蝦蛄肌原纖維蛋白磷酸化工藝及其在蝦蛄肉制品中的應用

尚 坤,陳金玉,張坤生,任云霞,張 典,吳 鵬

(天津商業大學生物技術與食品科學學院,天津市食品生物技術重點實驗室,天津 300134)

蝦蛄(Mantis shrimp),又稱為皮皮蝦、蝦爬子、螳螂蝦等,在我國各沿海地區分布廣泛,以黃海、渤海產量最大[1]。蝦蛄營養價值極高,除富含蛋白質外,還含有大量的磷、鈣、鎂等微量元素,其藥用價值也非常可觀[2-4]。肌原纖維蛋白(Myofibrillar protein,MP)是組成肌肉中肌原纖維的蛋白質,是一類具有重要生物學功能的鹽溶性蛋白,主要由肌球蛋白、肌動蛋白和少量調節性結構蛋白等組成的蛋白質群,其結構和性質與肉制品的嫩度、口感及彈性、保水性等密切相關[5-6]。

大量研究表明,磷酸化可以有效改善蛋白質的功能特性[7-9],常見的磷酸化試劑有三聚磷酸鈉(STP)、三偏磷酸鈉(STMP)、三氯氧磷(POCl3)、焦磷酸鈉(SPP)等,其中STP和STMP是FDA允許的食品添加劑[10]。磷酸鹽通過提供無機磷和蛋白質基團特定氨基酸分子的氧原子或氮原子發生酯化反應,但不同的磷酸鹽與蛋白質反應的部位、反應途徑、反應產物等也會有所不同[11]。Xiong等[12]研究表明多聚磷酸鹽可引起肌原纖維蛋白結構的變化,且不同磷酸鹽對蛋白質溶解度也存在差異,說明磷酸鹽的種類會影響蛋白質的性質。目前關于單一磷酸鹽對蝦蛄肌原纖維蛋白磷酸化修飾并探究其性質的研究較多[13-15],但采用STP、SPP、STMP三種不同的多聚磷酸鹽分別對肌原纖維蛋白進行磷酸化改性,并以復合磷酸鹽的形式加入蝦蛄肉制品中的研究尚未見報道。

本文分別采用STP、SPP、STMP對蝦蛄肌原纖維蛋白進行磷酸化修飾,研究單一磷酸鹽在不同反應pH、磷酸鹽添加量、反應時間條件下對磷酸化程度的影響,利用響應面法對蝦蛄肌原纖維蛋白磷酸化的工藝條件進行系統優化,探究最佳工藝條件及復合磷酸鹽對新型果蔬蝦餅品質的影響,旨在為多聚磷酸鹽在水產品中的應用研究,以及為提高蝦蛄的營養價值和商業價值提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

鮮活的蝦蛄 購于天津市南開區王頂堤批發市場,-80 ℃冷藏,實驗前取出,在4 ℃條件下解凍;新鮮胡蘿卜、山藥、檸檬 購于天津市華潤萬家超市。牛血清蛋白(Bovine serum albumin,BSA) 美國Sigma公司;三聚磷酸鈉 天津市光復精細化工研究所;焦磷酸鈉 天津市福晨化學試劑廠;三偏磷酸鈉 上海源葉生物科技有限公司;其它試劑均為分析純；胡椒粉、玉米淀粉、卡拉膠、食鹽、白糖、雞蛋、料酒、抗壞血酸 購于天津市華潤萬家超市，以上均為食品級。

AvantiJ-E高效離心機 美國BECKMAN COULTER公司;IKA T10高速組織勻漿機 德國IKA公司;EL20實驗室pH計 梅特勒—托利多儀器有限公司;EMS-9A加熱磁力攪拌器 天津歐諾儀器儀表有限公司;U-5100比例雙光束分光光度計 日立高新技術公司;TA.XT plus物性測試儀 英國Stable Micro Systems公司;Hunter Lab色差儀 美國Hunter Lab公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 肌原纖維蛋白的提取 參照袁程程等[16]的方法。將-80 ℃凍藏的蝦蛄在4 ℃條件下解凍24 h。將蝦蛄去頭、尾,剔除蝦線、外殼,取肉,并揉捏至糜狀后稱重,加入4倍體積的蛋白提取液(0.1 mol/L NaCl、0.002 mol/L MgCl2、0.001 mol/L EDTA-2Na、0.1 mol/L NaH2PO4/Na2HPO4,pH=7),高速勻漿30 s,在4 ℃、5000 r/min的高速冷凍離心機離心15 min后,留沉淀,重復上述操作3次,即得粗蛋白。將粗蛋白稱重,再加入4倍體積0.1 mol/L NaCl,高速勻漿30 s,重復上述3次,留沉淀,即得肌原纖維蛋白。

