化學發光免疫分析法與酶聯免疫吸附試驗法檢測乙型肝炎病毒感染性標志物的價值

戴小宇

江西省吉安市永新縣人民醫院 （江西吉安 343400）

隨著病情的發展，乙型肝炎病毒（HBV）感染可演變為急慢性肝炎、肝硬化、肝癌等疾病，現已成為危害生命健康的公共衛生問題。因此，及時、準確地監測HBV感染，對防治乙型肝炎具有重要意義[1]。現階段，臨床上最常采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）法對血清中的乙型肝炎標志物水平進行測定，但在實際應用中其無法對標志物水平進行定量分析，難以準確判斷HBV感染情況。化學發光免疫分析（CLIA）法是近年來發展起來的檢測乙型肝炎血清標志物的方法，具有操作簡單、靈敏度及特異度高等優勢，同時還可進行定量分析，較好地彌補了ELISA法檢測的不足[2-3]。本研究采用CLIA法與ELISA法檢測乙型肝炎病毒感染性標志物，對兩者臨床應用價值進行對比分析。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2018年11月江西省吉安市永新縣人民醫院接收的疑似乙型肝炎患者165例，其中男86例，女79例；年齡11～78歲，平均（42.86±3.82）歲。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

納入標準：可耐受且配合本研究；均自愿參與研究，且已簽署知情同意書。排除標準：合并其他系統嚴重疾病患者；存在其他肝臟疾病患者；無法自主配合實施檢測患者。

1.2 方法

抽取患者清晨空腹肘靜脈血4 ml，于室溫下放置30 min后開始析出血清，即將血液標本放于離心機內，以3 500 r/min離心15 min，留取上層血清待檢。將獲得的血清分為均等的2份，分別采用CLIA法及ELISA法對血清中的乙型肝炎表面抗體（HBsAb）、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎E抗原（HBeAg）、乙型肝炎核心抗體（HBcAb）、乙型肝炎E抗體（HBeAb）5項乙型肝炎病毒感染性標志物進行檢測。其中，CLIA檢測儀采用安圖公司生產的A2000化學發光儀，ELISA檢測儀采用上海科華有限公司生產的KHB-st-360酶標儀。所有檢測步驟均嚴格遵循儀器操作要求及試劑盒相關說明進行。

1.3 臨床評價

（1）比較兩種方法檢測HBV感染性標志物的結果，當HBsAb 水平≥10.0 mIU/ml、HBsAg水平≥0.2 ng/ml、HBeAg水平 ≥0.05 NCU/ml、HBcAb 水 平 ≥1.5 NCU/ml、HBeAb 水 平≥2.0 NCU/ml時，可判定HBV感染性標志物為陽性[4]。（2）比較兩種方法檢測低水平HBsAg的結果及靈敏度。

1.4 統計學處理

采用SPSS 22.0統計軟件進行數據分析，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HBV感染性標志物檢測結果

CLIA法檢測HBsAg、HBeAg、HBeAb的陽性率均高于ELISA法，差異有統計學意義（P＜0.05）；兩種方法檢測HBsAb及HBcAb的陽性率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 165例患者經兩種方法檢測HBV感染性標志物的結果比較[例（%）]

2.2 低水平HBsAg檢測結果

當HBsAg低水平檢測值為1.01～3.00 ng/ml時，兩種檢測方法檢測結果相同；當HBsAg低水平檢測值≤1.00 ng/ml時，ELISA法檢測結果低于CLIA法。見表2。

表2 兩種方法檢測低水平HBsAg的結果比較（例）

2.3 HBsAg靈敏度檢測結果

取1.00 ng/ml HBsAg定值作為參照血清，使用陰性血清進行倍比稀釋，分別采用CLIA法及ELISA法檢測HBsAg靈敏度，結果顯示，采用CLIA法檢出最低濃度為0.031 ng/ml，采用 ELISA 法檢出最低濃度為0.128 ng/ml。

3 討論

ELISA法是臨床上診斷乙型肝炎最傳統的方法，具有操作簡單、價格低、速度快等優勢，在乙型肝炎疾病診斷、監測及治療中具有一定的作用。但ELISA法在檢測中僅可做定性分析，無法做定量檢測，若血液標本中的待測定物質濃度過高，則會在鉤狀效應下出現假陰性情況，并且在檢測過程中受到較多因素的影響，使得結果穩定性降低，在臨床實際應用中受到限制[5]。

近年來，隨著醫學技術的快速發展，CLIA法在臨床上的應用較好地彌補了ELISA法無法定量檢測的不足。CLIA法是借助發光底物自身的發光強度直接進行測定的分析技術，現已成為HBV感染性標志物測定的重要方法[6]。本研究結果顯示，CLIA法檢測 HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBsAb及HBcAb的陽性率均高于ELISA法，分析原因為，CLIA法采用的固相載體為順磁性微粒，其顆粒面積較大、體積較小，在檢測中具有較大的反應面積；由于標志物可循環利用，有效延長了檢測過程中標志物的發光時間，同時可準確地顯示HBV感染的全過程，極大地提高了病毒陽性檢出率。本研究結果顯示，CLIA法檢測HBsAg的靈敏度較高，表明采用CLIA法可盡早檢出HBsAg，特別對于急性乙型肝炎患者，快速檢出HBsAg水平利于臨床盡快展開治療。

綜上所述，與ELISA法檢測比較，CLIA法在檢測HBV病毒感染性標志物中陽性率及靈敏度均較高，且重復性好，可有效避免低水平HBsAg出現的漏診及假陰性情況，較好地保證檢測結果的準確性。