疾控中心微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制影響因素及解決對策

陳世坤 許穎穎

疾控中心微生物檢驗(yàn)在傳染性疾病的預(yù)防、分析、診療過程中發(fā)揮著重要作用，其涉及到分子生物學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等多門學(xué)科[1-2]，在面對重大傳染性疾病時，一份及時準(zhǔn)確的微生物檢驗(yàn)報告是遏制事態(tài)進(jìn)展，挽救患者生命的關(guān)鍵前提。隨著微生物檢驗(yàn)技術(shù)的不斷進(jìn)步，各類先進(jìn)的檢驗(yàn)儀器和技術(shù)在疾控中心實(shí)驗(yàn)室中得到了應(yīng)用，但微生物檢驗(yàn)除了要具備必要的儀器設(shè)備和技術(shù)外，送檢標(biāo)本質(zhì)量、檢驗(yàn)人員操作技術(shù)和環(huán)境因素也是關(guān)鍵因素[3-4]，由于病原微生物檢驗(yàn)程序十分復(fù)雜，容易出現(xiàn)較多的失誤環(huán)節(jié)，從而可能對檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性造成影響，耽誤患者搶救時機(jī)，而微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制有密切關(guān)聯(lián)，對檢驗(yàn)過程中影響到實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的因素進(jìn)行分析，并采取必要的對應(yīng)措施減少質(zhì)量問題，提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性是目前疾控中心研究的重要問題。本次研究以上述問題為論點(diǎn)，采取回顧性分析法對本疾控中心實(shí)驗(yàn)室2016年9月—2018年12月580份微生物標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行探討，并統(tǒng)計質(zhì)量問題的影響因素和強(qiáng)化質(zhì)控前后的質(zhì)量問題發(fā)生率，希望能為實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)工作提供參考。

1 對象與方法

1.1 分組對象

回顧性分析本疾控中心實(shí)驗(yàn)室2016年9月—2018年12月檢驗(yàn)的580份微生物標(biāo)本，2017年11月本疾控中心采取微生物標(biāo)本檢驗(yàn)質(zhì)量強(qiáng)化控制措施，按照時間分為控制前（2016年9月—2017年10月）和控制后（2017年11月—2018年12月）各290份標(biāo)本，控制前包括43份消毒餐飲具標(biāo)本、52份公共衛(wèi)生用品用具標(biāo)本、54份空氣標(biāo)本、79份一次性消毒衛(wèi)生用品標(biāo)本、62份飲用水標(biāo)本；控制后包括45份消毒餐飲具標(biāo)本、51份公共衛(wèi)生用品用具標(biāo)本、55份空氣標(biāo)本、78份一次性消毒衛(wèi)生用品標(biāo)本、61份飲用水標(biāo)本。

1.2 質(zhì)量管理方法

微生物標(biāo)本檢驗(yàn)均由工作3～15年的4名實(shí)驗(yàn)室工作人員負(fù)責(zé)，室內(nèi)劃分有標(biāo)本儲存區(qū)、標(biāo)本置備區(qū)，檢驗(yàn)項(xiàng)目包括霉菌、大腸桿菌、沙門氏菌、溶血性鏈球菌、抗體檢測等。觀察實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)過程中出現(xiàn)的質(zhì)量問題，并探討其影響因素。2016年9月—2017年10月采取常規(guī)質(zhì)量管理，包括：（1）做好無菌操作。采血時必須遵循一人一針一管的操作標(biāo)準(zhǔn)，操作結(jié)束后需及時洗手，毛巾專人專用，每日消毒避免交叉感染，檢驗(yàn)結(jié)束后及時清洗容器和器材，干燥滅菌后放回原處，存在傳染風(fēng)險的標(biāo)本，需經(jīng)滅菌處理后方能廢棄。每日打掃地面，以消毒劑擦拭地板和臺面，保持室內(nèi)整潔。（2）標(biāo)本分區(qū)制備檢驗(yàn)。一律憑單采集標(biāo)本，做好科室、床號、姓名、性別、檢驗(yàn)項(xiàng)目的核對工作，將實(shí)驗(yàn)室分為緩沖間、操作間、無菌間三個區(qū)域，緩沖間負(fù)責(zé)培養(yǎng)基配制和試劑儲藏，禁止將細(xì)菌檢驗(yàn)標(biāo)本帶入。操作間需與其他區(qū)域區(qū)分開來，人員進(jìn)入時需更換防護(hù)衣和防護(hù)鞋，運(yùn)送標(biāo)本的人員嚴(yán)禁進(jìn)入操作間。無菌間負(fù)責(zé)保存不同的標(biāo)本，并在安全柜中做好標(biāo)識。（3）控制好檢驗(yàn)時間。加入促凝劑的標(biāo)本需在采血后5～15 min盡早處理，加入抗凝劑的標(biāo)本則可立即離心，從標(biāo)本收集開始，在2 h內(nèi)需分離血清和血漿，盡可能縮短采集到分離血清和血漿的時間，標(biāo)本制備完成后需轉(zhuǎn)入2～8℃的冰箱保存，所有標(biāo)本均在48 h完成檢驗(yàn)。（4）按標(biāo)準(zhǔn)流程處理廢棄物。按照損傷性廢棄物、化學(xué)性廢棄物、感染性廢棄物的標(biāo)準(zhǔn)對廢棄物進(jìn)行分類放置，由專人登記收集，按照規(guī)定的路線和時間送至醫(yī)療廢棄物貯存房，移交給醫(yī)療垃圾處理人員回收處理。

