白細胞介素-13和白細胞介素-17在口腔扁平苔蘚患者血清中的表達及臨床意義

王 偉

(同濟大學(xué)附屬口腔醫(yī)院檢驗科，上海 200072)

口腔扁平苔蘚(OLP)是一種常見的慢性角化性口腔黏膜疾病，一般不具有傳染性。該病的發(fā)病原因比較復(fù)雜，有研究表明，其發(fā)病與精神因素如壓力大、疲勞、抑郁、焦慮、免疫因素、內(nèi)分泌因素、微循環(huán)障礙因素、微量元素缺乏及一些全身疾病如糖尿病、感染消化道功能紊亂等有關(guān)[1]。常見分型主要是網(wǎng)紋型、糜爛型和萎縮型。白細胞介素(IL)是由機體內(nèi)多種細胞產(chǎn)生并調(diào)節(jié)細胞間功能的一類細胞因子[2]。目前研究發(fā)現(xiàn)了38種IL，IL-13和IL-17是其中的兩種，它們在免疫細胞的增生、活化及免疫調(diào)節(jié)等過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，此外它們還參與機體的生理及病理反應(yīng)過程。IL和血細胞生長因子同屬于細胞因子[3-4]，二者之間協(xié)調(diào)合作，共同完成細胞造血等功能。本文主要對IL-13和IL-17在OLP患者血清中的表達及臨床意義進行探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年5月至2018年2月本院收治的32例初診為OLP患者(OLP組)作為研究對象，其中男12例，女20例，年齡22～73歲，平均(47.13±7.94)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者均不伴有皮損，無心血管、肝炎等系統(tǒng)性疾病；(2)無牙周炎、牙齦炎等其他口腔疾病；(3)近3個月內(nèi)未接受任何局部或全身的激素或抗菌藥物治療。根據(jù)臨床檢查和OLP診斷標(biāo)準(zhǔn)及分型標(biāo)準(zhǔn)[5]對患者進行確診和分型；其中網(wǎng)紋型包括網(wǎng)狀型、條紋型及斑塊型等15例，糜爛型包括紅斑型、萎縮型l5例。對照組28例來自于同期體檢健康者，男11例，女17例，年齡24～68歲，平均(46.19±5.26)歲。本研究經(jīng)倫理委員會同意，所有研究對象均知情并簽署知情同意書。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 儀器與試劑 補體C3/C4檢測試劑盒來自于貝克曼庫爾特實驗系統(tǒng)蘇州有限公司，免疫球蛋白(Ig)G/M/A檢測試劑盒恒溫水浴箱(上海躍進醫(yī)療器械廠)，Model680酶標(biāo)儀采用美國的BIO-RAD公司生產(chǎn)，超低溫冰箱采用冠深生物科技上海有限公司生產(chǎn)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒由上海撫生實業(yè)有限公司生產(chǎn)，流式細胞儀、6色TBNK檢測試劑盒由美國BD公司生產(chǎn)，特定蛋白分析系統(tǒng)來自于美國Beckman Coulter公司。

1.3 檢測方法 于次日清晨采取患者空腹時的靜脈血5.5 mL，對照組則在體檢時抽取即可，2 500 r/min離心15 min后取血清，置于-80 ℃環(huán)境中存放，按照ELISA試劑盒說明書測定血清IL-13和IL-17水平。散射比濁法檢測患者體液免疫指標(biāo)，包括C3、C4、IgG、IgM、IgA；流式細胞術(shù)檢測患者自然殺傷細胞(NK,CD16+CD56+)、CD3+、CD4+、CD8+、CD19+細胞免疫指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS22.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。組間采用兩獨立樣本t檢驗；各因素間相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組體液免疫水平檢測結(jié)果比較 OLP組患者免疫水平與對照組作比較，OLP組C4值低于對照組，IgM高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

2.2 兩組細胞免疫水平檢測結(jié)果比較 兩組體液免疫水平檢測結(jié)果進行比較，OLP 組CD19+水平高于對照組，CD3+、CD4+、CD8+低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表1 兩組患者體液免疫檢測結(jié)果比較

注：*P<0.05，與對照組比較

表2 兩組患者細胞免疫檢測結(jié)果比較

注：*P<0.05，與對照組比較

2.3 兩組IL-13和IL-17的表達水平比較 OLP組IL-13和IL-17的表達水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

2.4 OLP患者與血清中IL-13和IL-17表達水平的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示，OLP患者血清中IL-13和IL-17的表達水平呈正相關(guān)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(r=0.824，P<0.05)。

2.5 OLP患者血清中IL-13和IL-17表達水平與免疫指標(biāo)的相關(guān)性分析 采用Spearman相關(guān)分析法分析OLP患者IL-13和IL-17的表達與免疫功能指標(biāo)的相關(guān)性，見表4。OLP患者IL-12和IL-27的表達水平與IgG呈正相關(guān)(r1=0.643，P1=0.012；r2=0.747，P2=0.001)，與CD16+CD56+呈負相關(guān)(r1=-0.705，P1=0.012；r2=-0.782，P2=0.022)。

