茶葉中有機磷農藥殘留測定方法的改進

□ 孫紅英 臨沭縣檢驗檢測中心

當下，殘留有機磷農藥已成為亟待解決的問題，為解決茶葉中農藥殘留問題，相關研究人員需要研制出低毒高效的農藥試劑，同時檢測部門還應進一步提升有機磷農藥殘留檢測水平，防止被污染的茶葉進入市場，損害人們身體健康。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

本實驗所使用的試劑和材料：有機磷農藥標準溶液（1 000 mg/L）；乙二胺-N-丙基硅烷、石墨化炭黑、十八烷基硅烷鍵合硅膠；乙腈、丙酮、乙酸、無水乙酸鈉、無水MgSO4（均為分析純）；茶鮮葉樣品（取自當地某茶園）。

1.2 儀器與設備

本次進行測定時所使用的儀器與設備主要有：氣相色譜儀、超聲波清洗器、離心機、渦旋振蕩器與氮吹儀。其中，氣相色譜儀選用配有FPD檢測器的7890B型氣相色譜儀、高速離心機選用TG16-WS型、渦旋振蕩器選用VM-10 型、氮吹儀選用HSC-24B型氮吹儀、超聲波清洗器型號選用KQ-500DE型。

1.3 實驗方法

首先分別取7種1.0 mL有機磷農藥標準品（1 000 mg/L）置于20 mL容量瓶內，用丙酮制備成濃度為50 mg/L的標準溶液。取0.5 mL敵敵畏標準溶液、2.0 mL樂果和2.0 mL三唑磷標準溶液、剩余4種有機磷標準溶液各1.0 mL，置于10 mL容量瓶中，之后使用丙酮定容，將制備完成的混合標準液置于冰箱內（冰箱溫度應保持在4 ℃）。稱取5.0 g攪碎的待測定茶葉樣品置于離心管內，之后添加10 mL乙酸溶液，使用超聲提取（15 min），添加1 g MgSO 溶液，在900r/min條件下進行離心（4 min），完成后取4 mL上層提取液，倒入裝有0.1 g C18、0.15 g PSA、0.12 g GCB和0.3 g MgSO4的離心管中，并在相同條件下持續離心5 min，完成后再取上層清液2 mL倒入試管，在50 ℃水浴條件下用氮吹儀吹干，丙酮定容至1 mL后混合，過0.22 μm有機系濾膜上機檢測。

2 結果與分析

2.1 提取條件的選擇

首先在待測定茶葉樣品中添加100 μL7種混合標準試劑農藥溶液，由于本文中測定的7種有機磷農藥具有弱酸性，因此在進行測定實驗時比較了乙腈、乙酸-乙腈溶液對測定結果的影響。通過實驗得出：乙腈和乙酸-乙腈提取溶液對上述7種機磷農藥提取效率基本一致，都能滿足分析方法要求，但相比乙腈提取液，乙酸-乙腈提取溶液的雜質含量較少，故最終選用乙酸-乙腈溶液作為提取溶液[1]。

2.2 提取方式的選擇

振蕩提取方式操作簡單，但需要很長時間才能達到更好的回收率，且效率低下。勻漿提取方式速度較快且效果好，一般只需幾分鐘即可完成，但在提取大量樣品時要花費大量時間，且在連續提取過程中，如果高速均質器刀頭清潔不達標則極易造成樣品之間出現交叉污染，進而造成測定結果精確度大打折扣。相比于振蕩、勻漿兩種提取方式，超聲波提取方式更加簡單、可操作性更強、效率與精確度更高，且整個提取過程不用安排專門的操作人員進行看護，在進行大批量樣品處理時優勢更加顯著[2]。因此，本實驗采用超聲波提取方法。但在實際應用中超聲波會產生熱量，不利于保持分析的靈敏度和準確度，故在實驗過程中分別分析了5～20 min超聲時間下有機磷農藥混合標準液提取的效果，為確保實驗效果進行平行試驗3次。圖1為不同超聲時間條件下對茶葉中7種有機磷農藥的回收率影響。從圖1中可以看出，當超聲時間為10～20 min時，回收率達到70%以上，且此時平行性良好，故最終確定超聲時間為15 min。

2.3 凈化條件的選擇

該實驗把DSPE方法作為凈化雜質的手段，因為茶葉含有甾醇、脂肪酸以及色素等雜質，因此利用PSA將提取物中的糖、脂肪酸以及色素等物質去除，利用C18將提取物中的甾醇去除，利用GCB將提取物中的色素物質去除。取4.0 mL帶測定茶葉提取物，加入100 μL 7種有機磷農藥混合標準儲備液，混合均勻，渦旋凈化，通過對各種凈化劑去除提取樣品雜質以及目標農藥的吸附狀況，最終確定選擇150 mg C18、150 mg PSA和 120 mg GCB進行固相萃取凈化。

2.4 基質效應

在利用GC方法對樣品中的農藥殘留進行分析時，非常容易受到基質效應的影響，故本文在實驗過程中對比分析了相同濃度的丙酮混合標準溶液和基質匹配標準溶液，有機磷農藥基質的峰面積明顯高于丙酮混合標準溶液的峰面積，因此，定量時采用空白樣品的化液稀釋標樣。

圖1 不同超聲時間對茶葉中有機磷農藥回收率的影響

2.5 線性范圍和檢出限

在標準色譜條件下測定7種有機磷農藥的線性范圍、回歸方程等，結果見表2。從表2中可以得出，7種有機磷農藥在各自濃度范圍內線性良好。

2.6 方法的準確度和精密度

稱取茶葉樣品5.0 g，分別加入50、100、500 μL 7種有機磷農藥混合標準原液，攪拌均勻后靜置1 h，作5個水平樣，以檢查結果的準確性。結果顯示，7種有機磷農藥的平均回收率為77.7%～98.2%，相對標準偏差為2.4%～8.7%，滿足標準要求。

表2 7種有機磷農藥的標準曲線、線性范圍、相關系數、檢出限和定量限

2.7 實際樣品分析

通過文章中所建立的有機磷農藥殘留測定方法，作者檢測了從當地茶園隨機采集的16份茶鮮葉中有機磷農藥的殘留量。結果表明，16份樣品中均未檢出有機磷農藥殘留。

3 結語

茶葉的安全問題受到越來越多的關注，農藥殘留問題是茶葉安全的重要內容，除需要加強農藥使用管理、推廣使用高效低毒農藥外，還要制定符合我國國情的茶農藥殘留標準。此外，還應結合先進、高效、便捷、自動化的前處理技術，研制出更多的農藥殘留檢測技術和快速篩選檢測技術，使中國的茶葉農藥殘留監測能力達到國際先進水平。