2017年11月—2018年12月針對性實(shí)驗(yàn)室微生物標(biāo)本檢驗(yàn)強(qiáng)化質(zhì)量管控措施：（1）提高檢驗(yàn)人員綜合素質(zhì)。要求檢驗(yàn)人員不斷提高操作技術(shù)，并掌握新的知識和技能，了解國家出臺的檢驗(yàn)法規(guī)與標(biāo)準(zhǔn)，熟悉基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、微生物學(xué)理論知識并將其運(yùn)用到檢驗(yàn)過程中。實(shí)驗(yàn)室多開展培訓(xùn)活動，邀請工作經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員開展現(xiàn)場教學(xué)指導(dǎo)，保證每一位檢驗(yàn)人員均能熟練掌握檢驗(yàn)技能，同時加強(qiáng)質(zhì)量控制意識教育，讓檢驗(yàn)人員意識到工作的重要性，以嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真、富有責(zé)任心的態(tài)度開展工作，避免人為操作導(dǎo)致的檢驗(yàn)誤差。（2）樣本和試劑的質(zhì)量控制。對樣本采集時間、數(shù)量、方法、采集環(huán)境進(jìn)行嚴(yán)格控制，要求樣本具有代表性，采集后進(jìn)行低溫密封保存，及時送檢，避免樣本變質(zhì)。同時需對試劑的種類、濃度、配置時間、失效日期做好標(biāo)記，按照試劑存放要求避光保存或冷藏，檢驗(yàn)前先進(jìn)行陽性和陰性菌株對照檢驗(yàn)[5]，符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)后方能使用。（3）保持無菌環(huán)境。檢驗(yàn)場地需遠(yuǎn)離洗手間、垃圾桶等污染區(qū)域，并保持無菌室通風(fēng)和采光條件，所用物品需能耐受每天的消毒和清洗，室內(nèi)墻壁天花板不能留有縫隙和死角，操作間不得安裝下水道，在操作間和緩沖間配置樣本傳遞箱，緩沖間內(nèi)需具備洗手盆、無菌衣物、毛巾等物品，禁止將無菌培養(yǎng)箱放在緩沖間。定期檢查無菌室內(nèi)紫外線消毒燈輻射強(qiáng)度，若低于空氣消毒標(biāo)準(zhǔn)則立即更換[6]。工作人員必須在穿戴工作服的前提下才能進(jìn)行檢驗(yàn)操作，嚴(yán)格落實(shí)無菌操作標(biāo)準(zhǔn)。（4）儀器管理。檢驗(yàn)前先對儀器進(jìn)行鑒定，保證校準(zhǔn)精確。不同儀器需打上不同的標(biāo)識、操作規(guī)程、使用和維保記錄，定期維護(hù)高壓滅菌器、培養(yǎng)箱和冰箱等設(shè)備，保持顯微鏡和配套器皿的清潔度，生物安全柜、天平則需定期進(jìn)行外觀清潔、防潮、防震處理[7]。