1.2.2 磷酸化肌原纖維蛋白的制備 參照王詩萌等[13]的方法并加以改進。按照單因素實驗設計,將1.2.1提取的肌原纖維蛋白濃度調整至質量濃度為2%,加入一定量的STP、SPP、STMP,在10000 r/min下勻漿20 s,以0.1 mol/L HCl或1 mol/L NaOH溶液調節到一定的pH,并在室溫下用磁力攪拌器攪拌反應一定時間。反應結束后在4 ℃條件下透析24 h,即得磷酸化肌原纖維蛋白。

1.2.3 單因素實驗

1.2.3.1 反應pH對磷酸化程度的影響 STP、SPP、STMP添加量均為2%,反應時間均為2 h,反應pH均為7.0、7.5、8.0、8.5、9.0[15],考察反應pH對蝦蛄肌原纖維蛋白磷酸化程度的影響。

1.2.3.2 磷酸鹽添加量對磷酸化程度的影響 STP、SPP、STMP樣品組反應pH分別為8.0、7.5、8.0,反應時間均為2 h,STP、SPP、STMP添加量均為1%、2%、3%、4%、5%,考察磷酸鹽添加量對蝦蛄肌原纖維蛋白磷酸化程度的影響。

1.2.3.3 反應時間對磷酸化程度的影響 STP、SPP、STMP樣品組反應pH分別為8.0、7.5、8.0,STP、SPP、STMP添加量分別為4%、2%、4%,反應時間均為1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h,考察反應時間對蝦蛄肌原纖維蛋白磷酸化程度的影響。

1.2.4 響應面優化實驗 為了分析三個因素間的交互作用,使磷酸鹽對肌原纖維蛋白的磷酸化程度達到最佳。在單因素實驗基礎上,設計STP、SPP、STMP響應面實驗因素水平表見表1～表3。選取反應pH、磷酸鹽添加量、反應時間共3個對磷酸化工藝影響顯著的因子,進行三因素三水平組合實驗。

表1 STP響應面實驗因素水平Table 1 Factors and levels of STP response surface experiment

表2 SPP響應面實驗因素水平Table 2 Factors and levels of SPP response surface experiment

表3 STMP響應面實驗因素水平Table 3 Factors and levels of STMP response surface experiment

1.2.5 蛋白質標準曲線與磷酸根標準曲線 采用雙縮脲法[17]和鉬藍比色法[18]分別進行標準曲線繪制。以X為蛋白質質量(mg),Y為吸光度值,得到蛋白質標準曲線方程:Y=0.0478X+0.0067,R2=0.9998;以X為磷酸根標準液質量濃度,Y為吸光度值,得到磷酸根標準方程:Y=7.1734X+0.023,R2=0.9997。由于R2值非常接近于1,表明兩者分別與吸光度的線性關系較好。

1.2.6 蛋白質質量濃度和磷酸化程度的測定 根據1.2.5方法測定蛋白濃度。每個樣品做3次平行,取平均值,得到肌原纖維蛋白質量濃度為5.45%。將1.2.2的蛋白溶液,均等分成兩份,其中一份按1.2.5方法直接測定磷酸根的含量;另一份蛋白溶液中加入等體積10%三氯乙酸,在4 ℃、3000 r/min離心10 min,留上清液,測定上清液中磷酸根含量。按公式(1)計算肌原纖維蛋白的含磷酸根量。磷酸化程度用每克蛋白含磷酸根量表示。

含磷酸根量(mg/g)=[總磷酸根量(mg)-上清液磷酸根量(mg)]/肌原纖維蛋白質量(g)

式(1)

