湯春梅
(甘肅林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,甘肅天水 741020)
金鉆蔓綠絨(Philodendron con-go)又名金鉆、喜樹(shù)蕉,為天南星科喜林芋屬多年生常綠草本植物,原產(chǎn)南美洲,為熱帶和亞熱帶常見(jiàn)觀賞植物。葉片寬、手掌形、肥厚、有光澤,葉柄長(zhǎng)而粗壯,氣生根發(fā)達(dá),生命力極強(qiáng),具有凈化空氣的作用,可保持室內(nèi)空氣清新,是近年來(lái)較為流行的室內(nèi)觀葉植物,適宜家居、辦公、酒店等場(chǎng)所。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)需求量逐年增大,僅以傳統(tǒng)的分株繁殖,速度慢、繁殖系數(shù)低,供不應(yīng)求。該研究利用組織培養(yǎng)的方法建立金鉆蔓綠絨無(wú)性繁殖體系,為實(shí)現(xiàn)金鉆蔓綠絨快速繁殖及規(guī)模化生產(chǎn)提供技術(shù)支持。
供試材料為甘肅林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院花卉示范基地溫室內(nèi)的金鉆蔓綠絨小盆栽,選取當(dāng)年生無(wú)病蟲(chóng)危害的幼苗莖段作為外植體。
1.2.1 外植體處理。將采回來(lái)的外植體材料剪去葉片,切成2~3 cm的小段,先用洗潔精表面清洗,再用流水沖洗30 min,在超凈工作臺(tái)上用75%酒精浸泡30 s,無(wú)菌水沖洗3次,再用0.1%升汞浸泡10 min,無(wú)菌水沖洗5次,然后置于鋪有無(wú)菌濾紙的接種盤中備用。
1.2.2 不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)。將處理好的外植體剪成約1 cm的小段,接種于MS添加不同濃度6-BA和NAA的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,6-BA濃度設(shè)為1.0 mg/L、3.0 mg/L、5.0 mg/L,NAA濃度設(shè)為0.1 mg/L和0.3 mg/L,培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計(jì)不定芽誘導(dǎo)情況。
1.2.3 不定芽增殖培養(yǎng)。將誘導(dǎo)出的生長(zhǎng)健壯的不定芽,轉(zhuǎn)接到以MS為基本培養(yǎng)基,添加0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0 mg/L 6-BA 和 0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L NAA的增殖培養(yǎng)基中,30 d后統(tǒng)計(jì)增殖率
1.2.4 生根培養(yǎng)。將長(zhǎng)至2 cm以上的無(wú)根芽苗剪下,轉(zhuǎn)入以1/2MS和MS為基本培養(yǎng)基,添加0.2 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L NAA的生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根,20 d后統(tǒng)計(jì)生根率。
1.2.5 培養(yǎng)條件。所有培養(yǎng)基都附加3%蔗糖、0.6%瓊脂,pH 5.8;培養(yǎng)溫度 25±2℃,光照時(shí)間 12 h/d,光照強(qiáng)度 2 000~3 000 lx。
將莖段接種在含有不同濃度6-BA和NAA培養(yǎng)基上進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng),2周后發(fā)現(xiàn)外植體兩端逐漸膨大,基部切口出現(xiàn)綠色突起并逐漸分化形成不定芽。由表1可知,6-BA和NAA對(duì)金鉆蔓綠絨不定芽誘導(dǎo)具有顯著影響,在NAA濃度為0.1 mg/L時(shí),隨6-BA濃度的升高不定芽誘導(dǎo)率也升高;在NAA濃度為0.3 mg/L時(shí),隨6-BA濃度的升高不定芽誘導(dǎo)率先升高后降低;6-BA濃度為3.0 mg/L時(shí),不定芽誘導(dǎo)率最高,達(dá)到96.7%。由此可見(jiàn),金鉆蔓綠絨不定芽誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基為MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L。

表1 不同培養(yǎng)基對(duì)金鉆蔓綠絨不定芽誘導(dǎo)的影響
將誘導(dǎo)出的健壯不定芽分割成單芽后接種于增殖培養(yǎng)基上,培養(yǎng)30 d后增殖效果因激素濃度配比不同而存在差異。從表2可以看出,在一定濃度范圍內(nèi),不定芽的增殖倍數(shù)與6-BA呈正相關(guān),當(dāng)NAA濃度一定時(shí),隨6-BA濃度的升高不定芽增殖倍數(shù)也升高;而一定濃度的NAA也有利于不定芽的增殖,當(dāng)6-BA濃度一定時(shí),隨NAA濃度的升高不定芽增殖倍數(shù)先升高后降低;對(duì)比發(fā)現(xiàn)MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L培養(yǎng)基的增殖效果較為突出,增殖倍數(shù)為4.2,但會(huì)產(chǎn)生不同程度的玻璃化苗。考慮到組培苗的健壯度和成苗質(zhì)量,認(rèn)為金鉆蔓綠絨不定芽增殖的最適培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L。

表2 不同培養(yǎng)基對(duì)金鉆蔓綠絨不定芽增殖的影響
在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)10 d左右,無(wú)菌苗基部出現(xiàn)白色突起,隨后逐漸伸長(zhǎng),20 d后能形成較為粗壯的根。從表3可以看出,在MS和1/2MS基本培養(yǎng)基

表3 不同培養(yǎng)基對(duì)金鉆綠蔓絨生根的影響
中添加不同濃度的NAA都能使其生根,而以MS+NAA 0.5 mg/L培養(yǎng)基最佳,不僅生根率100%,而且根數(shù)較多,苗長(zhǎng)勢(shì)好。因此,MS+NAA 0.5 mg/L是金鉆蔓綠絨最適宜的生根培養(yǎng)基。
該研究以金鉆蔓綠絨當(dāng)年生幼苗莖段為外植體,在MS培養(yǎng)基上添加適量的6-BA和NAA誘導(dǎo)其形成不定芽,其中MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L培養(yǎng)基的不定芽誘導(dǎo)率最高,為96.7%,是金鉆蔓綠絨最適宜的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基。
增殖培養(yǎng)階段,對(duì)增殖影響顯著的是6-BA,隨6-BA濃度的升高,不定芽增殖倍數(shù)也升高,但過(guò)高濃度的6-BA易在切口處形成愈傷組織,且有玻璃化現(xiàn)象產(chǎn)生;當(dāng)NAA濃度為0.2 mg/L時(shí),6-BA濃度為2.0 mg/L的增殖倍數(shù)比6-BA濃度為1.5 mg/L高,形成的芽苗盡管多但較為細(xì)弱,同時(shí)會(huì)不同程度地產(chǎn)生玻璃苗,這樣的芽苗會(huì)影響后續(xù)增殖培養(yǎng)時(shí)的增殖倍數(shù)及成苗質(zhì)量,因此金鉆蔓綠絨不定芽增殖的適宜培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L。
生根階段,MS比1/2MS更有利于生根,其中MS+NAA 0.5 mg/L是金鉆蔓綠絨最適宜的生根培養(yǎng)基,不僅生根率100%,而且生根量多,植株健壯;另外,生根階段采用的各處理均能較好生根,生根率均在92%以上,說(shuō)明金鉆蔓綠絨較易生根。根據(jù)其氣生根發(fā)達(dá)的特性,在今后的研究中可進(jìn)一步優(yōu)化增殖培養(yǎng)基和延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間,以便在增殖過(guò)程中產(chǎn)生大量帶氣生根的小植株,將其剪下直接移栽,這樣可以節(jié)約生根培養(yǎng)所需的時(shí)間和生產(chǎn)成本。