常見抗病毒中藥微量元素的測定

丁 航，薛 雨，楊 勤，馬衛(wèi)列，李彩虹，張志珍*

(1.廣東醫(yī)科大學 生物化學與分子生物學教研室，廣東 東莞 523808；2.湛江市質(zhì)量計量監(jiān)督檢測所，廣東 湛江 524000)

近年來，不斷暴發(fā)流行由病毒引起的傳染病，病毒性疾病給人們的健康造成了極大的威脅。而目前臨床上用于治療流感病毒感染的藥物，存在耐藥性、神經(jīng)毒性以及胃腸道毒副作用等缺陷，急需發(fā)展新型抗流感病毒藥物，以解決目前面臨的流感防治問題。我國研究和使用中藥的歷史悠久，用中藥治療流感,因其藥源豐富、價格低廉、治病效果好、使用安全而受到廣大人民群眾的信賴,并越來越被國際社會所接受，逐漸成為研究的熱點。對中藥的研究除了其有機成分外,微量元素所起的作用也日益受到人們的重視。越來越多的學者認為,中藥中微量元素與其功效存在著一種必然聯(lián)系[1],它們在功效中占的地位不容低估。

甘草始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品。文獻報道，甘草具有抗菌、抗病毒、抗癌等多種活性[2]。魚腥草為三白草科蕺菜屬植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的全草，主要含有揮發(fā)油、黃酮、生物堿、多糖、有機酸類等活性成分，具有抗菌、抗病毒、增強機體免疫力、抗炎、抗腫瘤、抗過敏、平喘等功效[3]。金銀花為忍冬科植物忍冬Lonicera japonica的干燥花蕾。治療各種瘟疫癰腫病證，未見有毒副作用和耐藥性，能與其他西藥抗菌素藥物結(jié)合使用。近年來國內(nèi)外學者運用現(xiàn)代理論，從科學的角度證實了金銀花具有抗流感病毒的作用[4-5]。穿心蓮Andrographis paniculata(Burm. f.) Nees為爵床科穿心蓮屬植物，性味苦寒，有清熱燥濕、瀉火解毒功效，被譽為“天然抗素”。具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤等藥理作用而備受關注[6]。本研究將采用微波消解-ICP-MS 技術測定甘草、魚腥草、金銀花、穿心蓮這4種常見抗病毒中藥材的微量元素，從不同的角度和層次為這4種中藥的開發(fā)和利用提供科學依據(jù)和理論基礎。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

甘草、魚腥草、金銀花、穿心蓮購自湛江市區(qū)中藥材店。實驗用的優(yōu)級純硝酸購自廣州化學試劑廠，實驗用水為超純水。鋅、錳、銅、鐵等元素標準溶液均為光譜純,由國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究院總院和國家有色金屬及電子材料分析中心提供。

Thermo scientific X-sereies 2四級桿電感耦合等離子體質(zhì)譜儀；Milestone ETHOS ONE微波消解儀；METTLER TOLEDO XS205分析天平；Sartorins N-EVP111純凈水發(fā)生器。

1.2 樣品制備

原藥樣品：把甘草、魚腥草、金銀花、穿心蓮用去離子水清洗干凈并烘干，將藥材碎成粉末。

1.3 測定前樣品的處理

稱取樣品粉末1.0 g(精確至0.001 g)放在微波消解罐中，加入10 mL濃硝酸，加蓋并旋緊管蓋放置過夜，按照微波消解儀標準操作步驟進行消解。冷卻以后取出，緩慢打開蓋排氣，用少量水沖洗內(nèi)蓋，將微波消解管放在控溫加熱板上100℃加熱30 min，冷卻用水定容至50 mL，混勻備用，同時做空白試驗。

1.4 微波消解儀的工作條件

5 min內(nèi)800 W功率下升到100℃，恒溫5 min，然后5 min內(nèi)1000 W功率下，升到150℃，恒溫10 min，最后5 min內(nèi)1000 W功率下升到180℃，恒溫20 min。

1.5 測定

1.5.1 標準系列

見表1。

1.5.2 樣品測定

按表2 所述儀器的工作條件，用ICP-MS方法直接測定樣品中元素的含量。

表2 電感耦合等離子體質(zhì)譜儀儀器工作參數(shù)

2 結(jié)果與討論

2.1 方法學考察

表1中顯示,在本測定的工作范圍內(nèi)，各離子標準曲線的線性關系良好。

2.2 樣品的測定結(jié)果

測定結(jié)果見表3。

表3 常見抗病毒中藥微量元素的含量 (mg·kg-1)

2.3 討論

生物體內(nèi)的微量元素是指含量占生物體總質(zhì)量0.01%以下的元素。微量元素在人體中的含量雖少,但它們卻是生命活動不可缺少的一部分[7]。鐵、鋅是人體必需的微量元素，是免疫功能的重要影響因素，其含量減少可造成機體抵抗力下降，這兩種元素與多種酶的組成和生理功能有關，機體中這些元素的缺乏可減弱免疫機制，降低免疫力，導致感染性疾病。研究表明，銅、鋅、鐵、鈣水平低下與反復感染關系密切[8]。本實驗結(jié)果表明,研究的4種抗病毒藥材中,鐵元素含量都是最豐富的,其中魚腥草中鐵含量最高,達到了253.27 mg/kg，錳和鋅含量次之,銅含量最少。鐵、錳、鋅、銅元素與這些中藥的抗病毒作用有關系，亦可能是它們發(fā)揮抗病毒作用的有效成分之一。具體這些中藥的鐵、錳、鋅、銅元素究竟如何影響其藥效的有待進一步研究。

我國中藥資源極為豐富，中醫(yī)抗病毒有現(xiàn)實意義和廣闊前景,中藥在流感防治、治療問題上具有獨特的優(yōu)勢,深入研究中藥抗病毒的物質(zhì)基礎及其分子機制具有重要意義。而中藥大多都含有一定的微量元素，中藥的藥效、藥性以及毒理都與中藥微量元素有著密切的關系。近年來,對中藥微量元素的研究使某些不能用傳統(tǒng)中醫(yī)理論解釋的中藥功效,可以通過微量元素的生理作用來解釋,這對中藥藥效的理論研究和發(fā)展,具有非常重要的意義[7]。有研究表明,中草藥含的微量元素不僅對人體內(nèi)微量元素含量有調(diào)節(jié)作用,一些微量元素含量豐富的藥材可以直接起到對各種疾病的直接或間接治療作用[7]。在前人的研究基礎之上,本實驗利用微波消解-原子吸收分光光度法定量分析4種常見抗病毒中藥的微量元素含量,初步探討微量元素在這4種藥材中的含量水平及其與藥材藥效的關系。