納米脂肪及其衍生物在抗衰老領域的應用進展

汪正財 李華

[摘要]衰老是指隨著年齡的增長，機體結構和功能出現退行性改變的過程，在皮膚軟組織中主要表現為皮膚質地改變，脂肪萎縮、肌肉體積及彈性改變等。隨著研究的不斷深入，針對皮膚軟組織的抗衰老技術也越來越多。自2013年Tonnard P提出納米脂肪概念并將其應用于改善細紋后，近年來出現了多種納米脂肪衍生物的報道，由于其含有更多高質量的脂肪干細胞及其它活性成分而被迅速應用于臨床。本文通過查閱近年相關文獻，對納米脂肪及其衍生物的制備、成分與其在抗衰老中的臨床應用進行綜述。

[關鍵詞]納米脂肪;乳糜化脂肪;脂肪干細胞膠;抗衰老;年輕化

[中圖分類號]R339.3+8? ? [文獻標志碼]A? ? [文章編號]1008-6455（2019）06-0016-03

Abstract： Aging refers to the process of degenerative changes of structure and function in a body as growing older. The main manifestations of aging in soft tissues were changes in skin texture， atrophy of fat and muscle and elasticity decrease of muscle. Continuous research indicates that anti-aging technology for skin and soft tissue was also increasing. Since Tonnard P introduced the concept of nanofat in 2013 and applied it to improve wrinkles， many kinds of nanofat derivatives had been reported in recent years， which was being rapidly applied to clinic because it contains more high-quality adipose stem cells and other cytokines. In this review， the preparation， composition and clinical application of nanofat and its derivatives in anti-aging area were summarized by consulting related literatures in recent years.

Key words： nanofat; chylous fat; SVF-gel; anti-aging; rejuvenation

衰老是生命體發生發展所經歷的必然過程。皮膚軟組織衰老主要表現為真皮變薄、皺紋形成、皮膚松弛、軟組織容量丟失，其原因主要為皮膚膠原纖維容積減少和結構改變、肌肉與韌帶在骨骼上附著點的松弛，脂肪萎縮等[1]。皮膚軟組織抗衰老方法較多，比如光電治療、手術治療、注射填充治療等，其中自體脂肪移植填充治療因可填補軟組織容量的缺失，促進真皮膠原纖維再生，改善皮膚質地，且具有來源廣泛、取材容易、微創，移植物無免疫排斥反應等特點而被廣泛應用于臨床抗衰老當中[2]。傳統自體脂肪移植由于顆粒脂肪體積較大，注射移植脂肪針頭直徑常為2mm，且注射量不易控制，對于皮膚淺層注射容易出現表面凹凸不平，脂肪顆粒中心壞死及注射區鈣化結節等并發癥[3]，因而限制了其在皮膚淺層的抗衰老應用。

2013年比利時科學家Tonnard P[4]首次將顆粒脂肪通過機械力進行乳糜化，并將乳糜化后的脂肪稱為納米脂肪。納米脂肪提取技術是一種簡單實用的脂肪干細胞提取技術[5]，含有的脂肪來源干細胞具有再生修復能力，且可通過27G細針頭，使皮膚淺層的注射更為精準，一經報道便被迅速應用于臨床。基于對顆粒脂肪的處理方式不同，近年來出現了多種納米脂肪衍生物如“活性納米脂肪”和“SVF-gel”等，由于含有更多的高質量脂肪干細胞及其它活性成分而被應用于臨床抗衰老中，效果良好，在醫學美容行業有巨大的發展前景。

1? 納米脂肪及其衍生物的制備

1.1 納米脂肪的制備：采用直徑為3mm的多孔尖頭吸脂針從腹部或大腿低壓抽吸獲取自體脂肪顆粒[6]，將其經過生理鹽水漂洗后在孔徑為0.5mm無菌尼龍濾網上過濾，收集過濾后的顆粒脂肪至10ml螺口注射器內，另一10ml螺口注射器通過魯爾連接器與其相連，反復推擠30次進行乳化，此時可見黃色顆粒脂肪變成黃白色懸液。將乳化后的懸液再經孔徑為0.5mm的尼龍濾網過濾，所得到的乳糜狀懸液即為納米脂肪[4]。

1.2 納米脂肪衍生物的制備：BI[7]認為顆粒脂肪相互推擠的機械力會破壞大量脂肪細胞與基質干細胞的活性，加劇細胞的炎癥反應與凋亡過程。因此他探索出一種既可減小注射體積也可保持細胞活性的方法。具體為顆粒脂肪經低濃度的Ⅰ型膠原酶消化15min，以330g離心力離心7min，取上層經0.6mm細胞篩過濾，并將過濾后所獲得的細胞成分稱為“活性納米脂肪”。

