickens

表5 日糧不同蛋白質質量分數組12周齡末略陽烏雞部分肉質性狀Table 5 Dietary CP mass farction on proportion of some chicken quality of 12-wk-old Lueyang black-boned chickens

表6 日糧不同蛋白質質量分數組12周齡末略陽烏雞部分器官指數Table 6 Dietary CP mass farction on index of some organs of 12-wk-old Lueyang black-boned chickens
由表7可知,日糧蛋白質質量分數對12周齡末略陽烏雞血清中白蛋白及T3質量濃度影響顯著(P<0.05),而對總蛋白、球蛋白、尿素氮、尿酸、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶、胰島素和T4的質量濃度影響不顯著(P>0.05)。隨日糧蛋白質量分數的提高,血清中白蛋白質量濃度顯著增加,18.06%組顯著高于12.39% 和14.20% 組(P<0.05),而與16.60% 和20.15% 組差異不顯著(P>0.05)。血清中T3質量濃度雖然也受日糧蛋白質量分數的顯著影響(P<0.05),但未表現規律性。
盡管認為蛋白質營養實質上是氨基酸營養,然而蛋白質作為氮供給的總體營養指標,測定其最適日糧供給質量分數仍然非常重要。研究表明日糧蛋白質對生長期雞的生長性能具有顯著影響[4-5]。通常日糧蛋白質質量分數對雞生長性能的影響呈二次曲線變化趨勢,即日糧蛋白質缺乏或過量都會顯著降低雞的生長性能,只有適量的日糧蛋白質供給才會使雞達到最大生長速度或最佳飼料效率[6-11]。本研究結果表明,不同蛋白質質量分數顯著影響7~12周齡略陽烏雞平均日增量和料質量比。整體上蛋白質質量分數對此階段略陽烏雞生長性能的影響也呈現二次曲線變化的趨勢,表明本研究中日糧蛋白質質量分數梯度處理是基本合理的。這些結果與前人的報道結果類似[10-12]。本研究分別以日增質量分數和料質量比作為生長性能敏感指標,利用回歸分析確定7~12周齡略陽烏雞適宜蛋白質質量分數為17.52%和17.18%。有證據表明日糧蛋白質可能通過影響一些重要功能基因的表達,進而調控家禽的生長發育[11]。然而有關日糧蛋白質調控家禽生長發育的分子機制尚需深入探究,這不僅可以加深人們對營養素作用機制的認知,而且也有助于推動建立家禽精準營養調控的新技術體系。

表7 日糧不同蛋白質質量分數組12周齡略陽烏雞血清生化指標及激素水平Table 7 Dietary CP mass farction on biochemical indicators and hormone concentrations in serum of 12-wk-old Lueyang black-boned chickens
有研究報道,飼喂低蛋白質量分數日糧的肉雞相較于飼喂正常蛋白質量分數的肉雞其腹脂率顯著增高,而日糧粗蛋白質質量分數越高則肉雞腹脂率越低[11],這可能是由于高蛋白質質量分數日糧一方面刺激肌肉組織的發育,另一方面抑制肝臟脂質合成,最終降低脂肪在體內的積累。本研究結果表明,在日糧能量質量分數相同的情況下,不同日糧蛋白質質量分數對12周齡略陽烏雞腹脂率沒有顯著影響,這與Nawaz 等[13]的研究結果類似。而與Liu等[10]的報道結果不一致。這可能一方面與略陽烏雞固有的生理遺傳特性有關,另一方面也可能與不同試驗設計的蛋白質質量分數、代謝能質量分數及二者比例(能蛋比)有關,這一問題有待進一步研究。本研究發現日糧蛋白質質量分數對12周齡略陽烏雞胸肌率有顯著影響,隨著日糧蛋白質質量分數的提高,胸肌率呈線性升高的趨勢,與李炳霞等[14]的研究結果相似,但不同于曾曉閣等[15]的報道。利用高蛋白日糧促進略陽烏雞胸肌發育,不僅在生產實踐中具有應用價值,可以提高產肉性能,而且在育種中可以實現早期定向選育,從而加快育種進展。
本研究中當日糧蛋白質量分數為16.60%~18.06% 時,血清蛋白質量濃度趨于最大,烏雞的生長也處于最佳狀態。這可能是由于血清蛋白作為機體蛋白質合成和代謝的重要指標,其質量濃度高說明蛋白代謝旺盛,從而可以促進機體生長和提高飼料利用。Malheiros等[16]研究發現,飼喂低蛋白質量分數日糧的肉雞相較于飼喂高蛋白質量分數日糧的肉雞,其血清中T3質量濃度顯著升高,而T4質量濃度顯著降低。在本研究中,日糧蛋白質質量分數顯著影響略陽烏雞血清中T3質量濃度,但未表現出規律性,而T4質量濃度未受到顯著影響,這可能是由于略陽烏雞自身特異性導致的,具體機制有待進一步研究。此外,本研究結果表明日糧蛋白質質量分數對12周齡略陽烏雞多數其他血清生化指標沒有顯著影響,包括血清總蛋白、球蛋白、尿素氮、尿酸、胰島素和T4的質量濃度以及一些酶的活性,表明試驗雞在本研究處理下生理狀況基本正常,也說明本研究的蛋白質質量分數梯度處理是基本合理的。
本研究表明日糧蛋白質量分數對7~12周齡略陽烏雞的生長發育有顯著影響;基于日增量和料質量比為評價指標的二次曲線回歸分析得出,7~12 周齡略陽烏雞適宜蛋白質需要量分別為17.52%和17.18%。