1.2.7 新型果蔬蝦餅的制備 新鮮的胡蘿卜和山藥分別洗凈,去皮切段,蒸30 min,待冷卻后斬拌成泥,備用;檸檬取汁,現取現用;取1.2.1中處理好的蝦蛄肉稱重,以蝦肉質量為基準,加入0.3%[19]的不同比例復合磷酸鹽(經實驗確定STP∶SPP∶STMP的比例為2∶1∶2,在此基礎上設計4組不同比例的復合磷酸鹽,分別為對照組、1∶1∶1、1∶2∶2、2∶2∶1)、2%食鹽、8%料酒混合均勻后在4 ℃條件下腌制2 h(根據響應面結果和實際可操作性,未調節pH),再加入15%胡蘿卜泥、10%山藥泥、1.5%檸檬汁、0.8%胡椒粉、3%卡拉膠、20%玉米淀粉、2%白糖、3%蛋清、0.02%抗壞血酸,斬拌成糜狀后,均勻地鋪在直徑為15 cm圓盤上,厚度為2 cm,并用保鮮膜密封,放入蒸鍋中蒸20 min后,冷卻。

1.2.8 新型果蔬蝦餅相關指標的測定

1.2.8.1 蒸煮損失的測定 根據公式(2),計算蝦餅的蒸煮損失。式中m1為蒸前質量,m2為蒸后質量。

式(2)

1.2.8.2 抗壞血酸含量的測定 依據GB 5009.86-2016《食品安全國家標準 食品中抗壞血酸的測定》[20]中的2,6-二氯靛酚法測定蒸后的蝦餅中抗壞血酸的含量。

1.2.8.3 質構的測定 將1.2.7中蒸后的蝦餅切成4 cm×4 cm×2 cm的塊狀用于質構性質測定。質構分析探頭類型:P 50,測試參數:測前速率為2.00 mm/s,測試速率為2.00 mm/s,測后速率為1.00 mm/s,壓縮比為50%[21]。測定硬度、彈性、回復性、黏聚性和咀嚼度5個指標,每組測定3次,取平均值。

1.2.8.4 色差的測定 將1.2.7中蒸后的蝦餅切成3 cm×3 cm×2 cm的塊狀用于色差的測定。采用全自動色差測定儀對L*、a*、b*測定[22],其中L*表示亮度值,a*表示顏色的紅度值,b*表示顏色的黃度值,每組樣品做3 次平行,取平均值。

1.3 數據處理

通過Design Expert 8.0軟件設計響應面分析,采用Excel 2007、Origin 9.0進行繪圖,并通過SPSS 16.0對實驗數據進行顯著性檢驗。

2 結果與分析

2.1 單因素實驗結果

2.1.1 反應pH對磷酸化程度的影響 由圖1可知,隨著pH的增大,STP、SPP和STMP作用下的蝦蛄肌原纖維蛋白磷酸化程度均呈先上升后下降的趨勢。當反應pH為8.0時,STP和STMP磷酸化程度最大;當反應pH為7.5時,SPP磷酸化效果最好。這可能是由于磷酸鹽在較低pH下不穩定,易分解形成活性較低的物質[23],不利于磷酸化的進行。隨著pH增加,蛋白氨基酸側鏈的活性基團氨基和羧基活性逐漸增強,因此有利于蛋白質與磷酸根的結合,研究表明STP、SPP和STMP可分別與賴氨酸、絲氨酸和酪氨酸、絲氨酸等氨基酸殘基發生共價結合[24]。pH過高,蛋白質易發生變性,從而降低了與磷酸根的結合能力,使磷酸化程度下降。三種磷酸鹽的活性不同,與蛋白質結合能力不同,其磷酸化程度也有所不同。因此,選擇8.0作為STP和STMP最適反應pH,選擇7.5作為SPP最適反應pH。

圖1 反應pH對磷酸化程度的影響

2.1.2 磷酸鹽添加量對磷酸化程度的影響 由圖2可知,隨著磷酸鹽添加量的增加,肌原纖維蛋白的磷酸化程度均呈先增大后降低的趨勢,其原因可能是,隨著磷酸鹽的添加,磷酸根不斷與蛋白質特定位點上的氨基酸殘基結合,從而提高磷酸化程度;當二者的共價結合反應達到飽和時,磷酸化程度達到最大值;繼續增加磷酸鹽,蛋白質之間靜電斥力加大,阻礙磷酸根與氨基酸殘基結合,從而導致磷酸化程度降低[25]。當STP、STMP的添加量為4%,磷酸化程度達到最大,與周景麗等[15]采用STP磷酸化蝦蛄鹽溶蛋白的結論一致。當SPP的添加量為2%,磷酸化程度達到最大。因此,可確定STP和STMP最佳添加量均為4%,SPP最佳添加量為2%。