魯峰團隊[8]受納米脂肪啟發，研發出了“SVF-gel”，也稱脂肪干細胞膠，具體做法為將顆粒脂肪以1 200g離心力離心3min，取中層脂肪置入兩個通過魯爾連接器相連接的10ml注射器中，以10ml/s的速率，機械互推1min后獲得乳糜化脂肪，經Tulip公司的Nano Transfer過濾器過濾（過濾的孔徑不大于0.2mm），再以2 000g離心力離心3min，去除上層油脂與下層少量的腫脹液，剩余部分即為“脂肪干細胞膠”。

2? 納米脂肪及其衍生物的成分

多項研究表明，納米脂肪除了含有細胞外基質與豐富的基質血管片段（stromal vascular fraction， SVF）細胞如脂肪來源干細胞外[9-11]，還包含大量的生物活性因子，如血管內皮生長因子、肝細胞生長因子、堿性成纖維細胞生長因子、血小板源性生長因子和轉化生長因子β等，這些活性因子與脂肪干細胞共同參與組織修復與再生[12-13]。相比納米脂肪，活性納米脂肪含有更多比例的脂肪干細胞、活性SVF細胞，且還含有小體積的脂肪細胞。而脂肪干細胞膠則含有更多高質量的脂肪干細胞和細胞外基質，這些細胞成分在組織充填與再生修復過程中具有重要作用。

3? 納米脂肪及其衍生物在抗衰老中的應用

自Tonnard P首次將納米脂肪應用于臨床抗衰老以來，有關納米脂肪及其衍生物的抗衰老應用研究逐漸增加，包括改善皮膚質地、減輕皺紋、改善色素沉著和面部凹陷。

3.1 納米脂肪的抗衰老作用

3.1.1 改善皮膚質地，減輕皺紋：有研究表明納米脂肪中包含的脂肪干細胞比例可達（18.77±6.2）%[14]，脂肪干細胞可通過刺激人真皮成纖維細胞合成膠原纖維、減少紫外線介導的細胞凋亡來達到抗皺的效果[15]。動物實驗也表明納米脂肪注射可促進皮膚新生血管網的生成、細胞外基質的分泌和膠原的合成，增加真皮層的厚度[16-18]。臨床研究證實納米脂肪淺層注射可有效改善局部的表淺細紋如口周與胸前細紋，術后4個月細紋變淺，患者對治療效果滿意[4，14]。梁志生[19]將納米脂肪注射到面部表淺皺紋區域的真皮深層，觀察到注射區域皮膚質地和色澤均得到了明顯的改善，他在臨床應用中發現，最佳的改善效果出現在術后2～6個月。Liang[20]等將納米脂肪與富含血小板纖維蛋白混合后注射到人體真皮內，隨訪2年發現皮膚質地明顯改善，皺紋減少，皮膚彈性及濕度增加，毛孔變小，斑點變淡，這些改善效果可能與納米脂肪中干細胞旁分泌各類細胞活性因子，促進組織修復再生有關。

3.1.2 改善色素沉著：體外試驗表明脂肪干細胞可通過下調絡氨酸酶與絡氨酸酶關聯蛋白1的表達來抑制黑色素的合成而使皮膚變白[21]。多項臨床研究證實了納米脂肪改善色素沉著的有效性。Mailey[22]曾報道將SVF與顆粒脂肪1：1混合移植可改善皮膚色素沉著，主要是由于其所包含的細胞成分及活性因子具有抗氧化作用，可抑制黑色素的形成、介導色素的分布與黑色素的轉運，有利于減輕色素沉著[23]。Jan[24]將未過濾的納米脂肪應用于改善燒傷后的色素沉著，術后6個月肉眼觀察與圖像掃描結果均顯示色素沉著明顯淡化。Oh[25]應用納米脂肪治療下瞼皮膚色素沉著19例，隨訪2～4個月發現所有患者的色素沉著均有明顯改善，術后僅有輕度的瘀斑及腫脹，無任何其它并發癥。梁志生研究發現納米脂肪能夠淡化眼周的色素沉著，但治療過程中可能會出現1.5～2.0d的紅斑期[19]，這與Tonnard P[4]的報道一致，他們認為這可能與軟組織修復更新有關。