1.3 觀察方法

對比強(qiáng)化質(zhì)量控制前后兩個時間段內(nèi)的質(zhì)量問題發(fā)生率和影響因素。質(zhì)量問題包括菌落總數(shù)檢驗(yàn)誤差率、總大腸菌群檢驗(yàn)誤差率、霉菌檢驗(yàn)誤差率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以“n（%）”表示，采用χ2檢驗(yàn)，P≤0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 質(zhì)量問題發(fā)生率

控制前共有52例標(biāo)本檢驗(yàn)過程中出現(xiàn)質(zhì)量問題，控制后質(zhì)量問題發(fā)生率（3.79%）低于控制前（17.94%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)質(zhì)量的影響因素

操作因素、樣本因素、環(huán)境因素、儀器因素、人員因素是導(dǎo)致微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)質(zhì)量問題的主要因素，占比分別為19.05%、17.46%、19.05%、9.52%、34.92%；控制后各因素導(dǎo)致的質(zhì)量問題均少于控制前，且操作因素、樣本因素、人員因素導(dǎo)致的質(zhì)量問題對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），環(huán)境、儀器因素導(dǎo)致的質(zhì)量問題對比無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

3 討論

3.1 影響因素探討

本次研究結(jié)果顯示：控制前共有52例標(biāo)本檢驗(yàn)過程中出現(xiàn)質(zhì)量問題；操作因素、樣本因素、環(huán)境因素、儀器因素、人員因素是導(dǎo)致微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)質(zhì)量問題的主要因素，占比分別為19.05%、17.46%、19.05%、9.52%、34.92%。因素分析為：（1）操作因素和人員因素均與檢驗(yàn)工作人員的專業(yè)水準(zhǔn)、法律意識、責(zé)任心等綜合素養(yǎng)有關(guān)，若實(shí)驗(yàn)室工作人員對質(zhì)量管理的依從性差，則可能導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)較大的誤差，對質(zhì)量控制水平造成直接影響。（2）樣本因素。微生物樣本是檢驗(yàn)的重要組成部分，樣本采集時間、方法、采集量、保存和運(yùn)輸方法均會對其質(zhì)量造成影響，且試劑質(zhì)量也會對檢驗(yàn)結(jié)果造成影響[8-9]。（3）環(huán)境和儀器因素。檢驗(yàn)過程中溫濕度、空氣潔凈程度會導(dǎo)致環(huán)境污染，無法真正實(shí)現(xiàn)無菌檢測，且實(shí)驗(yàn)室日常工作中對實(shí)驗(yàn)環(huán)境的實(shí)時監(jiān)控和管理不夠全面，導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果失真[10]。而設(shè)備因素則是因設(shè)備老舊或不合格，無法滿足個別復(fù)雜的檢驗(yàn)，或因檢驗(yàn)操作期間設(shè)備故障、損壞導(dǎo)致操作時間延長[11-12]，從而對檢驗(yàn)質(zhì)量造成影響。

表1 質(zhì)量控制前后微生物檢驗(yàn)質(zhì)量問題發(fā)生率對比[例（%）；n＝290]

表2 微生物檢驗(yàn)質(zhì)量影響因素統(tǒng)計和質(zhì)量控制前后因素導(dǎo)致的質(zhì)量問題對比[例（%）；n＝290]

3.2 處理結(jié)果

根據(jù)以上分析，本次研究于2017年11月—2018年12月根據(jù)影響因素采取針對性實(shí)驗(yàn)室微生物標(biāo)本檢驗(yàn)強(qiáng)化質(zhì)量管控措施，結(jié)果顯示控制后質(zhì)量問題發(fā)生率（3.79%）低于控制前（17.94%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；控制后各因素導(dǎo)致的質(zhì)量問題均少于控制前，且操作因素、樣本因素、人員因素導(dǎo)致的質(zhì)量問題對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。說明強(qiáng)化質(zhì)量管控能減少疾控中心微生物實(shí)驗(yàn)室工作人員操作因素、樣本因素、人員因素對檢驗(yàn)質(zhì)量造成的影響，從而提高檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

綜上所述，疾控中心微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)過程中容易受操作因素、樣本因素、環(huán)境因素等多種影響，導(dǎo)致質(zhì)量問題，采取全方位、針對性的質(zhì)量強(qiáng)化控制措施能有效減少質(zhì)量問題，提高微生物標(biāo)本檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性。