圖2 磷酸鹽添加量對磷酸化程度的影響

2.1.3 反應時間對磷酸化程度的影響 由圖3可知,隨著時間的延長,三種磷酸鹽對蝦蛄肌原纖維蛋白的磷酸化程度均呈先增大后降低的趨勢,當STP、SPP反應時間為2.0 h,其磷酸化程度達到最大;當STMP反應時間為2.5 h,其磷酸化程度達到最大。其原因可能是,隨著反應時間延長,磷酸根能充分地與氨基酸殘基結合,磷酸化程度逐漸增加;但反應時間過長,可能會導致蛋白質變性,從而使磷酸化程度下降。因此,選擇2.0 h為STP、SPP最佳反應時間,選擇2.5 h為STMP最佳反應時間。

圖3 反應時間對磷酸化程度的影響

2.2 響應面優化磷酸化蝦蛄肌原纖維蛋白

2.2.1 建立回歸模型 采用Design Expert 8.0.6軟件進行響應面設計,根據Box-Behnken原理,選取反應pH、磷酸鹽添加量及反應時間為自變量,以磷酸化程度為響應值,設計三因素三水平的響應面分析實驗,見表4。每組樣品做3次平行,取平均值。

表4 響應面實驗設計與結果Table 4 Design and results of response surface experiment

表5 響應面方差分析結果Table 5 Analysis results of response surface variance

2.2.2.1 兩因子間交互作用分析 圖4～圖6表示由反應pH、STP添加量、反應時間三個因素交互作用下得到的響應值構成的三維空間曲面。圖4可知,蝦蛄肌原纖維蛋白的磷酸化程度隨反應pH和STP添加量的增加呈先增加后降低的趨勢,反應pH對磷酸化程度的曲線較為陡峭,說明反應pH對磷酸化程度的影響小于STP添加量。圖5可知,隨反應pH增加和反應時間的延長,蝦蛄肌原纖維蛋白的磷酸化程度呈先增大后減小。根據其等高線呈圓形可知反應pH與反應時間的交互作用不顯著。圖6可知,磷酸化程度隨STP添加量的增加先增大后減小,隨反應時間的延長先增大后趨于平緩。根據其等高線呈橢圓形可知STP添加量與反應時間的交互作用顯著,說明兩者協同可改善磷酸化程度。

圖4 反應pH和STP添加量的響應面分析圖

圖5 反應pH和反應時間的響應面分析圖

圖6 STP添加量和反應時間的響應面分析圖

2.2.2.2 最佳條件的預測及驗證實驗 通過回歸模型的預測,得到STP磷酸化蝦蛄肌原纖維蛋白的最佳工藝參數為:反應pH8.02,STP添加量4.27%,反應時間1.98 h,此時磷酸化程度的理論值最大為101.47 mg/g。結合實際生產,將各因素進行調整為:反應pH為8.0,STP添加量為4%,反應時間為2.0 h。在此條件下進行3次平行驗證實驗,得到磷酸化程度的平均值為102.87 mg/g,僅有1.38%誤差,證實了該模型的有效性。

2.2.3 SPP磷酸化模型分析 由表6可知,回歸模型極顯著(p<0.0001),失擬項p=0.2139>0.05不顯著,R2=0.9858,RAdj=0.9676,說明該模型擬合度較好。方差分析結果表明,B、C、A2、B2和C2為極顯著項(p<0.01),A、AB、AC和BC項差異不顯著(p>0.05)。由方差分析結果可知,3個因素對磷酸化程度的影響主次順序為:B(SPP添加量)>C(反應時間)>A(反應pH)。

