張璐瑤 孫婉 劉娟


摘? 要:為探討金魚(Carassius auratus auratus Linnaeus)、中華大蟾蜍(Bufo gargarizans)、雞(Gallus domesticus)、家鴿(Aplopelia bonaparte)和家兔(Oryctolagus cuniculus)心臟的組織結構與其生境的適應關系,制作了5種動物心臟石蠟組織切片,并采集圖像進行了分析。結果表明:5種動物心臟所占體重百分比以家鴿最高,金魚最小。金魚心肌纖維細長,且分支少,家兔心肌纖維分支多。5種動物心臟結構的差異,與其從水生到兩棲再到陸生的生境遷移變化相適應。
關鍵詞:金魚;中華大蟾蜍;家鴿;心臟;比較組織學
中圖分類號 Q954? ?文獻標識碼 A? ?文章編號 1007-7731(2019)09-0065-3
Abstract:Paraffin tissue sections of hearts of five small animals were prepared to investigate the relationship between the structure of hearts of Carassius auratus auratus Linnaeus,Bufo gargarizans,Gallus domesticus,Aplopelia bonaparte and Oryctolagus cuniculus and their habitats.The results showed that Pigeons had the highest percentage of heart weight and goldfish had the smallest percentage.The myocardial fibers of goldfish are slender and less branched,and the myocardial fibers of rabbits are more branched.The differences of heart structure of five species of animals are adapted to the changes of their habitat migration from aquatic to amphibian to terrestrial.
Key words:Carassius auratus auratus Linnaeus;Bufo gargarizans;Aplopelia bonaparte;Heart;Comparative Histology
心臟是脊椎動物循環(huán)系統(tǒng)中的重要器官,其主要功能是推動血液流動,把血液運行至身體各個部分。目前,關于初生麋鹿、非洲白犀牛、穿山甲等動物的心臟組織結構及其功能的研究已有報道[1-3],而從生物進化與生境角度對多種動物心臟結構進行比較的研究仍較少。石蠟組織切片技術是組織胚胎學、生理病理學以及細胞生物學中一種常用的試驗方法,能夠反映組織細胞的真實狀況[4-5]。本試驗根據(jù)脊椎動物從水生、兩棲到陸生的進化關系,選取金魚、中華大蟾蜍、雞、家鴿和家兔5種動物,制作石蠟組織切片并采集圖像進行比較分析,以期獲得5種動物心臟的組織結構在這一演化過程中的變化規(guī)律,為進一步研究動物心臟組織結構以及進化發(fā)育等相關研究提供科學依據(jù)。
1 材料
1.1 試驗動物 市購健康成年金魚、中華大蟾蜍、雞、家鴿和家兔各10例,不分雌雄。各種動物的基本形態(tài)特征見表1。
1.2 試劑與儀器 蘇木精,由南京奧多福尼生物科技有限公司生產(chǎn);伊紅(Y水溶),由天津市大茂化學試劑廠生產(chǎn);乙醇(分析純),由南京華嘉化學試劑有限公司生產(chǎn);二甲苯(分析純),由廣州迪鑫多科學儀器有限公司生產(chǎn);切片機(2508型),由上海珂淮儀器有限公司生產(chǎn);體式顯微鏡(型號為MOTIC SMZ-140);倒置熒光顯微鏡(型號為徠卡DMI3000B)。
2 方法
2.1 取材 用適量乙醚將動物麻醉后,迅速解剖取出心臟,生理鹽水清洗2~3次,然后用中性甲醛溶液固定約24h。
2.2 石蠟切片制作 將組織于70%乙醇中分別沖洗3次,脫水和透明程序依次為:70%乙醇→80%乙醇→95%乙醇I→95%乙醇II→無水乙醇I→無水乙醇II各歷時1h→無水乙醇∶二甲苯=1∶1→二甲苯I→二甲苯II各歷時40min。浸蠟步驟為蠟杯Ⅰ40min?蠟杯Ⅱ50min?蠟杯Ⅲ1h,然后包埋。用旋轉式切片機把蠟塊切成6μm厚的薄片,50℃烤片30min。脫蠟程序為二甲苯(Ⅰ)和二甲苯(Ⅱ)各15min,二甲苯∶無水乙醇=1∶1為5min。常規(guī)方法復水后磷鎢酸蘇木精染色30min,5%的冰乙酸分色40s后伊紅染色5min。常規(guī)方法脫水透明后制作成永久切片,倒置顯微鏡觀察并采集圖譜。
3 結果與分析
3.1 心臟解剖結構比較 金魚的心臟比較小,約占體重的0.11%,由靜脈竇、心房和心室3個部分構成。在心室的前方有1個膨大的動脈球,是魚類腹大動脈起始部的球狀肥厚部,動脈球肌層厚且向內凸起形成肉嵴(圖1A)。中華大蟾蜍心臟約占體重的0.13%,可分為心室、心房和靜脈竇3部分(圖1B)。心室較小,近似三角形,心室壁厚,向內形成肉柱或肉嵴,可以緩沖由左右心房流進心室內的血。心房由房間隔分為左右2個部分(圖1C)。雞的心臟約為體重的0.44%,家鴿心臟約為體重的0.49%,鳥類心室和心房完全分隔開,左心室腔狹細,壁厚;右心室腔稍大,壁稍薄;左右心房均較小(圖1D和圖1E)。家兔的心臟約為體重的0.43%,分為4個腔,具有主動脈弓,其管腔較大,管壁較厚;靜脈系統(tǒng)趨于簡化(圖1F)。