表3 兩組IL-13和IL-17的表達水平比較

注：*P<0.05，與對照組比較

表4 OLP患者血清中IL-13和IL-17表達水平與

注：*P<0.05

3 討 論

OLP是一種常見的不具有感染性的口腔黏膜疾病，多見于中年女性，由粟米狀或丘疹狀的線條構(gòu)成的網(wǎng)紋狀損害，隨著病情加重會出現(xiàn)紅斑和糜爛[6]。發(fā)病機制比較復(fù)雜，精神因素是造成此病的主要原因，由于精神壓力過大導(dǎo)致內(nèi)分泌紊亂，機內(nèi)臟器功能失調(diào)而引發(fā)疾病[7]。

補體C3、C4的臨床意義相似，它們在中和病毒、促進吞噬、補體活化和預(yù)防免疫復(fù)合物沉著等方面發(fā)揮作用，增高常見于某些急性炎癥或傳染病早期[8]。IgG、IgM和IgA均屬于人體免疫球蛋白，具有抗炎、抗病毒功能，對機體其免疫保護作用[9]。本研究顯示OLP組與對照組相比，C3、C4水平降低，IgG、IgM、IgA均升高，可能與參與機體免疫反應(yīng)，對抗炎癥和細菌有關(guān)，可作為判斷某些疾病狀態(tài)的重要指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，OLP組CD3+、CD4+、CD8+水平都低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，可能是因為在機體受到感染時，抑制性T細胞對免疫應(yīng)答起負功能調(diào)節(jié)作用。CD19+表達高低代表B細胞水平[10]，本文研究表明OLP患者CD19+高于對照組，可能與B細胞在抗原刺激下可分化為漿細胞，合成和分泌免疫球蛋白，集中參與了機體體液免疫調(diào)節(jié)有關(guān)。NK能夠介導(dǎo)天然免疫應(yīng)答，不依賴抗體和補體，具有自然殺傷活性，能識別并殺傷腫瘤細胞或病毒感染的細胞等；參與機體內(nèi)移植排斥反應(yīng)和某些自身免疫病的發(fā)生發(fā)展，具有免疫調(diào)節(jié)功能，是機體最重要的免疫細胞[11]。NK活性可作為判斷機體抗腫瘤和抗病毒感染的相關(guān)指標(biāo)，有研究表明[12]：在免疫缺陷疾病、實體腫瘤、血液系統(tǒng)腫瘤和某些病毒感染患者體內(nèi)，NK活性減低；宿主抗移植物反應(yīng)者，NK活性升高，本研究中OLP患者NK細胞水平與對照組相比，患者NK細胞水平下降，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

本研究顯示：OLP組患者血清中IL-13和IL-17的表達均高于對照組，且相關(guān)性分析顯示，IL-13與IL-17水平呈正相關(guān)。推測IL-13與IL-17均參與了OLP患者的局部炎性反應(yīng)的發(fā)展過程。IL-13由TH2細胞產(chǎn)生，與IL-4基因緊密連接，在功能上也與IL-4有許多相似之處[13]。IL-13可誘導(dǎo)單核細胞分化，增強其MHCⅡ類分子的表達；抑制lps誘導(dǎo)的單核因子分泌，控制炎性反應(yīng)[14]。IL-17是目前已發(fā)現(xiàn)的30余種IL之一，而Th17細胞主要效應(yīng)因子是IL-17[15]。研究發(fā)現(xiàn)IL-17是T細胞來源細胞因子，IL-17是由活化的T細胞產(chǎn)生的誘導(dǎo)炎性反應(yīng)的細胞因子，可以促進T細胞的激活和刺激內(nèi)皮細胞、上皮細胞等產(chǎn)生多種細胞因子如IL-6、IL-8、化學(xué)增活素、細胞黏附分子1(CAM-1)及粒細胞-巨噬細胞刺激因子(GM-CSF)，從而導(dǎo)致機體炎性反應(yīng)的產(chǎn)生[16]。本文IL-13和IL-17表達水平與免疫指標(biāo)的相關(guān)性研究結(jié)果顯示，OLP組與體液免疫中IgG呈正相關(guān)，與OLP細胞免疫中NK細胞呈負相關(guān)(P<0.05),提示患者出現(xiàn)免疫功能低下的狀況。IL-13能促進B細胞脫氧核糖核酸合成，刺激細胞增殖，誘導(dǎo)免疫蛋白產(chǎn)生并轉(zhuǎn)換成IgG，而IL-17本身也可參與多種自身免疫性疾病的過程，可誘導(dǎo)其他炎癥因子的表達增多，推測IL-17激發(fā)IgG生成增多，參與殺傷炎癥因子和調(diào)節(jié)機體免疫功能。IL-13和IL-17在機體出現(xiàn)炎癥時大量增多，協(xié)同增進了NK細胞增殖，對抗炎性反應(yīng)發(fā)展，調(diào)節(jié)機體免疫力[17-18]。

綜上所述，OLP患者血清中的IL-13和IL-17水平升高促進了炎性反應(yīng)的發(fā)展，也導(dǎo)致機體內(nèi)體液調(diào)節(jié)紊亂，在一定程度上可以反應(yīng)機體免疫功能狀況，其具體機制還需進一步的拓展研究。