液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定牛奶中金剛烷胺殘留的方法

張 佳，張慧利，柴 磊，關(guān)婷婷，成林林，秦 娜

（焦作市畜產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測中心，河南焦作 450000）

1 前言

金剛烷胺是一類用于預防和治療病毒感染的三環(huán)胺類抗病毒藥物，主要用于雞、豬流感的預防和早期治療以及豬傳染性胃腸炎的防治。農(nóng)業(yè)部規(guī)定除經(jīng)批準生產(chǎn)、使用的疫苗產(chǎn)品外，禁止使用金剛烷胺防治高致病性禽流感等一類病原微生物引起的病毒性疫病。目前主要有氣相色譜法、毛細管氣相色譜法、高效液相色譜-熒光檢測法、毛細管電泳法及液質(zhì)聯(lián)用法等，普遍存在著前處理過程繁瑣、檢測靈敏度低和專屬性差等缺點。本方法根據(jù)金剛烷胺的分子結(jié)構(gòu)、化學性質(zhì)，以現(xiàn)有文獻為基礎(chǔ)采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進行金剛烷胺殘留的測定。經(jīng)試驗，該方法檢測靈敏度高、專屬性強、適用于牛奶中金剛烷胺殘留的檢測。

2 實驗方法及步驟

2.1 原理

試樣用1%甲酸乙腈提取，濃縮后用20%乙腈溶解，經(jīng)正己烷去除脂肪，高速離心去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)后過濾膜，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，同位素內(nèi)標法定量。

2.2 儀器設(shè)備與材料

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（配電噴霧離子源）Waters UPLC TQ-S.；分析天平（精度0.00001g）；電子天平（0.01g）；高速冷凍離心機；多管渦旋振蕩器；氮吹儀；移液器（5mL，1mL，200μl，50μl）；聚四氟乙烯離心管（50ml）；一次性注射器（1ml）；一次性針頭過濾器（有機系，0.22μm）

2.3 試劑與溶液

甲酸（色譜純）；乙腈（色譜純）；甲醇（色譜純）；正己烷（色譜純）；無水硫酸鈉；（鹽酸）金剛烷胺、鹽酸金剛烷胺-D15對照品，純度≥99%；1%甲酸乙腈溶液：量取1ml甲酸，加乙腈至100ml，搖勻即得；……