表6 響應面方差分析結果Table 6 Analysis results of response surface variance

2.2.3.1 兩因子間交互作用分析 圖7～圖9表示由反應pH、SPP添加量、反應時間三個因素交互作用下得到的響應值構成的三維空間曲面。由圖7可知,蝦蛄肌原纖維蛋白的磷酸化程度隨反應pH的增大先增加后降低,隨著SPP添加量的增加先平緩上升后下降。由圖8可知,蝦蛄肌原纖維蛋白的磷酸化程度隨反應pH和反應時間的增加均呈先增加后降低的趨勢。由圖9可知,蝦蛄肌原纖維蛋白的磷酸化程度隨SPP添加量和反應時間的增加均先增大后減小,其響應面的坡度非常陡峭,表明磷酸化程度對于SPP添加量和反應時間的改變非常敏感。

圖7 反應pH和SPP添加量的響應面分析圖

圖8 反應pH和反應時間的響應面分析圖

圖9 SPP添加量和反應時間的響應面分析圖

2.2.3.2 最佳條件的預測及驗證實驗 為驗證響應面實驗的可靠性,對響應面得到的最佳工藝參數:反應pH7.48,SPP添加量2.28%,反應時間2.08 h進行驗證。考慮到實驗的實際可操作性,將工藝參數中的反應pH修正為7.5,SPP添加量為2%,反應時間為2.0 h,所得磷酸化程度的平均值為96.41 mg/g,與預測值96.07 mg/g相比,誤差僅為0.66%,說明采用響應面法優化肌原纖維蛋白磷酸化工藝條件是可行的。

2.2.4 STMP磷酸化模型分析 由表7可知,回歸模型極顯著(p<0.0001),失擬項不顯著(p=0.2626>0.05),R2=0.9827,RAdj=0.9604,說明模型可用于實際值的預測,實驗方法可靠。由表7的方差分析表明,因素C對磷酸化程度的影響顯著(p<0.05),因素A、B、A2、B2、C2對磷酸化程度的影響極顯著(p<0.01),因素AB、AC、BC對磷酸化程度的影響不顯著(p>0.05)。由方差分析結果表明,各因素對磷酸化程度影響的主次順序:B(STMP添加量)>A(反應pH)>C(反應時間)。

表7 響應面方差分析結果Table 7 Analysis results of response surface variance

2.2.4.1 兩因子間交互作用分析 圖10～圖12表示由反應pH、STMP添加量、反應時間三個因素交互作用下得到的響應值構成的三維空間曲面。由圖10可知,蝦蛄肌原纖維蛋白的磷酸化程度隨反應pH增大先增加后降低,隨STMP添加量的增加先平緩增加后降低,其響應面坡度相對平緩,表明STMP添加量對磷酸化程度的影響較小。由圖11可知,蝦蛄肌原纖維蛋白的磷酸化程度隨反應pH和反應時間的增加均先增加后降低。由圖12可知,蝦蛄肌原纖維蛋白的磷酸化程度隨STMP添加量和反應時間的增加均先增大后減小。

圖10 反應pH和STMP添加量的響應面分析圖

圖11 反應pH和反應時間的響應面分析圖

圖12 STMP添加量和反應時間的響應面分析

2.2.4.2 最佳條件的預測及驗證實驗 通過響應面實驗得到最佳的磷酸化條件,即反應pH8.05,STMP添加量4.42%,反應時間2.55 h,其磷酸化程度可達到77.68 mg/g。根據實驗的實際可操作性,選擇反應pH為8.0,STMP添加量為4%,反應時間為2.5 h,所得磷酸化程度的平均值為76.53 mg/g,誤差為1.48%,說明響應面優化法能夠很好地擬合肌原纖維蛋白磷酸化條件與磷酸化程度之間的關系。

2.3 復合磷酸鹽對新型果蔬蝦餅品質的影響

2.3.1 不同比例復合磷酸鹽對蒸煮損失和抗壞血酸含量的影響 由圖13可知,對照組的蒸煮損失明顯高于其他處理組(p<0.05),與Keenana等[26]結論一致。可能是由于磷酸鹽的添加增加了肌原纖維蛋白之間的靜電斥力,使蛋白質多肽展開促進水合作用及各化學鍵的形成,此外蛋白交聯形成的三維網狀結構可以鎖住更多的水分,減少水分流失,因而蒸煮損失較低;當復合磷酸鹽比例為2∶1∶2時,蒸煮損失最低。對照組的抗壞血酸量顯著低于其他處理組(p<0.05),添加的復合磷酸鹽比例為2∶1∶2時,蝦餅的抗壞血酸量最高。抗壞血酸在高溫下極不穩定,易受到某些金屬離子的影響,磷酸鹽具有金屬離子螯合能力,使得Mg2+、Ca2+等離子無法參與氧化反應,從而抑制抗壞血酸的分解,提高其穩定性[27]。