3.1.3 改善面部凹陷：納米脂肪本身無明顯體積充填作用，但其混合結構性脂肪顆粒移植，可獲得生物填充劑更好、更安全的治療效果。Yu[26]將人的顆粒脂肪混合或不混合納米脂肪移植到的小鼠體內，12周后發現混合有納米脂肪的顆粒脂肪移植小鼠，其脂肪體積、重量、移植區血管的密度等均明顯大于單純的顆粒脂肪移植組。Wei[27]對比傳統自體顆粒脂肪移植與納米脂肪結合富含血小板纖維蛋白輔助自體顆粒脂肪移植治療面部軟組織凹陷，隨訪24個月發現相比于傳統移植組，納米脂肪輔助移植組脂肪體積保留率更高，對于面部凹陷改善效果更顯著，且具有更低的再次手術率及更高的滿意度。這些研究表明納米脂肪可以促進移植區的血管化及顆粒脂肪的存活，減少脂肪移植后的吸收，有利于面部凹陷的改善。

3.1.4 促進毛發再生，延緩脫發進程：Festa[28]研究表明脂肪干細胞可激活毛囊干細胞促進毛囊及毛發再生，臨床研究也證實脂肪干細胞可促進毛發再生過程。Anderi[29]將斑禿患者的脂肪干細胞提取出來后自體注射移植到頭皮，隨訪6個月后發現相比于未治療區，經脂肪干細胞注射的區域毛發密度更高，毛發直徑更大，毛囊更穩固，不易脫落。而納米脂肪含有豐富的脂肪干細胞，提示納米脂肪可能對毛發再生具有積極作用，雖然已有研究證實脂肪移植可促進脫落的眉毛再生[30]，也可改善由硬皮病導致的脫發[31]，但納米脂肪移植對于毛發的作用仍需要更多的研究證實。

3.2 納米脂肪衍生物抗衰老應用

3.2.1 脂肪干細胞膠：脂肪干細胞膠含有高濃度的活性脂肪干細胞與完整的細胞外基質，不僅具有成脂能力，且其脂肪遠期保留率大于80%。陳信愷[32]等對比了脂肪干細胞膠與傳統的Coleman脂肪移植對于面部容量填充的治療效果，發現相比于傳統的脂肪移植，脂肪干細胞膠能獲得更長期穩定的填充效果，術后術區腫脹程度更輕，二次手術率較低且病人滿意度更高。姚堯[33]將脂肪干細胞膠通過27g針頭皮內注射治療頸部皺紋及下瞼皮膚色素沉著，臨床觀察發現治療效果于術后2～3周逐漸顯現，2～3個月效果最佳。雖然脂肪干細胞膠臨床治療效果穩定良好，但其產量小于15%，對于BMI不高的患者，難以獲取足夠的脂肪來制備脂肪干細胞膠，因此更適合用于精細填充[32]。

3.2.2 活性納米脂肪：Bi[7]將活性納米脂肪注射治療頸紋，術后6個月頸紋明顯變淺，效果穩定;他還通過體內試驗證實“活性納米脂肪”成脂能力比納米脂肪要強，這有利于活性納米脂肪移植對面部凹陷的改善。雖然活性納米脂肪的細胞活性、成脂能力及臨床治療效果均較為理想，但由于其體外制備過程加入了外來蛋白質（Ⅰ型膠原酶），即使濃度較低，消化時間較短，仍然存在生物污染的風險，其臨床應用的安全性還有待驗證。

4? 小結與展望

真皮膠原纖維減少與軟組織容量的丟失是皮膚軟組織衰老的重要原因之一，而納米脂肪及其衍生物作為一類富含脂肪干細胞的混合物，可刺激真皮膠原增生，促進皮膚軟組織修復再生，填充缺損，恢復體積，可有效改善衰老引起的皮膚軟組織改變，具有創傷小、恢復快、效果確切等優點。但由于納米脂肪無明顯的體積填充能力，對于面部凹陷患者，不適合單獨應用納米脂肪，需要混合顆粒脂肪移植才能取得滿意效果;而脂肪干細胞膠產量較低，活性納米脂肪存在生物安全風險，因此它們在抗衰老領域應用較為局限。相信隨著基礎研究與臨床研究的不斷深入，納米脂肪及其衍生物將會在抗衰老領域發揮更重要的作用。

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[收稿日期]2019-03-12

本文引用格式：汪正財，李華.納米脂肪及其衍生物在抗衰老領域的應用進展[J].中國美容醫學，2019，28（6）：16-19.