豬丁型冠狀病毒的分析與診斷方法研究

陳少飛

摘 要 豬丁型冠狀病毒病是新近報道的豬腸道病毒，其屬內病毒基因組特征與其他冠狀病毒屬存在差異。該病毒主要表現為引起嚴重的腸炎并伴有小豬腹瀉、嘔吐，導致仔豬高死亡率，影響成年豬的生產。該病毒臨床癥狀與豬流行性腹瀉極為相似，臨床較難區分。本文主要對豬丁型冠狀病毒的特點與診斷方法進行分析。

關鍵詞 豬丁型冠狀病毒；臨床癥狀；診斷方法

豬丁型冠狀病毒又稱為德爾塔冠狀病毒，是新近報道呈現世界流行性的豬腸道病毒病。豬丁型冠狀病毒主要感染整段小腸，尤其是空腸、回腸，引起一種臨床特征表現為脫水、水樣腹瀉、嘔吐的疾病。我國廣泛存在豬流行性腹瀉，但關于豬丁型冠狀病毒感染報道較少。2012年豬丁型冠狀病毒在香港報道。2014年該病在美國首次報道、廣泛流行。因豬丁型冠狀病毒與豬流行性腹瀉臨床發病情況極為相似，但發病癥狀相對較輕，臨床較難區分。故本文對豬丁型冠狀病毒的特點、診斷方法做一探討。

1 豬丁型冠狀病毒的特點

冠狀病毒是一種有囊膜的單股正鏈RNA病毒，擁有已知RNA病毒中最大的基因組序列長度。國際病毒分類委員會將該冠狀病毒亞科分為甲型冠狀病毒、乙型冠狀病毒、丙型冠狀病毒、丁型冠狀病毒。丁型冠狀病毒能夠感染鳥類、哺乳動物。豬丁型冠狀病毒病是新近報道呈現世界流行性的豬腸道病毒病，2012年香港大學研究人員發現豬丁型冠狀病毒。此后美國、韓國、中國大陸等相繼發現該病毒，并獲得該病毒本土毒株的全長序列。

豬丁型冠狀病毒與甲型冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒和豬傳染性胃腸炎病毒類似，能夠引起豬腸道疾病，導致腹瀉、脫水、水樣腹瀉，其發病率和死亡率高達50%-100%，導致哺乳階段仔豬高死亡率，并影響成年豬生產。自2013年起，新出現的甲型冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒、豬丁型冠狀病毒已遍布美國，造成大量豬死亡。目前國際上對該病毒的研究較為重視，但國內該病毒的暴發和流行報道較少。

2 豬丁型冠狀病毒的診斷

2014年在俄亥俄州農業部動物疫情診斷實驗室收到癥狀與甲型冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒類似的腹瀉母豬、死亡小豬的糞便及小腸樣本，但該事件中小豬的死亡率低于甲型冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒感染死亡率。樣本檢測提示無甲型冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、輪狀病毒、沙門氏菌感染。進一步進行電鏡檢查結果提示有冠狀病毒樣病毒顆粒。故研究者設計了特異性檢測丁型冠狀病毒的RT-PCR檢測方法，成功檢測到了樣本中豬丁型冠狀病毒的存在。

此外，也有研究者建立熒光定量PCR方法進行豬丁型冠狀病毒的檢測。與普通PCR檢測相比，熒光定量PCR具有精準、快速、靈敏的特點，并且能夠實現病毒定量分析。除了上述PCR檢測方法，新近研發的一種抗PDCoV IgG間接ELISA檢測方法也開始用于豬丁型冠狀病毒的診斷，獲得了較高的靈敏度和特異性。在此基礎上有學者建立了基于重組N蛋白檢測PDCoV抗體的間接ELISA檢測法，也有學者應用間接免疫熒光檢測法檢測細胞中的丁型冠狀病毒，這兩種方法能顯示病毒感染細胞、部位等，對于體外感染、病理研究等有重要意義。

3 結束語

豬丁型冠狀病毒是近年來發現的豬腸道病毒，相關研究報道較少。但隨著該病毒在美國的流行，關于該病毒流行病學、序列分析、致病性等研究日趨增多。目前許多學者已建立了不同的豬丁型冠狀病毒實驗室檢測方法，也獲得部分國家和地區的流行情況，但尚缺乏穩定的商品化檢測試劑盒。故在今后的研究中，豬丁型冠狀病毒高效臨床檢測方法、疫苗研發等將成為重點，以降低豬丁型冠狀病毒對養豬產業帶來的威脅。

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