圖13 不同比例復合磷酸鹽對蝦餅蒸煮損失和抗壞血酸量的影響

表8 不同比例復合磷酸鹽對蝦餅質構的影響Table 8 Effect of different proportions of compound phosphate on texture properties of shrimp pies

2.3.2 不同比例復合磷酸鹽對質構的影響 由表8可知,硬度方面,加入磷酸鹽的處理組均顯著(p<0.05)高于未加磷酸鹽的對照組,比例為1∶1∶1組除外,當復合磷酸鹽的比例為2∶1∶2時，硬度達到最大;彈性方面,5組之間差異不顯著(p>0.05),但加入磷酸鹽后,蝦餅彈性均有提高,且復合磷酸鹽的比例為2∶1∶2時彈性達到最大;回復性方面,加入磷酸鹽的處理組與對照組之間差異顯著(p<0.05),當復合磷酸鹽的比例為2∶1∶2時，回復性達到最小;粘聚性方面,加入磷酸鹽處理組的粘聚性均低于對照組，但差異不顯著(p>0.05);咀嚼度方面,加入磷酸鹽處理組的咀嚼度顯著高于對照組(p<0.05),比例為1∶1∶1組除外，當復合磷酸鹽比例為2∶1∶2時，咀嚼度達到最大。綜合來看,磷酸鹽的加入能顯著提高蝦餅的質構特性,其原因是磷酸鹽的加入改變體系的pH及離子強度,使大分子的電荷分布發生變化,有利于形成穩定的網絡結構,且磷酸鹽能將肌原纖維蛋白解離成單體,增加親水基團從而使蛋白質溶解度增大,有利于蛋白質分子間的相互作用和交聯,從而改善蝦餅的品質[28];對比4組磷酸鹽處理組,最優復合磷酸鹽比例為2∶1∶2。

2.3.3 不同比例復合磷酸鹽對色差的影響 色差的評定在肉制品中占重要地位,直接影響到產品質量的好壞及消費者的購買力。由圖14可知,L*值方面,添加1∶1∶1復合磷酸鹽處理組與對照組、其他處理組之間均有顯著差異(p<0.05);a*方面,添加2∶2∶1復合磷酸鹽處理組與對照組之間有顯著差異(p<0.05),與其他處理組均無顯著差異,可能是由于磷酸鹽破壞了蛋白質的結構,從而影響蝦餅的光學性質,改變了蝦餅的透光率和折光性,紅度值略有變化;b*方面,5組均無顯著變化(p>0.05)。綜合來看,復合磷酸鹽對蝦餅色差的影響不大。

圖14 不同比例復合磷酸鹽對蝦餅色差的影響

3 結論

不同磷酸鹽對蝦蛄肌原纖維蛋白進行磷酸化改性時,其最佳工藝條件有所差異。通過響應面實驗得到STP磷酸化蝦蛄肌原纖維蛋白的最佳工藝參數:反應pH為8.0,STP添加量為4%,反應時間為2.0 h,在此條件下磷酸化程度為102.87 mg/g,與理論預測值僅有1.38%誤差;SPP磷酸化蝦蛄肌原纖維蛋白的最佳工藝參數:反應pH為7.5,SPP添加量為2%,反應時間為2.0 h,所得肌原纖維蛋白磷酸化程度為96.41 mg/g,誤差僅為0.66%;STMP磷酸化蝦蛄肌原纖維蛋白的最佳工藝參數:pH為8.0,STMP添加量為4%,反應時間為2.5 h,在此條件下所得磷酸化程度為76.53 mg/g,與預測值誤差為1.48%,所得模型具有較好的擬合度,優化結果可靠。在此基礎上,將三種磷酸鹽以不同的復合比例應用到蝦蛄制品中,探究磷酸鹽對實際加工肉制品品質的影響,結果表明:復合磷酸鹽可顯著降低蝦餅的蒸煮損失和在加工過程中抗壞血酸含量的損失(p<0.05),并提高其質構特性,但對色差影響不大;當STP∶SPP∶STMP比例為2∶1∶2時,蝦餅品質最好。